氟苯尼考人工抗原的合成与鉴定     

孙法良  刁有祥  刘悦竹  孙宁  马艳芳 《福建农业学报》2009,24(1)

采用混合酸酐(MA)法,将氟苯尼考(FFC)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)连接,制备人工免疫抗原FFC-HS-BSA和包被原FFC-HS-OVA,经紫外扫描(UV)、凝胶电泳 (SDS-PAGE)、红外扫描光谱(IR)和动物免疫试验证实人工抗原合成成功.  相似文献   

有机磷农药三唑磷人工抗原合成及鉴定     

黄魁英  雷红涛  孙远明 《安徽农业科学》2011,39(32):19843-19844

[目的]合成并鉴定有机磷农药三唑磷人工抗原。[方法]采用活泼酯法将三唑磷半抗原（TZPM-Hap）与牛血清蛋白（BSA）和卵血清蛋白（OVA）偶联,制备出免疫抗原（TZPM-A-BSA）和包被抗原（TZPM-A-OVA）,并通过紫外扫描和动物免疫试验对其进行了鉴定。[结果]紫外扫描和动物免疫试验结果表明人工抗原合成成功。[结论]为制备单抗及开发快速、简便的三唑磷ELISA试剂盒奠定了基础。  相似文献   

氟苯尼考多克隆抗体的制备及其鉴定     

朱爱荣  霍如林  张林  高峰  周光宏 《江苏农业科学》2015,(2)

为了制备可用于检测氟苯尼考的特异性多克隆抗体,采用戊二醛法合成氟苯尼考的人工抗原FFA－BSA、FFA－OVA、紫外分光光度计进行鉴定,用FFA－BSA免疫BALB／C雌性小鼠获得可用于检测氟苯尼考的特异性多克隆抗体,并用间接ELISA法对其进行特异性鉴定。结果显示：经过紫外扫描鉴定,成功合成了人工抗原合 FFA－BSA和FFA－OVA,偶联比分别为12∶1和11∶1。制备的抗体效价低于1∶32000,抑制率为50％（ IC50）时的氟苯尼考浓度为36．9 ng／mL。可见,本试验制备的氟苯尼考多克隆抗体具有较好的亲和力和高特异性,有良好的应用价值。  相似文献   

氟苯尼考胺人工抗原的合成与鉴定     

常超  张怡  伍金娥 《安徽农业科学》2014,(13):4029-4031

[目的]合成并鉴定氟苯尼考胺人工抗原.[方法]采用水解的方法制备了氟苯尼考胺,并通过紫外、红外、质谱鉴定氟苯尼考胺水解成功.采用戊二醛法合成了氟苯尼考人工抗原,并通过紫外光谱进行鉴定.免疫大白兔制备了氟苯尼考胺高特异性抗体.[结果]通过紫外、红外、质谱鉴定氟苯尼考胺水解成功,抗体效价达6.4×104.[结论]氟苯尼考胺人工抗原合成成功,为建立FFA免疫化学方法奠定了技术基础.  相似文献   

食品中残留喹乙醇人工抗原的制备与鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

张景艳  杨志强  李建喜  王学智  孟家仁  张凯  张艳 《安徽农业科学》2009,37(5)

[目的]合成喹乙醇人工抗原。[方法]通过化学合成方法,将喹乙醇与琥珀酸酐反应,合成半抗原喹乙醇半琥珀酸酯(OLA-HS),通过活泼酯化法将半抗原与载体蛋白偶联制备喹乙醇全抗原。[结果]TLC、紫外光谱法的鉴定结果表明,目标半抗原合成成功;紫外光谱法鉴定结果表明,全抗原合成成功。[结论]建立了一种喹乙醇半抗原及全抗原的合成方法,为进一步制备喹乙醇抗体奠定基础。  相似文献   

改良重氮法合成米诺环素人工抗原及结果鉴定     

纪淑娟  曹维  杜阿楠 《沈阳农业大学学报》2010,41(5)

