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相似文献
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1.
牛精子膜用非离子去污剂 NP-40增溶,经固相凝集素亲和层析,初步分离了精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白,经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色显示出了四条蛋白质带,分子量分别为78,60.42和33 kD。用分离到的糖蛋白制备抗血清,对牛精子进行免疫细胞化学标记,结果顶体区显示为强阳性,与麦芽凝集素亲和细胞化学的染色一致。用抗血清处理精子再进行亲和细胞化学染色时,顶体区的麦芽凝集素结合糖残基多数被封闭,揭示麦芽凝集素结合糖残基是构成抗原决定簇的成分。  相似文献   

2.
H—Y抗血清的制备,检测与应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
用纯系(BALB/e)雄性小鼠制备H-Y抗原对雌性大鼠进行免疫,可获得特异性的H-Y抗体。经初步检测,H-Y抗血清的效价为1:32。用ELISA检测结果为阳性反应,抗血清与鼠精子有特异性抑制的凝集作用,凝集反应的程度随抗血清的稀释而降低,对牛的Y精子也有特性抑制,经抗血清感作过的年精子荧光反应消失。曾两次用H-Y抗血清感作过的牛精液对母牛进行体外界输精。试验结果雌性比率分别达到81.80%和805  相似文献   

3.
H-Y抗血清的制备、检测与应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
要用纯系(BALB/e)雄性小鼠制备H-Y抗原对雌性大鼠进行免疫,可获得特异性的H-Y抗体。经初步检测,H-Y抗血清的效价为1:32。用ELISA检测结果为阳性反应,抗血清与鼠精子有特异性抑制的凝集作用,凝集反应的程度随抗血清的稀释而降低,对牛的Y精子也有特异性抑制,经抗血情感作过的牛精子荧光反应消失。曾两次用H-Y抗血清感作过的牛精液对母牛进行体外输精,试验结果雌性比率分别达到81.80%和80%。  相似文献   

4.
为了对精子膜凝集素受体进行定量测定,建立了一种 HRP-凝集素分光光度法,并筛选确定了适宜的测定条件。该方法的主要步骤为:①调节精子浓度;②用 HRP-凝集素孵育精子样品及对照;③加入底物显色;④离心后以分光光度法测定样品和对照上清中游离 HRP-凝集素量。精子膜凝集素受体量以精子样品 OD 值与对照 OD 值之差(即标记到精子膜上的凝集素量)表示。对同一精子样品分别进行三种凝集受体定量的重复试验表明,该法具有良好的再现性。本方法可用于精子膜特性的研究和某些雄性(或男性)不育的诊断。  相似文献   

5.
两种有胃真骨鱼胃肠胰系统中内分泌细胞的鉴别与定位   总被引:23,自引:0,他引:23  
使用4种哺乳动物抗血清;胰高血糖素(Glu),胃泌素(Gas),生长抑素(Som)5-羟色胺(5-HT),采用过氧化物酶标记的链霉亲和素(S-P法)免疫细胞化学技术,对尼罗非鲫和短盖巨脂鲤(白鲳)的胃肠胰(GEP)内分泌系统进行了研究。结果表明:2种鱼的消化道和胰岛都不同程度地存在APUD细胞的分布。除了Glu在消化道中为阴性外,其余3种抗体在2种鱼的消化道中均有阳性特异性反应,其中5-HT细胞最  相似文献   

6.
目的:提取伤寒沙门氏菌SOD,研究SOD的抗原性及为进一步研究SOD与细菌毒力的关系提供材料。方法:经硫酸铵分级沉淀,DEAE纤维素柱层析提取伤寒沙门氏菌SOD。用聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质染色及酶活性染色鉴别SOD纯度。采用原子吸收分光光度法和酶活性抑制试验检测SOD的辅基。将提取的SOD免疫家兔制备兔抗SOD血清,用双向琼脂扩散试验和抗体对酶活性抑制试验分析伤寒沙门氏菌SOD的抗原性。结果:所提取的SOD比活性为3270U/mg,其纯度达到了电泳纯,辅基为Fe原子。双向琼脂扩散试验结果显示抗伤寒沙门氏菌Fe-SOD血清与牛红细胞SOD不形成沉淀线,抗血清可抑制伤寒沙门氏菌及鼠伤寒沙门氏菌Fe-SOD和Fe/Mn-SOD活性,对Mn-SOD活性无抑制作用。结论:伤寒沙门氏菌Fe-SOD与牛红细胞SOD无交叉反应,但和鼠伤寒沙门氏菌SOD之间有共同抗原,也提示SOD的辅基似乎决定了其抗原特异性  相似文献   

