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1.
【目的】探讨壳聚糖对鸭肠炎病毒（duck enteritis virus, DEV）gC基因疫苗免疫反应的影响。【方法】应用壳聚糖作为DEV gC基因疫苗（pcDNA-DEV-gC）递送载体,采用肌肉注射和口服单次免疫Balb/c小鼠50µg剂量基因疫苗,并以肌注不同剂量裸质粒组、弱毒组和生理盐水组作为对照,分别检测不同疫苗免疫后的细胞、体液和黏膜免疫水平。【结果】肌注壳聚糖疫苗组诱导小鼠产生较肌注裸质粒50µg组和口服壳聚糖疫苗组高的细胞和体液免疫反应,且产生与弱毒疫苗相似的细胞免疫应答,但弱毒疫苗诱导体液免疫的能力更强,仅口服壳聚糖疫苗组产生粘膜免疫。【结论】上述研究结果表明壳聚糖具有一定的佐剂效应,为获得更有效的DEV gC基因疫苗提供了新策略,但该疫苗的推广应用还有待于对影响疫苗免疫效果的各因素进行进一步优化。 相似文献
2.
【目的】利用DNA改组技术（DNA shuffling）对不同谱系的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF5基因进行体外重组,构建具有良好交叉保护作用的DNA疫苗,为研制新型PRRSV疫苗提供参考。【方法】利用DNA改组技术对PRRSV谱系1、3、5.1、8.7毒株的ORF5基因进行体外突变重组,筛选去除信号肽的重组突变体。将重组突变体与真核表达载体pCAGGS-HA连接,构建重组表达质粒并进行酶切和测序鉴定,经脂质体转染MARC-145细胞,利用间接免疫荧光试验（IFA）和Western blotting试验检测目的蛋白的表达情况。将重组质粒pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46（ORF5基因重组的DNA疫苗）免疫小鼠,试验同时设pCAGGS-HA空载体组、PBS空白对照组、弱毒疫苗组（经典弱毒疫苗Ingelvac PRRS MLV,MLV组）和pCA-ORF5-MLV组（ORF5基因来自Ingelvac PRRS MLV）,评估其免疫效果。【结果】筛选到2个去除信号肽的重组突变体（ΔORF5-8和ΔORF5-46）。成功构建重组表达质粒pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46,其可在MARC-145细胞中表达GP5蛋白。与pCAGGS-HA空载体组和PBS空白对照组相比,pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46组免疫小鼠血清白介素4（IL-4）和干扰素γ（INF-γ）含量均极显著提高（ORF5＜0.01）,脾淋巴细胞增殖能力均极显著增强（ORF5＜0.01）,均能产生针对GP5蛋白的抗体,血清中和试验表明,免疫组小鼠血清能对异源毒株产生交叉中和抗体（抗体平均滴度为10～16）。【结论】重组DNA疫苗pCA-ΔORF5-8和pCA-ΔORF5-46均能有效刺激并诱导机体产生细胞及体液免疫应答,具有良好的免疫原性。 相似文献
3.
为探明呼肠孤病毒(GCRV)外衣壳蛋白VP7基因工程亚单位疫苗产生的抗体效价水平和免疫保护力,用RTPCR方法,从GCRV中扩增到VP7基因片段,并克隆至原核表达载体pET28a(+)中,得到重组质粒pETVP7,酶切鉴定后,将pETVP7转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,产生的重组蛋白经变性和复性后,按0.5、1.0、2.0 mg/尾的注射剂量分为3个免疫组,以等体积的氢氧化铝为佐剂进行注射。经SDSPAGE电泳分析,发现了相对分子质量为34 000的蛋白表达带;Western Blot检测结果显示表达的蛋白具有很好的抗原性;间接凝集试验结果表明,3个免疫组均有抗体产生;攻毒试验结果表明,0.5、1.0、2.0 mg/尾重组蛋白剂量组的保护率分别为90%、85%、90%,对照组为0,表明所构建的疫苗具有较好的免疫作用。 相似文献
4.
以寻求有效DNA疫苗黏膜免疫途径为目的，利用带有负电荷的具有黏膜粘附性多糖-壳聚糖来包裹口蹄疫DNA疫苗pcD～VP1形成纳米级颗粒，用此颗粒经滴鼻、口服、直肠和生殖道4种黏膜免疫小鼠，检测小鼠的针对口蹄疫的体液和细胞免疫水平。结果显示：壳聚糖／pcD-VP1滴鼻免疫小鼠，抗体的高峰来临比只免疫pcD-VP1提前2周。直肠免疫处理中也呈现如此效果；经口服和生殖道途径的免疫，均没有呈现比pcD-VP1免疫组更好的抗体水平。但壳聚糖／pcD-VP1在生殖道和直肠免疫途径里均比pcD-VP1免疫组P．P．结的T细胞增殖水平高。所以。除口服途径以外，在滴鼻、直肠和生殖道免疫中，壳聚糖对质粒的包裹均一定程度上提高了DNA疫苗黏膜免疫的效果。 相似文献
5.