分别采用重氮法、戊二醛法及改良重氮法将米诺环素半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原,3种方法的偶联比分别为5∶1,10∶1和15∶1;紫外光谱、红外光谱、凝胶电泳对改良重氮法合成的人工抗原进行鉴定,成功合成了人工抗原;将改良重氮法合成的人工抗原MNC-BSA免疫BALB/C小鼠,用间接ELJSA法测定抗体效价及其特异性.结果表明:小鼠血清抗体效价均在1∶12800以上,为研究制备米诺环素单克隆抗体奠定了基础.  相似文献   

桔青霉素人工抗原合成及偶联比测定     

李娇  钟理  田世民  金涌  崔艳芬  任香夫  祁淑红  刘畅 《安徽农业科学》2010,38(36)

[目的]建立一种快速准确测定人工抗原偶联比的方法。[方法]通过载体蛋白BSA合成桔青霉素人工抗原,用SDS-PAGE电泳法、紫外吸收法、质谱法对其进行鉴定。[结果]经过3种方法的鉴定,桔青霉素人工抗原偶联成功,紫外吸收法测得其偶联比为8.4,质谱法测得其偶联比为6。[结论]对3种供试方法比较发现,质谱法能够快速鉴定人工抗原而且能够准确测定人工抗原的偶联比。该研究为桔青霉素克隆抗体的制备及建立桔青霉素的酶联免疫检测方法奠定了基础。  相似文献   

桔青霉素人工抗原合成及偶联比测定(摘要)(英文)   总被引：1，自引：0，他引：1  

李娇  钟理  田世民  金涌  崔艳芬  任香夫  祁淑红  刘畅 《农业科学与技术》2010,(8):169-172

[目的]建立一种快速准确鉴定和测定人工抗原偶联比的方法。[方法]通过载体蛋白BSA合成桔青霉素人工抗原,用SDSPAGE电泳法、紫外吸收法、质谱法对其进行鉴定和测定。[结果]经过3种方法的鉴定,桔青霉素人工抗原偶联成功,紫外吸收法测得其偶联比是8.4,质谱法测得其偶联比是6。[结论]对3种供试方法比较发现,质谱法能够快速鉴定人工抗原而且能够准确测定人工抗原的偶联比。  相似文献   

硫代磷酸酯类农药通用抗原的合成与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘喜保  温万东  祁志军 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2012,40(4):95-101

【目的】合成具有硫代磷酸酯类农药共性结构的系列半抗原,制备此类农药的通用人工抗原。【方法】以烷氧基硫代磷酸盐和卤代羧酸为原料合成半抗原,采用¹HNMR、¹³CNMR及EIS-MS谱图对其结构进行表征。将合成的半抗原分别通过活性酯法、混合酸酐法与牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（OVA）偶联,制备免疫人工抗原和包被人工抗原。用紫外扫描法定性分析人工抗原的偶联情况,用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）法间接测定其偶联比。【结果】合成了H1～H6 6种具有硫代磷酸酯类农药共性结构的半抗原,其中H1、H2为包被半抗原,H3～H6为免疫半抗原。制备了H1-OVA、H2-OVA、H3-BSA、H4-BSA、H5-BSA、H6-BSA、H2-BSA、H4-OVA和H6-OVA 9种人工抗原,其偶联比分别为9∶1、10∶1、23∶1、26∶1、39∶1、43∶1、28∶1、14∶1和12∶1。【结论】成功合成硫代磷酸酯类农药的人工抗原,为下一步用其免疫动物制备抗体进而进行有机磷农药酶联免疫分析奠定了基础。  相似文献   

抗克百威多克隆抗体的研制   总被引：20，自引：4，他引：20  

朱国念  杨挺  吴银良 《中国农业科学》2002,35(8):1025-1029

 以 2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃酚为反应原料经两步化学反应合成了 2种克百威半抗原 :6 [[(2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃基氧 )羰基 ]氨基 ]己酸 (BFNH)和 4 [[(2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃基氧 )羰基 ]氨基 ]丁酸 (BFNB)。通过活性酯法和混合酸酐法将半抗原与载体蛋白 (BSA、OVA)偶联制备了克百威的人工抗原。利用BFNH BSA和BFNB BSA分别免疫日本大耳白家兔获得了 2种抗克百威的多克隆抗体 :抗BFNH BSA抗体和抗BFNB BSA抗体 ,并用间接竞争ELISA方法测定了 2种抗体的效价。  相似文献   

