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相似文献
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1.
米渣是大米深加工的副产物,加工过程中因淀粉被利用而留下蛋白质,因而米渣中大米蛋白含量高。大部分米渣经干燥后主要用作饲料,为了使其米渣中的蛋白质得到进一步的开发和利用,探讨了米渣蛋白的提取工艺。近年来,超声技术广泛应用于样品的前处理和提取工艺,分析了超声波处理、碱性蛋白酶处理及超声协同蛋白酶作用对米渣蛋白提取率的影响。分析了料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度和超声时间等因素对米渣蛋白提取率的影响。并在单因素试验的基础上,通过正交试验优化确定了米渣蛋白的最佳提取条件,即料液比1∶10,超声功率500 W,超声时间80 min,酶反应时间100 min,加酶量1 650 U/g,酶解温度55℃。在此最优提取工艺下蛋白质提取率为82.80%。  相似文献   

2.
针对大米蛋白提取方法不够完善的情况,综述目前常见的大米蛋白分离提取方法,包括碱法提取、酶法提取、分步水解法、复合提取法、溶剂提取法、物理分离法,并分析其优缺点,以期为大米蛋白的提取工艺研究提供借鉴。  相似文献   

3.
葡萄酒皮渣提取花色苷研究应用进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
我国葡萄资源丰富,葡萄加工业中会产生大量废弃的葡萄皮渣。葡萄皮渣中含有丰富的花色苷,具有抗氧化及保护视力等功能。因此,探索工业水平从葡萄酒皮渣中提取花色苷方法对于高效利用我国葡萄资源具有积极意义。通过概述葡萄花色苷的研究进展,包括色素的提取纯化法、分析测定方法、生理活性功能等,展望了从葡萄皮渣中提取花色苷的发展前景。  相似文献   

4.
为了提高薏米蛋白的提取得率,确定提取pH、料液比、提取温度、提取时间对蛋白提取率的影响,进一步得到薏米蛋白SDS-PAGE电泳图谱。采用碱法提取薏米蛋白,通过响应面回归分析,得到碱法提取薏米蛋白的优化工艺条件并且进行SDS-PAGE凝胶电泳分析薏米蛋白电泳图谱。结果表明,碱法提取薏米蛋白的优化工艺条件为料液比为1:11.8,提取时间4.93 h,提取温度为35℃,提取pH 10.47。在最优条件下,薏米蛋白提取率达到43.94%。薏米蛋白SDS-PAGE凝胶电泳分析,薏米蛋白电泳图谱共分离出2条蛋白亚基条带,较大薏米蛋白亚基分子量143 kD,较小薏米蛋白亚基分子量为85 kD。通过响应面碱法提取薏米蛋白,提取率明显提高,采用SDS-PAGE法对薏米蛋白进行分析,为构建薏米蛋白质指纹图谱提供理论依据。  相似文献   

5.
为了获得甜菜叶片双向电泳中蛋白质最佳提取方法,建立甜菜叶片蛋白质双向电泳最佳的双向电泳体系。以甜菜叶片为材料,通过比较分析,研究甜菜叶片总蛋白提取方法、IPG胶条pH值及其对应上样量等因素对甜菜叶片蛋白质双向电泳结果的影响。结果表明:酚提取法、TCA/丙酮提取法和可溶性蛋白提取法3种蛋白提取方法中TCA/丙酮法提取效果较好,pH值4~7与pH值5~8的双向蛋白电泳比较发现:pH值4~7胶条蛋白点清晰且在图谱上的蛋白点分布均匀,无蛋白点集中现象,更适合甜菜叶片的蛋白质组分析。采用7 cm线性固相IPG胶条进行双向电泳,150μg上样量蛋白点明显增多,双向电泳效果更好,pH值4~7的17 cm胶条300μg上样量胶点更多更清晰,试验结果为甜菜蛋白质组学的研究提供了最佳的试验方法。  相似文献   

6.
酶—超声提取金丝枣渣多糖方法的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
采用酶—超声提取法,从金丝枣渣中提取多糖,用苯酚—硫酸比色法测定多糖含量。探讨了提取金丝枣渣多糖的工艺条件,为酶—超声提取在工业生产上的应用积累参数。结果表明,提取金丝枣渣多糖的最佳工艺条件:提取时间为20min,浸提剂倍数为40,pH值为5.5,提取次数为2次,提取温度为50℃,酶加量为1.5%,多糖提取率为37.13%。此方法是一种简单快捷和高效的提取方法。  相似文献   