7.
桃蚜口针中病毒附着位点的免疫荧光标记定位   总被引:4,自引:0,他引:4  
桃蚜体内病毒附着位点为65 ̄80μm,距下颚口针尖端约40μm,能亲和CMV-T,而无能力获得CMV-NT。伴刀豆凝集素(ConA)仅能与口针表面的VAS发生亲和作用,推测VAS是一种具有病毒受体属性的糖蛋白物质。  相似文献   

8.
桃蚜体内病毒附着位点(VAS)为65~80μm,距下颚口针尖端约40μm,能亲和CMV-T,而无能力获得CMV-NT,伴刀豆凝集素(COnA)仅能与口针表面的VAS发生亲和作用,推测VAS是一种具有病毒受体属性的糖蛋白物质。  相似文献   

9.
 用自己设计的酶标凝集素法测定了乳用牛、乳肉兼用牛、中国美利奴羊、澳洲美利奴羊新鲜和冷冻精子表面的麦芽凝集素(WGA)受体、大豆凝集素(SBA)受体及伴刀豆球蛋白A(Con A)受体的相对数量。在乳用牛精子,冷冻后WGA受体数量显著下降(P< 0.01),穿透实验表明WGA受体数量与精子的穿透率呈高度正相关(r=0.86),另两种受体的数量在冷冻后无显著变化,与精子的穿透率也无相关关系。在乳肉兼用牛精子,冷冻后数量显著下降的是SBA受体(P< 0.01)在中国美利奴羊精子是WGA受体(P< 0.05)和Con A受体(P< 0.05),而在澳州美利奴羊精子三种受体的数量均无显著变化。  相似文献   

10.
为了探索荧光染色技术在犬精液品质检测中的应用,将犬精子标记相应的荧光染料,用荧光显微镜观察精子的质膜完整性、线粒体活性与顶体完整性.在荧光显微镜下,死精子经PI染色后,头部核区呈红色;具有活性线粒体的精子经Rh123染色后,尾部中端线粒体部分呈现绿色荧光;顶体完整的精子经FITC-PNA染色后,顶体区可见绿色强荧光.说明PI染色、Rh123染色及FITC-PNA染色分别用于评价精子质膜完整性、线粒体活性和顶体完整性,是评价犬精液质量的有效方法.  相似文献   

11.
一株无致病力的嗜水气单胞菌的分离与特性分析   总被引:5,自引:2,他引:5  
从南京某无病鱼塘水体中分离到一株革兰氏阴性、有运动力的短杆菌,定名为W-1株。其生化特性为氧化酶阳性,发酵葡萄糖产酸产气,发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖,不发酵肌醇。从该菌株培养物的上清中提取的外毒素,具有细胞毒性与溶血性;用嗜水气单胞菌HEC毒素的单抗进行检测,乳胶凝集试验及Dot-ELISA均呈阳性结果。电镜观察未发现该菌株有晶格样排列的S层和菌毛,与J-1株S蛋白抗血清及R菌毛抗血清作免疫转印  相似文献   

12.
应用针对鸡马立克病毒(MDV)糖蛋白B(gB)抗原单克隆抗体IAN86制备亲和层析柱,从感染重组杆状病毒(gB-AcNPV)的昆虫细胞中提纯鸡MDVgB基因重组产物,获得较好效果。提纯的蛋白质在SDS-pAGE中出现的5条条带中有4条在免疫印迹试验中出现,其分子量为100,60,49,40kd占蛋白总量的54.7%。试验证明用单克隆抗体亲和层析法提纯MDVgB基因重组产物是一个行之有效的方法。  相似文献   

13.
化橘红多糖的分离纯化及其组成的气相色谱分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:从化橘红中提取分离多糖,并对其化学组成进行研究。方法:化橘红经醚提醇提后的药渣用热水提取,乙醇沉淀,Sevag试剂脱蛋白,CTAB(溴化十六烷基三甲胺)络合物分离纯化;用气相色谱法对其组成进行研究。结果:分离得到的水溶性多糖经Sephadex G-200凝胶柱层析,硫酸-酚法证实为单一多糖,紫外光谱显示不含蛋白和核酸类物质。化橘红多糖是由D-木糖,D-葡萄糖,D-半乳糖,L-阿拉伯糖,D-甘  相似文献   