为研究壳寡糖对三疣梭子蟹免疫功能的影响,设置了含壳寡糖0.0、0.5、1.0、1.5和2.0 g/kg（分别为T0、T1、T2、T3和T4组）的5组试验饲料饲喂三疣梭子蟹,分别在第10 d、20 d和30 d取血清进行酚氧化酶（PO）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、溶菌酶（LSZ）和过氧化物酶（POD）活性的测定,试验结束时测定血细胞的密度。结果显示,在基础饲料中添加适量的壳寡糖可以显著性提高ACP、T-SOD、LSZ、POD活力（P〈0.05）,对PO和AKP活力促进效果不显著（P〉0.05）。壳寡糖可以显著提高三疣梭子蟹血细胞密度（P〈0.05）,对3种血细胞所占比例有一定的影响（P〉0.05）。综合考虑,T2、T3组对三疣梭子蟹免疫促进效果较好,建议基础饲料中壳寡糖添加量为1.0～1.5 g/kg。 相似文献
6.
【目的】研究不同断奶模式对仔猪免疫器官指数以及免疫球蛋白A（IgA）、IgG、IgM含量的影响。【方法】选用27窝“杜×长×大”仔猪,随机分为3个试验组,分别为常规断奶组（C组）、喷洒气味剂组（S组）和先混群后断奶组（M组）,每组3个重复,每个重复3窝。C组仔猪28日龄进行常规断奶、混群;S组仔猪28日龄断奶、混群,同时每天向仔猪身上喷洒体积分数2%戊二醛溶液,持续喷洒7 d;M组仔猪21日龄原地混群,28日龄断奶。断奶后第8天称试验猪体质量,解剖采集扁桃体、脾脏、胸腺、下颌淋巴结、腹股淋巴结,称取其质量,计算免疫器官指数;刮取空肠和回肠黏膜,采集血液分离血清,ELISA方法测定肠黏膜和血清中IgA、IgG、IgM和白介素2（IL-2）的含量。【结果】与C组相比,S组免疫器官指数均提高,除脾脏和下颌淋巴结指数差异不显著（P＞0.05）外,其他均差异显著（P＜0.05）;M组免疫器官指数均显著高于C组和S组（P＜0.05）。S组回肠黏膜、M组空肠和回肠黏膜中IgA、IgG、IgM含量均较C组显著提高（P＜0.05）,S组空肠黏膜中IgA、IgG、IgM含量与C组无显著差异（P＞0.05）, M组空肠和回肠黏膜中IgM含量均较S组显著提高（P＜0.05）。S组血清中IgA、IgM含量较C组显著提高（P＜0.05）,M组血清中IgA、IgM、IgG含量均较C组显著提高（P＜0.05）,M组IgG含量显著高于S组（P＜0.05）。S组回肠黏膜中IL 2含量显著高于C组（P＜0.05）,M组肠黏膜和血清中IL 2含量均显著高于C组和S组（P＜0.05）。【结论】在仔猪体表喷洒体积分数2%戊二醛溶液和先混群后断奶的断奶模式均能减轻仔猪断奶应激,提高免疫器官指数,增强机体免疫应答水平,其中先混群后断奶模式的效果更优。 相似文献
7.