7.
蛋白质提取方法和电泳条件是蛋白质组学研究中双向电泳的关键。本文初步建立起一套适合圆果种黄麻功能叶总蛋白双向电泳(2-DE)分析的高效提取方法及电泳条件,在双向电泳技术中,比较了TCA丙酮、Tris-base/丙酮、Tris-HCl的蛋白提取方法,并优化了上样量和样品制备方法。结果表明, TCA丙酮法提取蛋白质产量高,达79.0 mg g–1,比Tris-base/丙酮法和Tris-HCl的产量分别高出44.2%和114.1%。该法得到的2-DE图谱背景清晰,蛋白点数最多,约602个,较其他两种方法更适合用于黄麻功能叶总蛋白双向电泳分析;350 mg为最佳上样量。这为黄麻蛋白质组学后续研究奠定了基础。  相似文献   

8.
以碎米为原料,通过米蛋白提取,淀粉液化、糖化、调味、均质、杀菌等一系列工艺,研制出一种口感良好、老少皆宜且营养丰富的米蛋白饮料。其中蛋白提取离心后的淀粉可以进行液化、糖化,产生葡萄糖液,并加入到米蛋白提取液中进行调味,这样就可以在不额外添加其他甜味剂的情况下研制出米蛋白饮料。多余的糖液还可以用于生产葡萄糖口服液,充分利用原料,以提高经济效益和大米的综合利用价值。  相似文献   

9.
玉米总蛋白质提取技术和蛋白质样品浓度测定方法的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
玉米组织蛋白质的提取及其浓度测定是进行玉米蛋白质组学研究的关键步骤。本研究以玉米叶片和花丝为试材,从总蛋白提取数量和质量方面比较分析了磷酸缓冲液法、Tris法、改进Tris法、TCA-acetone(三氯醋酸-丙酮沉淀)法、Plant Total Protein Extraction Kit试剂盒法及其改良法等6种玉米总蛋白质提取方法。同时,又比较分析了Bradford法、2-D Quant Kit试剂盒法和紫外分光光度法(UV法)等3种方法测定蛋白质浓度的准确性。结果表明:(1)总蛋白提取数量按大小顺序为:试剂盒法试剂盒改良法改进Tris法Tris法TCA-acetone法磷酸缓冲液法;(2)总蛋白提取质量依质量优劣为:试剂盒法试剂盒改良法TCA-acetone法改进Tris法Tris法磷酸缓冲液法;(3)Bradford法与2-D Quant Kit法测定的蛋白质浓度均是准确的,且没有显著差异;但是UV法测定的蛋白质浓度欠准确。经综合考虑,改进Tris法用于SDS-PAGE分析,试剂盒改良法用于2-DE分析,Bradford法用于测定蛋白质浓度是经济有效的方法。这对玉米蛋白质组学的研究具有参考价值。  相似文献   

10.
不同提取方法对RA外膜蛋白SDS-PAGE的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
分别用Sds法、Sarkosyl法、PMSF法提取鸭疫里氏杆菌的外膜蛋白,经SDS-PAGE电泳,显示,三种方法都能提取到鸭疫里氏杆菌的外膜蛋白,但电泳条带却有一定差异;相比之下,Sds法最适于鸭疫里氏杆菌外膜蛋白的提取;几种方法提取的其他分子量外膜蛋白质是否属于鸭疫里氏杆菌的外膜蛋白抗原需要进一步研究。  相似文献   

11.
利用超声法辅助提取光皮木瓜渣中的多酚,考察了乙醇浓度、料液比、超声时间、提取温度等因素对提取量的影响。通过单因素试验和正交试验确定了光皮木瓜渣多酚提取的适宜工艺条件为:乙醇体积分数55%,料液比1∶17,超声时间40 min,提取温度60℃,在此优化条件下,光皮木瓜渣多酚提取量为9.73%;该类光皮木瓜渣多酚粗提液具有较强的抗氧化活性,是一类具有开发价值的天然抗氧化剂。  相似文献   