14.
棉花种子超氧物歧化酶粗提液经PAGE分离及NBT染色,显示出7条SOD同工酶谱带。研究发现棉花种子SOD同工酶具有一定的热稳定性,且在变性剂SDS作用下仍保持一定活性,但β-疏基乙醇和脲试剂能使之失活。经用氮仿-乙醇和KCN处理,证实棉花种子SOD均为Cu-Zn-SOD。  相似文献   

15.
哈尔滨地区大麦黄矮病毒株系鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
从黑龙江省哈尔滨地区田间采集典型小麦黄矫病株25份,用无毒麦二叉蚜,禾谷缢管蚜传毒,经生物学分离并用BYDV-GAV,PAV,RPV,SGV四种抗血清静 进行酶联免疫吸附测定。结果表明:25份标样中由麦长管蚜和麦二叉物有22份,与GAV抗血清有强反应,而与PAV,RPV,SGV抗血清无反应。  相似文献   

16.
油菜花药中酯酶和柱头中角质酶的提纯   总被引:2,自引:0,他引:2  
油菜授粉时期花粉药和柱头总蛋白质提取液经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,花药中酯酶用α-乙酸蔡酯和β-乙酸萘酯染色,柱头中角度质酶用4-Methylumbelliferul butyrate染色。切下的酶带纯化后,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,酯酶分子量约为31KD,角质酶分子量约为37KD。  相似文献   

17.
大片吸虫分泌排泄抗原的分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
取广西牛源大片吸虫成虫制备出分泌排泄(ES)抗原,用SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色显出7条蛋白带,免疫印迹试验(EITB)测出其主要特异性免疫成分分子量为36.3,28.5及25.5kD其中28.5与25.5kD与法国肝片吸虫ES的部分抗原成分相同,两种片形吸虫与抗血清可以交叉使用无特异性,但与日本血吸虫抗原及抗血清均无交叉反应,人工感染大片吸虫2周后的兔血清即能识别此抗原,ES抗原提取方法  相似文献   

18.
棉花凝集素的抽提和专一性结合糖的测定   总被引:1,自引:0,他引:1  
用pH7.2,0.05mol/LTris-HCL缓冲液从高抗枯萎病棉花品种86-1种子脱脂粉中抽提出棉花凝集素,测定其专一性结合糖。结果表明:棉花凝集素的专一性结合糖是D-半乳糖、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、D-葡萄糖,棉花凝集素最适pH为6-8,具有较高的抗热性。  相似文献   

19.
在已论述粉蓝烟草花柱S-糖蛋白分离和测序的基础之上,本文报道了离体培养条件下,纯化的S-糖蛋白对花粉萌发及花粉管生长的影响。在培养基中加入S-糖蛋白时,不同来源的花粉均能顺利萌发,但是同源花粉管生长却被特异性地抑制,而非同源花粉则能继续正常生长。在优化离体培养条件下,花粉管生长速率仍低于在活体上的生长速率。与对照相比,加入S-糖蛋白后,花粉管生长长度变异性增加。另外,即使绝大多数同源花粉管生长被S  相似文献   

20.
1989─1992年间对杭州等地一串红(Salviasplendens)花叶病的发生及其病原进行了系统研究,从病株上分离得到的17个病毒分离物,经生物学和血清学反应测定均符合黄瓜花叶病毒(CMV)的特点。病毒分离物M-22不能经由桃蚜传播使黄苗榆等供试寄主发病。用0.5mol/L磷酸钾盐缓冲液对M-22进行提纯,提纯病毒经醋酸铀负染,测定其粒子大小为30.2nm。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定M-22的外壳蛋白分子量约为28kD,经琼脂双扩散测定,M-22与几个已知CMV抗血清均有强阳性反应,M-22与一个番茄不孕病毒(TAV)抗血清有阳性反应,但其抗血清与供试TAV抗原无阳性反应。ELIsA反应测定结果表明,M-22与一个来自于十字花科大白菜上的CMV分离物和一个来自于前科烟草上的CMV分离物,在血清学关系上有明显差异。根据实验结果,作者认为目前在杭州等地侵染一串红的病原病毒主要是CMV,侵染一串红的CMV分离物M-22可能是一个独立的血清型.  相似文献   

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