为研究壳寡糖(COS)对大熊猫轮状病毒(GPRV)重组蛋白VP6-VP7的免疫增强作用,以原核表达的重组VP6-VP7蛋白为抗原,添加浓度为2.0 mg·mL-1 COS作为免疫佐剂制成GPRV VP6-VP7-COS亚单位疫苗。选取SPF级昆明小鼠78只随机分为4组。PC组免疫纯化的重组VP6-VP7蛋白,A组免疫VP6-VP7-COS疫苗,B组免疫VP6-VP7氢氧化铝胶佐剂疫苗,NC组注射PBS(对照组)。在0、15、30 d进行免疫接种,每次接种完成后于每周每组随机挑选6只小鼠采血分离血清,分别检测小鼠血清IgG、IgA抗体效价、T淋巴细胞转化率、细胞因子的含量,评估COS对GPRV重组VP6-VP7蛋白诱导的免疫应答反应的调节作用。试验结束后,取各组小鼠注射部位的肌肉组织进行病理组织学分析,以评价COS作为免疫佐剂的安全性。结果表明,VP6-VP7-氢氧化铝胶佐剂组、VP6-VP7-COS组免疫小鼠血清中所产生的IgG均显著(P<0.05)高于其他各组。VP6-VP7-COS组小鼠产生的IgA抗体含量显著(P<0.05)高于其他各组,VP6-VP7-氢氧化铝胶佐剂组和VP6-VP7-COS物理混合组诱导T淋巴细胞增殖的能力显著(P<0.05)高于VP6-VP7蛋白组。VP6-VP7-COS组、VP6-VP7-氢氧化铝胶佐剂组中IL-2、IL-4、IL-5及IFN-γ的含量均显著(P<0.05)高于其他组,组织病理学分析结果表明,以COS作为佐剂的VP6-VP7亚单位疫苗免疫小鼠后注射部位的肌肉组织未出现病理变化。本研究表明,GPRV重组蛋白VP6-VP7能够显著诱导动物机体的免疫应答,壳寡糖对GPRV VP6-VP7蛋白呈现较好的免疫增强效果。本研究为研制安全、无副作用和高免疫保护力的GPRV 亚单位疫苗提供了参考。 相似文献
8.
为探究长江刀鲚TH1细胞、MIF、IL-10、TNF-α、IgM、IgT和IgD的常规水平及异尖科线虫寄生所导致的免疫变化,采用ELISA法分别测定了空白组和3个寄生组的脾脏、头肾和血清中7种免疫分子的表达水平。结果显示：（1）空白组脾脏、头肾和血清中免疫分子水平均表现为IgD（P<0.01）> IgM(P<0.001）>IgT（P<0.001）> MIF(P<0.001)> TH1细胞(P>0.05)>TNF-α(P>0.05)>IL-10,且血清中免疫分子水平显著高于脾脏和头肾（P < 0.001）;（2）各寄生组脾脏中7种免疫分子水平均显著高于空白组（P<0.001）,头肾中除IgM外的6种免疫分子水平均显著高于空白组（P<0.05）,血清中仅IL-10水平显著高于空白组（P<0.001）;（3）整体而言,长江刀鲚寄生组IL-10水平随着寄生数量增加而下降,TH1细胞随着寄生数量的增加呈下降后上升趋势,MIF、TNF-α、IgD、IgM和IgT则与TH1细胞相反,且脾脏（IgT、TNF-α、TH1细胞、MIF、IgM）、血清（TH1细胞、IgD、IL-10、TNF-α）和头肾（IgT、TNF-α）中免疫分子水平与寄生虫数量间的相关关系均达到显著水平。综上,异尖科线虫寄生可增加长江刀鲚免疫分子的表达水平,诱导炎症反应和适应性免疫反应的发生,脾脏、头肾和血清中部分免疫分子水平与异尖科线虫数量间的相关性显著,其中血清TH1细胞、脾脏中IgT和TNF-α可作为长江刀鲚应对异尖科线虫寄生的免疫功能测定优选指标。 相似文献
9.
传染性法氏囊病病毒DNA疫苗的免疫原性研究 总被引：5，自引：0，他引：5
将传染性法氏囊病病毒弱毒株 (IBDV JD1)和强毒株 (IBDV ZJ2 0 0 0 )的基因组A节段全长cDNA、多聚蛋白 (VP2 /VP4/VP3)和主要宿主保护性抗原 (VP2 )基因 ,分别克隆入两种真核表达载体pCI和 pcDNA3,构建成 12种真核表达质粒。将制备的DNA疫苗以 2 0 0 μg的剂量经腿肌和皮下结合途径首免 14日龄SPF鸡 ,2 8日龄以相同的剂量二免 ,二免后 14d攻击IBDV标准强毒BC6 / 85株。结果表明 ,含A节段或多聚蛋白基因的表达载体均能诱导较高水平的中和抗体并能提供对强毒的免疫保护 ,多聚蛋白基因构建成的DNA疫苗与弱毒苗B87的免疫效果相当 ;编码VP2基因的DNA疫苗仅能诱导很低水平的中和抗体 ,几乎不能提供免疫保护 ;以 pCI为表达载体的免疫效果优于pcDNA3;源于ZJ2 0 0 0株基因构建成的DNA疫苗诱导的免疫反应优于JD1株 ,提示DNA疫苗的免疫效果与VP2蛋白的构象、表达载体的调控元件和毒株差异等因素有关。 相似文献
10.