呋喃唑酮代谢物人工抗原的合成及半抗原偶联比的测定     

曾磊  周常义  苏国成 《安徽农业科学》2013,41(3):961-962,1022

[目的]合成呋喃唑酮代谢物人工抗原,并测定该半抗原偶联比。[方法]通过混合酸酐法将羧基化改造的小分子抗原AOZ与HSA偶联后,运用紫外光谱分析判断合成的结果,并计算小分子抗原与蛋白的偶联比率。[结果]该试验成功合成了呋喃唑酮代谢物AOZ,对其进行羧基化改造后与载体蛋白HSA成功偶联,偶联比经测定为4∶1。[结论]利用紫外光谱分析测定小分子抗原偶联比率的方法简便,可靠性强。  相似文献   

溴氰菊酯人工抗原合成及鉴定     

张献忠  李培武  张文  丁小霞  张奇  张金阳  李涛 《勤云标准版测试》2008,(7)

 以二溴菊酸和3-[(4-硝基苯)氧基]苯甲醛为原料经4步反应合成了溴氰菊酯半抗原1-氰基[3-(4-氨基苯)苯基]甲基-2,2-二甲基3-(2,2-二溴乙烯基)环丙烷羧酸酯;用重氮化法将溴氰菊酯半抗原分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）相偶联制备免疫抗原和包被抗原,紫外吸收法估算偶联比分别为11:1和8:1;以BSA偶联物作免疫抗原免疫日本大耳白兔制备溴氰菊酯多克隆抗体,间接非竞争ELISA法测定2个抗血清效价分别为100000和80000,间接竞争ELISA法初步测定农药浓度50μg/ml时抑制率达到80%以上,为研究建立溴氰菊酯农残免疫快速测定方法奠定了基础。  相似文献   

恩拉霉素人工抗原的合成与鉴定     

叶健强  余华  康润敏  严玉宝  谢晶  胡娟  廖党金  周岷江  肖璐  崔鹏博  曹冶  叶勇刚  于吉锋  李兴玉  林毅  潘梦  魏甬  戴卓建 《湖北农业科学》2019,(7)

建立酶联免疫方法以检测食品中恩拉霉素的残留,采用戊二醛法,偶联半抗原恩拉霉素(Er)和载体牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA),制备人工免疫抗原和人工包被抗原,分别为Er-BSA和Er-OVA。经紫外光谱鉴定,在紫外270～280 nm波长处得到Er-BSA和Er-OVA特征性偶联吸收峰。试验结果表明人工合成的2个人工抗原均偶联成功。人工免疫抗原和人工包被抗原的偶联比均达到26∶1,为进一步制备抗血清和酶联检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   

磺胺对甲氧嘧啶全抗原的制备研究   总被引：16，自引：0，他引：16  

周兰香  王宗元等 《江苏农业研究》2001,22(4):55-58

采用戊二醛法，将半抗原磺胺对甲氧嘧啶（SMD）与载体牛血清白蛋白（BSA）偶联，制得碘胺对甲氧嘧啶全抗原SMD－BSA。其紫外扫描光谱和红外光谱表明偶联成功。通过改变半抗原SMD和偶联剂戊二醛的用量，制得多种结合比的全抗原，这为进一步制备抗SMD抗体提供了良好的免疫原。  相似文献   

苦参碱人工抗原的合成与鉴定     

李颖  马志卿  冯俊涛 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2012,40(9):96-102

【目的】合成并鉴定苦参碱人工抗原,以获取具有特异性和高亲和性的苦参碱多克隆抗体,为建立苦参碱的酶联免疫分析方法奠定基础。【方法】通过对槐果碱不饱和双键进行亲核加成、叠氮化、催化氢化合成苦参碱半抗原13氨基苦参碱(ST),并经MS、NMR法对其结构进行鉴定;采用戊二醛法将半抗原与载体蛋白偶联合成苦参碱的人工抗原(ST-BSA和ST-OVA),经紫外光谱扫描法、SDS-PAGE法、红外光谱扫描法对人工抗原进行鉴定;将制备的苦参碱人工抗原免疫健康新西兰大白兔获得苦参碱的多克隆抗体,通过间接非竞争ELISA方法测定其效价。【结果】成功合成了一种苦参碱半抗原13-氨基苦参碱(ST),与载体蛋白BSA、OVA偶联后得到了免疫原(ST-BSA)和包被原(ST-OVA),免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,效价达到128 000。【结论】成功合成了苦参碱人工抗原,为苦参碱免疫分析方法的研究提供了条件。  相似文献   