12.
为了建立适用于水稻(Oryza sativa L.)种子蛋白质组分析的双向电泳方法,本研究比较了三氯乙酸/丙酮法和改良的酚提取法对水稻种子蛋白的提取效果,不同蛋白提取液上样量、不同p H梯度(p H 3~10和p H 4~7)IPG胶条对水稻种子蛋白的分离效果。结果表明:在目前的双向电泳体系下,采用改良的酚提取法,24 cm p H 4~7线性IPG胶条,上样量1 200~1 500μg的条件可以获得分辨率高、重复性好、胶内蛋白点适用于后续质谱分析的双向电泳图谱。最后本实验通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)对10个随机挑选的胶内蛋白质点进行了初步蛋白质鉴定分析,进一步确定了改良的酚提取法可以适用于水稻种子蛋白质双向电泳分析。  相似文献   

13.
玉米籽粒蛋白质双向电泳技术体系的优化   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了获得玉米籽粒双向电泳中蛋白质提取的最佳方法,建立最佳的玉米籽粒蛋白双向电泳技术体系,对酚抽提法、三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA/丙酮沉淀法)和可溶性蛋白提取法3种不同提取方法得到的蛋白质进行了分析,并在相同条件下进行双向电泳比对分析,结果表明:可溶性蛋白提取法获得的蛋白纯度高、浓度适中、双向电泳蛋白质点最丰富,最适合双向电泳研究;利用可溶性蛋白提取法获得的蛋白,对第一向等电聚焦参数等条件,以及不同p H值范围的IPG预制凝胶条进行了比较分析,结果表明:采用p H值3~10的IPG预制凝胶条时,采取电压梯度上升的方式,总聚焦70 000 Vhs、上样量800μg效果最佳,采用p H值4~7的IPG预制凝胶条时,总聚焦80 000 Vhs、上样量900μg效果最佳,并且采用p H值4~7的IPG预制凝胶条相比p H值3~10的凝胶条能分离到更多的点,最后结合蛋白质点MALDI-TOF-TOF质谱鉴定分析,建立了一套适用于玉米籽粒的蛋白质双向电泳技术方法,即采用可溶性蛋白提取法提取蛋白,采用24 cm、p H值4~7的IPG干胶条,上样900μg电泳效果最佳,等点聚焦程序:500 V、1 h,1 000V、1 h,2 000 V、1 h,4 000 V、2 h,8000 V、4 h,8 000 V、80 000 Vhs,500 V保持。试验研究为后续玉米籽粒发育差异蛋白研究奠定了技术基础。  相似文献   

14.
棉叶总蛋白提取及SDS-PAGE电泳的改良   总被引:1,自引:0,他引:1  
对棉花叶片总蛋白的几种提取方法及影响蛋白定量和SDS-PAGE电泳的因素进行了比较,确立了一套适用于棉花蛋白提取、定量、凝胶制备、电泳、脱色以及干胶制备的方法。发现利用25mmol·L1,pH8.0Tris-HCl缓冲液提取的棉花叶片总蛋白,提取效率高,蛋白齐全。采用改良后的棉花SDS-PAGE电泳方法—改良丙酮沉降法,电泳结果显示,条带清晰、数量多、分辨率高。  相似文献   

15.
本研究以向日葵幼苗为材料,比较TCA-丙酮提取法、Tris饱和酚提取法以及水溶法三种提取蛋白的方法,并且对双向电泳技术进行研究,初步建立向日葵幼苗蛋白的双向电泳体系。研究结果表明,用Tris饱和酚提取法提取蛋白含量最高,经蛋白定量后显示含量可达43.359 ug/u L;用不同浓度分离胶进行SDS-PAGE凝胶电泳,结果显示用8%分离胶可分离条带数较多,最多可分离20条蛋白条带;用不同聚焦时间以及不同上样量进行双向电泳,结果显示一向IEF聚焦时间为6 h左右,上样量为1 mg的条件较为适合,用Image Master5.0软件分析检测到蛋白点为102个。  相似文献   