拟通过比较魔芋甘露寡糖（konjac mannan oligosaccharide,KMO）、复合芽孢杆菌（compound bacillus,CB）和复合酶制剂（compound enzyme preparation,CEP）对肉兔生产性能、免疫特性及血液生化指标的影响，筛选更为理想的替抗添加剂。将200只（35±2）日龄、健康状况良好、体重相近的生长期伊拉肉兔随机分为5个处理组，每组5个重复，每个重复8只兔。预试期7 d，正式期35 d。结果表明：CB和CEP组肉兔平均日增重显著高于空白对照组和KMO组（p<0.05）；抗生素对照组、CB组和CEP组料重比显著低于空白对照组和KMO组（p<0.05）;CEP组肉兔腹泻率和死亡率最低。添加CB、KMO、CEP对肉兔免疫器官指数没有显著影响（p>0.05）。CB、CEP和抗生素对照组血清TP含量高于空白对照组（p<0.05）;CB组肉兔血清TC含量显著高于空白对照组和抗生素对照组（p<0.05）。CB组、KMO组、CEP组肉兔血清IgM含量均显著高于空白对照组（p<0.05）,CEP组肉兔血清IgM含... 相似文献
11.
桑黄口服液对小鼠免疫功能的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验探讨了由桑黄液体发酵液提取桑黄多糖制成的口服液对小鼠免疫功能的影响.结果表明,与对照组相比,桑黄口服液高剂量组(40 mL.kg-1)能显著增加小鼠的胸腺和脾脏的重量,中剂量组(20 mL.kg-1)、高剂量组能显著提高小鼠碳粒廓清率的吞噬指数,腹腔巨噬细胞的吞噬百分率由对照组的13.7%分别提高到22.2%和34.7%,差异达极显著水平.可见桑黄口服液具有提高网状内皮系统功能的作用,可显著增强免疫功能. 相似文献
12.
将含不同浓度三七总皂甙(PNS)的饲料(0、10、50、250 mg·kg-1)连续14 d投喂大黄鱼,检测肝、脾、头肾组织部分免疫相关基因的表达,以及血清部分免疫因子的活性,结合人工注射感染变形假单胞菌的抵抗力,评估口服PNS对大黄鱼免疫功能的影响。实验结果显示,各浓度组大黄鱼血清超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)活性与对照组相比无显著差异;高浓度组(250 mg·kg-1)大黄鱼脾组织粘病毒抗性蛋白(Mx)的相对表达水平显著高于对照组,中浓度组(50 mg·kg-1)脾组织和低浓度组(10 mg·kg-1)头肾组织的Mx相对表达水平略高于对照组,但差异不显著;各浓度组各组织肿瘤坏死因子α链(TNF-α)的相对表达水平与对照组无显著差异,但均低于对照组;各浓度组各组织中白细胞介素10(IL-10)和主要组织相容性复合体Ⅱ类α链(MHCⅡ-α)的相对表达水平与对照组无显著差异。感染变形假单胞菌后各浓度组大黄鱼的死亡率与对照组无显著差异。结果表明,饲料中添加10~250 mg·kg-1的PNS连续投喂14 d未能明显增强大黄鱼免疫机能。 相似文献
13.
甲壳动物细胞及体液免疫机理的研究进展 总被引：39，自引：0，他引：39
根据国内外的有关资料,对甲壳动物细胞及全液免疫进行了简要的评述，其机体的免疫防御功能主要依赖于血细胞的吞噬，包掩等细胞免疫反应，但目前对于血细胞的分类及各自的功能尚无定论，甲壳动物体液吵具有免疫球蛋白，缺乏抗体介导的免疫反应，其体液免疫主要是指血淋巴中的一些酶和调节因子，如酚氧化酶原激活系统，落血素，凝集素，溶菌酶，蛋白酶抑制剂等。 相似文献
14.
[目的]研究不同种类寡糖对仔猪免疫力和生产性能的影响。[方法]选择75头7日龄二元杂交仔猪（大约克夏×荣昌猪）,随机分为5组,每组15头。分别在每组基础日粮中添加7.5g/kg的异麦芽寡糖、果寡糖、甘露寡糖和混合寡糖,同时设对照组。试验期为53d。在试验过程中,观察临床症状和腹泻情况,每周称重,并记录采食量。饲喂至30日龄和60日龄时,前腔静脉采血,测定免疫指标。[结果]添加7.5g/kg的异麦芽寡糖或果寡糖能显著提高30日龄仔猪的细胞免疫功能（P〈0.05）,前者还能显著提高体液免疫功能;添加7.5g/kg的甘露寡糖能显著提高60日龄仔猪的细胞和体液免疫功能（P〈0.05）,对仔猪生产性能的促进效果最好,且腹泻率最低。[结论]不同种类寡糖对仔猪免疫力和生产性能的影响存在差异。 相似文献
15.