兔抗双酚A多克隆抗体的制备     

石春红  姚卫蓉  孙秀兰  纪丽君 《安徽农业科学》2010,38(8):3886-3888

[目的]通过动物免疫制备抗双酚A多克隆抗体。[方法]采用双酚A半抗原（BPAH）和双酚酸（DPA）分别与牛血清蛋白（BSA）偶联制备免疫抗原,免疫新西兰白兔获得抗血清;采用间接竞争ELISA法测定抗血清的效价。[结果]经紫外扫描及红外光谱分析,完全抗原BPAH-BSA及DPA-BSA制备成功;供试3只阳性大白兔的抗血清效价分别为〉51200、25600和12800,完全抗原BPAH-BSA免疫的大白兔抗血清效价高于DPA-BSA免疫的大白兔抗血清效价。[结论]该研究成功制备了高效价抗双酚A多克隆抗体。  相似文献   

甲氧苄氨嘧啶人工抗原的合成及鉴定     

职爱民  刘庆堂  邢广旭  杨继飞  张改平 《河南农业科学》2010,(3)

用重氮化方法将甲氧苄氨嘧啶(TMP)偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成了免疫抗原BSA-TMP和包被抗原OVA-TMP,并用紫外扫描、SDS-PAGE和动物免疫试验进行了鉴定。结果表明,半抗原TMP和载体蛋白偶联成功。人工抗原BSA-TMP的成功合成,为TMP单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了基础。  相似文献   

磺胺间甲氧嘧啶全抗原的制备研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张改平  职爱民  瞿明仁  王自良  王选年  李青梅  邢广旭  杨继飞  柴书军  刘庆堂  石团员  宋志超 《河南农业科学》2006,(3):96-100

采用重氮化法，将半抗原磺胺间甲氧嘧啶（SMM）与载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联，制得磺胺间甲氧嘧啶全抗原SMM—BSA和SMM—OVA。通过其紫外扫描光谱、SDS—PAGE凝胶电泳试验，表明半抗原和载体成功偶联，免疫动物以后可以产生满意效价。这另进一步制备抗SMM抗体提供了良好的免疫原。  相似文献   

磺胺对甲氧嘧啶全抗原的制备研究     

周兰香  徐忠民  李幼荣  王宗元 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2001,22(4):55-58

采用戊二醛法 ,将半抗原磺胺对甲氧嘧啶 (SMD)与载体牛血清白蛋白 (BSA)偶联 ,制得磺胺对甲氧嘧啶全抗原 SMD-BSA。其紫外扫描光谱和红外光谱表明偶联成功。通过改变半抗原 SMD和偶联剂戊二醛的用量 ,制得多种结合比的全抗原 ,这为进一步制备抗 SMD抗体提供了良好的免疫原  相似文献   

二氯喹啉酸人工抗原的合成     

魏松红  王娟  李兴海  东琴  王振 《江苏农业科学》2013,(7):302-304

以3,7-二氯-8-喹啉羧酸、草酰氯、5-氨基戊酸(Q-5)为原料合成二氯喹啉酸半抗原,再采用碳二亚胺法将半抗原与载体蛋白[牛血清蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)]偶联合成相应的人工抗原。将半抗原用红外(IR)和核磁共振(1H-NMR)进行结构表征,通过紫外扫描证明二氯喹啉酸人工抗原(Q-5-BSA、Q-5-OVA)合成成功,且Q-5-BSA、Q-5-OVA的结合比分别为21∶1、17∶1。人工抗原的合成为研制二氯喹啉酸多克隆抗体及免疫试剂盒奠定了基础。  相似文献