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应用纳米磁珠荧光PCR检测棉花曲叶病毒 总被引：1，自引：1，他引：0
为了提供快速灵敏检测棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl virus, CLCuV)的技术以防止其传播扩散,本研究根据CLCuV外壳蛋白基因（Coat protein, CP）保守序列设计了引物和TaqMan探针,并结合纳米磁珠(Magnetic nanoparticles, MNPs)建立了该病毒的MNP实时荧光PCR (Real-time PCR)检测方法。该方法检测阈值约为525 fg·μL-1 DNA。通过对CLCuV、非洲木薯花叶病毒、烟草线条病毒、黄瓜花叶病毒及番茄斑萎病毒的检测表明,该方法具有良好的特异性;同时该方法无需任何PCR后处理,交叉污染风险小。本方法可用于CLCuV的快速检测。 相似文献
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RT-PCR快速检测3种烟草病毒技术 总被引：1，自引：0，他引：1
为了快速提取植物叶片的总RNA,并对烟草病毒进行检测,对提取及检测方法进行了研究.结果表明:以黄瓜叶片、白肋烟叶片为试材,用TRIzol试剂盒在1 h内提取到纯度高、完整性好的总RNA.设计烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的特异性引物,RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出313,326,392 bp的目的片断,而健康叶片中无此扩增带.构建这3种病毒重组质粒,对核苷酸序列与GeneBank中报道的进行比较,同源性分别为99.36%,97.55%,98.21%.用这种方法快速、可靠,为烟草病毒的检测提供科学依据. 相似文献
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为了快速提取植物叶片的总RNA,并对烟草病毒进行检测,对提取及检测方法进行了研究。结果表明：以黄瓜叶片、白肋烟叶片为试材,用TRIzol试剂盒在1 h内提取到纯度高、完整性好的总RNA。设计烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的特异性引物,RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出313,326,392 bp的目的片断,而健康叶片中无此扩增带。构建这3种病毒重组质粒,对核苷酸序列与GeneBank中报道的进行比较,同源性分别为99.36%,97.55%,98.21%。用这种方法快速、可靠,为烟草病毒的检测提供科学依据。 相似文献
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<正>日前,国家知识产权局公开一件由云南省烟草农业科学研究院和云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所共同申请的发明专利:一种烟草花叶型病毒的快速灵敏检测方法。该发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过 相似文献
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《分子植物育种》2017,(10)
本研究根据辣椒轻斑驳病毒(PMMo V)、烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的外壳蛋白(CP)编码序列设计了3对PCR检测引物,并初步建立了同步检测以上3种辣椒病毒的多重RT-PCR方法。以被感染了3种病毒的叶片的总RNA作为模板,可同时扩增到324 bp(TMV)、220 bp(PMMo V)和112 bp(CMV)的3个目标条带,在电泳图上清晰可辨。测序结果表明所扩增产物确为待检病毒靶序列。除阳性对照外,该多重RT-PCR体系不对ORSV、PVX和PVY等同属或不同属的其它病毒发生反应;该体系可检测到104倍稀释的病毒c DNA模板。同时,以建立的三重RT-PCR法对10份田间辣椒病样进行检测,其结果与单重RT-PCR结果一致,说明该法检测结果可靠,可用于PMMo V、TMV和CMV 3种辣椒病毒的同步检测。 相似文献
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山东葫芦科蔬菜上病毒病种类检测及黄瓜花叶病毒分离物的亚组鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
为了检测和鉴定山东地区葫芦科蔬菜上病毒病种类,从山东诸地11个蔬菜种植区采集了867个葫芦科蔬菜疑似感病样品。利用黄瓜花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、西瓜花叶病毒、烟草花叶病毒、小西葫芦黄花叶病毒、南瓜花叶病毒、甜瓜黄斑病毒、瓜类褪绿黄化病毒、李属坏死环斑病毒及甜瓜坏死斑点病毒等特异性引物对疑似感病样品分别进行RT-PCR检测,各病毒检出率分别为34.8%,10.4%,20.0%,41.7%,27.0%,7.8%,2.6%,1.7%,0,0.9%。表明除PNRSV外,其他9种病毒在山东各地均有发生,且CMV和TMV发病率较高,2种或2种以上病毒复合侵染也很普遍。同时为明确山东地区CMV分离物的株系分化状况,选取11个地区有代表性的CMV阳性样品,测定其外壳蛋白(Coat protein,CP)和RNA3核苷酸序列并进行序列比对和进化分析,结果显示侵染山东地区葫芦科蔬菜的CMV分离物均属于IB亚组,与韩国分离物As(AF013291)相似性最高,未发现其他株系。 相似文献
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天津地区十字花科蔬菜病毒类型及其消长规律的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本文论述了天津地区十字花科蔬菜的病毒类型.主要分为四个类型:第一类芜菁花叶病毒(TuMV),第二类烟草花叶病毒(TMV),第三类黄瓜花叶病毒(CMV),第四类称为甘兰僵矮病毒,其中以芜菁花叶病毒为主导类型.调查鉴定结果表明,本地区夏季十字花科蔬菜病毒,主要来自种株白菜.二秋小白菜,小油菜以及秋甘兰,秋萝卜可为秋季大白菜直接提供毒源和传播介体.夏季栽培的或野生的十字花科植物是秋白菜病毒病的桥梁寄主.根据病毒消长规律的研究结果提出了秋白菜病毒病的防治途径. 相似文献
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烟草病毒病（tobacco mosaic virus、cucumber mosaic virus、potato virus Y等）作为世界上一种普遍发生的烟草病害,常在烟草生产上引起巨大的损失。为了解烟草烟草病毒病在大田的空间分布情况,本研究通过田间系统调查,分析烟草病毒病的生态位特征。调查结果表明,龙岩地区烟草病毒病的寄主生态位宽度较大,随着烟草的生长,烟草病毒病的生态位宽度逐渐增大,后期数值接近0.9,表明烟草病毒病可以侵染该地区大多数烟草。同时黄瓜花叶病毒病发病率的生态位宽度为0.94,普通花叶病毒病发病率的生态位宽度为0.8256,表明黄瓜花叶病的扩展速度比普通花叶病更快。对侵染性病害的生态位进行研究可为病害进行有效的生态调控提供基础。 相似文献
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近年来烟草病毒病发生病普遍,且日趋严重,对烟草的产量及质量影响很大,使烟草行业蒙受巨大损失。鉴于此,建立有效的病毒检测技术,对烟草病毒进行防治十分重要。综述了国内外对烟草病毒的检测技术,主要包括:指示植物法、电镜检测方法、血清学方法、分子生物学方法等。 相似文献