将含萧山鸡白细胞介素2基因的真核表达质粒pCI-IL-2的减毒鼠伤寒沙门氏茵ZJ111(ZJ111/pCI-IL-2)口服接种小鼠和雏鸡,并与传染性法氏囊病病毒(IBDV)DNA疫苗联合免疫雏鸡观察其免疫效力.结果表明:利用减毒沙门氏菌作为栽体的鸡白细胞介素2口服免疫增强剂具有相对的安全性,重组ZJ111/pCI-IL-2茵能明显增强IBDV DNA疫苗对强毒株攻击保护率;增强IBDV DNA疫苗诱导的抗体的效价(P＜0.05);增强IBDV DNA疫苗所诱导的T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖反应(P＜0.05),上述结果初步表明以减毒沙门氏菌为载体的白细胞介素2免疫增强剂具有良好的安全性和免疫增强作用,为研制低成本、实用化的禽类口服免疫增强剂奠定了基础. 相似文献
16.
玫瑰茄多糖对小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
张赛男 《辽宁农业职业技术学院学报》2015,(1):1-2
玫瑰茄多糖设置低、中、高3个剂量组和1个对照组,给(SPF)小鼠连续灌胃4周,以脾淋巴细胞转化功能、迟发性变态反应(DTH)、溶血空斑数、半数溶血值(HC50)等为指标,观察瑰茄多糖对小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响。结果表明:与对照组比较,脾淋巴细胞转化功能、迟发性变态反应(DTH)、溶血空斑数、半数溶血值(HC50)测定实验均有显著提高作用。其中,高剂量组对小鼠迟发型变态反应能力(DTH)影响、半数溶血值(HC50)达到极显著水平(P0.01),高剂量组对小鼠溶血空斑数的影响达到显著水平(P0.05)。说明玫瑰茄多糖具有增强小鼠体液免疫功能和细胞免疫功能的作用。 相似文献
17.
18.
用MDV-gB重组痘苗病毒RVV-gB，HVT冻干苗、痘苗病毒WR株分别按试验程序，对细胞免疫及体液免疫检测试验中的1日龄SPF鸡进行免疫接种，并于15日龄对各组小鸡攻GA株强毒，后经过IFA检测抗体，以及以PHA为有丝分裂原检测淋巴C转化。结果表明，重组病毒和HVT冻干苗均获得较高保护，体液免疫差异不显著；细胞免疫在攻毒前差异不显著，但攻毒后第2d开始，RVV-gB组淋巴细胞转化率明显高于HVT冻干苗。? 相似文献
19.
乳酸菌株植物乳杆菌和粪链球菌对肉鸡免疫性能的影响 总被引：6，自引：0，他引：6
将植物乳杆菌和粪链球菌2株乳酸菌分别添加到肉鸡饲料中,通过检测免疫器官指数、胸腺和脾脏的T细胞百分数、白细胞吞噬率、红细胞花环率、血清中新城疫(ND)血凝抑制(HI)抗体效价等指标,探讨了乳酸菌对肉鸡免疫性能的影响.结果表明,2株乳酸菌均能够促进肉鸡胸腺、脾脏和法氏囊的发育,增强白细胞的吞噬功能,增加胸腺和脾脏中的T细胞数,提高E-C3bR和E-ICR的花环形成率,以及提高机体产生ND疫苗HI抗体的水平. 相似文献
20.
为了探索马鼻狂蝇幼虫感染的细胞和体液免疫情况,选取在呼和浩特屠宰场收集到的8例马鼻狂蝇幼虫感染的蒙古马为感染组,以5匹健康蒙古马为对照组。马咽部切片HE(haematoxylin and eosin)染色发现感染组马的咽部巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞增多,咽部黏膜增生、坏死,出现不同程度增生性炎（2龄和3龄幼虫寄生处）。通过对感染组马鼻腔分泌黏液、血液间接酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和咽部组织免疫组化方法检测,发现在感染组马鼻腔分泌的黏液和血清中有大量特异性IgG抗体;马咽部出现大量分泌IgG阳性细胞。初步探索了马鼻狂蝇幼虫感染马的病理变化和免疫机制。 相似文献