16.
橡胶树C-乳清三种蛋白提取方法双向凝胶电泳分析   总被引:2,自引:1,他引:1  
摘要:C-乳清是胶乳的主要组分,就双向凝胶电泳技术而言,目前仍无有效的蛋白提取方法,这严重制约了双向凝胶电泳技术在橡胶树蛋白组分析上的应用。本文选取3种方法提取C-乳清蛋白,通过对蛋白产量和提取蛋白的双向凝胶电泳图谱分析系统评价3种方法。就蛋白产量而言,三氯乙酸/丙酮沉淀法产量最高(0.86 mg/ml C-乳清),三氯乙酸沉淀法次之(0.72 mg/ml C-乳清),酚提取法最低(0. 66 mg/ml C-乳清)。双向凝胶电泳图谱分析表明:酚提取法可检测到447个蛋白点,图谱背景较暗且横纵向纹理多;三氯乙酸沉淀法可检测到821个蛋白点,图谱背景居中;三氯乙酸/丙酮沉淀法可检测到1052个蛋白点,图谱背景清晰且基本无纹理。综上所述,三氯乙酸/丙酮沉淀法最适合C-乳清蛋白提取。本文首次系统评价C-乳清蛋白提取方法,必将推动橡胶树C-乳清蛋白研究发展。  相似文献   

17.
为建立适合甜瓜(Cucumis melo L.)叶片蛋白质组分析的双向电泳体系(2-D),以甜瓜植物叶片为试验材料,比较了2种不同植物叶片蛋白的提取方法,并对双向电泳的2个重要的环节技术即聚焦参数和上样量进行了优化。结果表明:与Tirs-酚提取法相比,使用改良后的Mg/NP-40/PEG3350/TCA丙酮提取法提取叶片蛋白,经过SDS-PAGEF分析之后,所得的蛋白含量较高,Rubisco酶去除的较好,条带清晰。采用 pH 3~10,18 cm的IPG胶条进行双向电泳时,适当增加低电压聚焦时间,得到了较为清晰的2-D图谱。蛋白上样量为800 μg时,得到的蛋白点数最多,低峰度蛋白较为清晰。研究建立了适用于甜瓜叶片蛋白分析的双向电泳体系,得到了蛋白点数目多且分辨率高的双向电泳图谱。为下一步在蛋白组学水平上分析与甜瓜抗病、产量、性状等相关蛋白提供了技术支持。  相似文献   

18.
采用正交试验设计方法从冷破碎苹果皮渣中提取多糖,研究了超声提取功率、提取温度、提取时间、料液比对多糖提取效果的影响,确定了冷破碎苹果皮渣多糖的最佳组合。结果表明,冷破碎苹果皮渣多糖最优提取条件为:提取时间为120min,料液比为1∶40,提取温度为70℃,超声功率为200W,在此条件下可得最大提取率9.53%。  相似文献   

19.
对棉花根系蛋白的双向电泳提取技术进行改良,以获得更好的分离效果,为棉花根系蛋白质组学研究奠定基础。以鲁棉研28为材料,分别采用TCA/丙酮法、改良TCA/丙酮/SDS法、饱和酚-甲醇醋酸铵法这3种根系蛋白质提取方法,提取棉花幼苗根系总蛋白,并进行双向电泳进行蛋白质分离。在蛋白质含量、蛋白纯度和电泳图谱等方面对3种方法进行比较。利用饱和酚-甲醇醋酸铵提取法提取的棉花根系蛋白,其蛋白样品纯度高,SDS-PAGE电泳图谱清晰,蛋白点数量最多为601个点;TCA/丙酮法提取得到的蛋白总量最高约为7.53 mg/g,但样品纯度低,SDSPAGE电泳图谱模糊,蛋白点数量最少为417个点。采用考马斯亮蓝染色,上样量为1 500μg获得的凝胶图谱效果较好。总之,适合棉花根系蛋白质提取的方法为饱和酚-甲醇醋酸铵法,在考马斯亮蓝染色蛋白质上样量为1 500μg时能获得优良的分离效果。  相似文献   

20.
通过综述玉米胚芽蛋白的营养价值、功能特性和3种不同的提取方法 (碱溶酸沉法、酶法、反胶束萃取法),简要分析了玉米胚芽蛋白的功能特性及其影响因素,为进一步综合利用玉米胚芽蛋白提供理论参考。  相似文献   

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