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双重胶体金层析法快速检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒RT-PCR扩增子 总被引：1，自引：1，他引：0
番茄环斑病毒和烟草环斑病毒是我国进境检疫性有害生物,本研究建立了单个和双重胶体金层析快速检测方法,在15min即可获得对双标记PCR产物的检测结果。单个胶体金层析是在一张层析膜上点上荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点,经生物素－荧光素（或生物素－地高辛）双标记的RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到。双重胶体金层析是在一张层析膜上分别点上荧光素和地高辛的单克隆抗体作为T1和T2检测点,经生物素－荧光素和生物素－地高辛双标记的两种病毒的RT-PCR扩增产物可分别在T1和T2点上被检测到。 相似文献
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Summary Degeneration of seed tubers caused by viruses is a major constraint to potato cultivation in many warm tropical areas. Cultivars resistant to the most important viruses present a promising solution to such a problem. In a breeding study conducted at the International Potato Center (CIP), ten cultivars resistant to PLRV were crossed to five clones immune to PVX and PVY, as well as to a susceptible control. The resulting progenies were screened for PVX and PVY immunity. Afterwards, the resistant genotypes were fieldexposed to a PLRV-viruliferous aphid population. One tuber was harvested from each plant and used to assess, using ELISA serology, the presence of leafroll virus. The cultivars Serrana and Pentland Crown gave the best progenies in terms of percentage of healthy plants, with values of 47.4 and 33.3 respectively. The presence of joint infection of PLRV and PVY or PVX in the progenies of the susceptible control resulted in an increased susceptibility to leafroll. 相似文献
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利用RT-PCR对黄瓜病毒病毒原种类进行检测 总被引：1，自引：1，他引：0
根据黄瓜花叶病毒(CMV)的复制酶序列和西瓜花叶病毒2号(WMV-2)、烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜绿斑花叶病毒(CGMMV)的外壳蛋白基因序列以及南瓜花叶病毒(SQMV)的运动蛋白序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增。对2002～2003年采集的98份黄瓜病毒病样本进行了检测,结果表明,天津地区黄瓜主要毒原种类有CMV,WMV-2和TMV,感染率分别为样本数的96．94％,77．55％和38．67％,CMV和WMV-2 2种病毒的复合感染率为76．53％,3种病毒的复合感染率达到14．67％。 相似文献
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Barley yellow mosaic disease is caused by several viruses, i.e. barley yellow mosaic virus (BaYMV), barley mild mosaic virus (BaMMV) and BaYMV-2. The reaction of different barley germplasms to the barley mosaic viruses was studied in field and greenhouse experiments. The results show a complex situation; some varieties are resistant to all the viruses, while others are resistant to one or two of them only. Crosses between different barley germplasms were earned out in order to test whether genetic diversity of resistance against mosaic viruses does exist, particularly, BaMMV. A total of 45 foreign barley varieties were crossed to German cultivars carrying the resistance gene ym4. In F2 of 27 crosses, no segregation could be detected, leading to the conclusion that the resistance genes of the foreign parents are allelic with ym4 e.g. Ym1 (‘Mokusekko 3’) and Ym2 (‘Mihori Hadaka 3’). A total of 18 crosses segregated in F2 indicating that foreign parents, like ‘Chikurin Ibaraki 1’, ‘Iwate Omugi 1’, and “Anson Barley”, carry resistance genes different from the gene of German cultivars, e.g. ‘Asorbia’ or ‘Franka’. By means of statistical evaluation (Chi2-test), the observed segregation ratios were analyzed in order to obtain significant information on the heredity of resistance. All the resistance genes described here as being different from the gene ym4, act recessively. Most of the exotic varieties seem to carry only one resistance gene. In a few cases, more than one gene may be present. 相似文献