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[目的]通过对分离纯化的C型肉毒毒素抗原性分析,提供快速鉴定动物因C型肉毒梭菌中毒的理论基础.[方法]对分离纯化的C型肉毒梭菌的肉毒毒素灭活后通过SDS - PAGE测定浓度,确定浓度后与弗氏佐剂乳化后免疫家兔,免疫结束后采家兔血液并分离血清.[结果]将不同稀释倍数的肉毒毒素经SDS -PAGE电泳分离后,转移至HybondNC膜,家兔三免后提取的血清作为一抗,用二抗进行Western blotting检测,大约在98.0和53.0 kDa处出现特异反应带;抗原与抗体在琼脂凝胶上结合时,会形成清晰的沉淀带.[结论]分离纯化的C型肉毒毒素,经免疫后家兔可见:C型肉毒毒素具有免疫原性和反应原性,抗体的效价为1∶8. 相似文献
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《甘肃农业大学学报》2018,(6)
肉毒梭菌长期进化形成了独特的旱地(草地)和湿地两套自然循环机制,厌氧和产芽胞是成就其自然循环最合理的进化选择.肉毒梭菌本身无侵袭力,致病性全取决于毒素,即肉毒神经毒素(肉毒素)(botulinum neurotoxins,BoNTs,botulin),致野生及家养脊椎动物肉毒中毒(botulism).据肉毒素抗原性将其分为不同的血清型(毒素型),目前已鉴定的毒素血清型已超过40个,产生肉毒素的细菌按遗传关系可分为7个种.毒素抗原性虽不同,但空间结构均相似,均含3个功能域:HC受体结合域、HN穿膜域和LC活性域.BoNTs-LC具Zn~(2+)依赖蛋白酶活性,降解外周运动神经元的突触融合复合体蛋白,从而阻断神经递质释放,致肌肉麻痹. 相似文献
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肉毒素是肉毒梭菌产生的一类神经性毒蛋白,其分子量大,结构复杂,毒性极强。新疆属于肉毒素食物中毒的多发地区。研究表明肉毒素蛋白分子中不含色氨酸,在肉毒毒素原样中发现有游离色氨酸,说明色氨酸是肉毒梭菌特有的代谢产物。色氨酸在浓硫酸和微量Fe~(3+)存在下与乙醛酸缩合成红紫色物质,可以进行此色法测定,曾有效地用以测定粮食中色氨酸含量。作者将此法用于测定肉毒梭菌培养液中色氨酸,这将有助于探明肉毒梭菌代谢过程中关于色氨酸的产生机制。 相似文献
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肉毒毒素是肉毒梭菌在代谢过程中所产生的一类神经性毒蛋白,有A、B…G七型,分子量较大,均可溶于水,毒性极强。我国出现肉毒中毒达14个省(区),其中以新疆为最,其次是西藏和青海;新疆主要为A、B二型,青藏高原主要为E型;大都是因误食未蒸煮或蒸煮不够的被肉毒毒素污染的发酵豆制品、腊肉和牛羊肉所致。 相似文献
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一起水貂肉毒梭菌中毒的诊治 总被引：1，自引：0，他引：1
水貂肉毒梭菌中毒是由于食入含有肉毒梭菌毒素的肉类饲料引起的一种急性致死性中毒病,以呈现运动中枢神经麻痹和延脑麻痹症状为特征[1]。肉毒梭菌的芽孢分布广泛,动物肠道内容物、粪便、腐败尸体、腐烂饲料中经常含有肉毒梭菌。该菌在动物尸体、肉类、饲料内繁殖产生毒素[2]。 相似文献
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水貂肉毒梭菌病是由C型肉毒杆菌毒素引起水貂瘫痪、呼吸困难、尿失禁等肌肉痉挛症状的一种剧烈的细菌毒素中毒性疾病,是目前已知的毒性最强的细菌性毒素,对水貂养殖业危害极为严重。本病虽然在水貂养殖一线发病率较低,但是死亡率几乎可达100%,近几年发病有所增多,而且临床症状出现细微变化。本文以一例水貂肉毒梭菌中毒症的诊治经验与广大水貂养殖同仁分享,以供参考。 相似文献
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为了对A型产气荚膜梭菌α毒素快速准确地做出检测,本实验利用厌氧肉肝汤培养A型产气荚膜梭菌,经革兰染色观察以及含铁牛奶培养基观察其生化特性.然后使用饱和度为60％的硫酸铵粗提其α毒素蛋白,进行透析纯化并应用SDS - PAGE方法鉴定A型产气荚膜梭菌的α毒素,鉴定之后将纯化的α毒素给小鼠腹腔注射来检测其活性.结果表明,厌氧肉肝汤培养基变浑浊且产生大量气体,含铁牛奶培养基发生爆烈发酵现象,SDS - PAGE检测结果,α毒素分子量为43.6kDa,小白鼠出现梭菌病的典型临床症状.本实验为α毒素的鉴定及大量快速提取提供了一种参考方法,为进一步开展梭菌毒素的致病机理及制备类毒素疫苗奠定重要的实验基础. 相似文献
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成功克隆了A型肉毒毒素重链C片段部分基因．以肉毒梭菌(62A)基因组DNA为模板，以此基因特异性引物为介导，采用Touchdown PCR方法，从肉毒梭菌基因组中扩增出目的基因片段后，将其克隆入T载体，进行酶切鉴定和序列分析．结果表明，此基因片段与(Genbank中的BoNTa基因(收录号：M30196)核苷酸序列的同源性为100％，说明目的基因得到了成功地克隆，为后续研究奠定了基础． 相似文献