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相似文献
 共查询到18条相似文献,搜索用时 806 毫秒
1.
【目的】OsRRK1(rop-interacting receptor-like kinase 1)属于胞质类受体激酶RLCK Ⅵ家族成员,通过对OE-OsRRK1转基因水稻的叶片形态观察,明确OsRRK1在水稻叶片发育中的作用。【方法】依据水稻基因组数据库公布的目标序列设计引物并构建OsRRK1超量表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化转入到粳稻品种合江19,通过PCR分析鉴定阳性植株,Southern blot鉴定转基因植株插入外源基因的拷贝数,Northern blot杂交和qRT-PCR鉴定转基因植株在RNA水平的表达情况;选取T2代纯合植株抽穗期的剑叶进行叶片卷曲指数(leaf rolling index,LRI)测定;通过石蜡切片和苯胺蓝染色观察水稻横切后泡状细胞的变化情况,用Image J软件统计泡状细胞的面积;采用叶绿素测定计测量植株叶片叶绿素含量。【结果】共获得OE-OsRRK1转基因阳性植株44株,随机选取17株,经Southern blot鉴定8株为单拷贝株系,9株为多拷贝株系;随机选取2份多拷贝株系(OE-1和OE-4)和5份单拷贝株系(OE-5、OE-21、OE-22、OE-24和OE-25)用于后续试验。经分析发现OsRRK1在不同的转基因株系中具有不同程度的过表达情况,其中OE-1、OE-4和OE-25株系超量表达程度高,OE-5株系超量表达程度低,OE-21、OE-22和OE-24株系超量表达程度居中。从中选取OE-5、OE-22和OE-25共3份单拷贝转基因株系和WT对照经Northern blot鉴定后与qRT-PCR结果一致。统计选取的7个株系和WT对照的叶片卷曲指数发现:卷曲程度与OsRRK1表达量呈正相关,表达量越高卷曲程度越高。水稻叶片经切片和染色后发现OE-OsRRK1转基因植株叶片中泡状细胞发生了明显变化,转基因株系中泡状细胞数目都小于对照中泡状细胞均值4.6个。叶片卷曲得越明显,泡状细胞退化得越严重,数目更少,面积更小。经叶绿素含量测定发现,OE-22、OE-24和OE-25转基因的水稻叶片的叶绿素含量比野生型水稻叶片叶绿素含量高。【结论】过量表达OsRRK1会影响泡状细胞的数目和面积,从而使水稻叶片发生卷曲,且卷曲程度与表达量呈正相关;OsRRK1在水稻中的过量表达导致叶绿素含量增高。  相似文献   

2.
用不同质量浓度的Basta和卡那霉素作为转基因选择剂,对普通白菜品种(品系)杭州油冬儿和75#幼苗进行处理,以确定筛选转基因植株的最佳浓度。结果表明,杭州油冬儿和75#对Basta敏感性几乎相同,喷施Basta溶液的最适质量浓度均为20 mg/L,且最佳喷施次数为7次;2个品种对卡那霉素略有差异,杭州油冬儿的最佳质量浓度为100 mg/L,75#则为75 mg/L。  相似文献   

3.
为了更加方便有效地利用Basta来筛选带草铵磷(PPT)抗性Bar基因的转基因拟南芥,对不同时期喷洒不同浓度Basta的效果进行了研究。结果表明:拟南芥转化体刚长出2片真叶时对Basta比较敏感,此时开始喷施效果比较好;PPT含量为13.5%的情况下,稀释2 000~4 000倍喷施效果好,此时既可有效筛选出阳性苗,又不会抑制阳性苗的生长;第一次喷施后6天左右移栽阳性苗较好,此时可以明显区分出阳性苗,且移栽后缓苗快、长势好。  相似文献   

4.
旱作水稻喷施6—苄基腺嘌呤的防早衰及增产效应   总被引:17,自引:0,他引:17  
用大田随机区组设计研究了叶面喷施 6 苄基腺嘌呤 (6 BA)对旱作水稻衰老及产量的影响。结果表明 ,喷施 6 BA能显著提高旱作水稻叶面积指数及叶绿素含量 ,降低丙二醛 (MDA)含量 ,对旱作水稻有很好的防早衰及增产效果 ,增产幅度最高达 15 2 % ;6 BA喷施浓度以 40~ 5 0mg·L-1为宜 ;喷施时期以始穗期最佳  相似文献   

5.
籼型杂交水稻恢复系“752”抗除草剂转基因研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
用基因枪法对籼型杂交水稻恢复系“75 2”进行了bar基因的遗传转化 ,共获得可育的抗除草剂Basta的转基因株系 6个。PCR检测结果表明 ,抗性转基因植株表现为阳性 ,而非转化的对照表现为阴性 ,证明T0 代转基因水稻基因组中整合有bar基因。转基因植株的抗性能遗传至后代 ,在T1 代中观察到了抗、感分离现象  相似文献   

6.
农杆菌介导的抗除草剂基因Bar转入北方粳稻恢复系的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
以2个北方粳型恢复系津稻162和津稻18为受体,经农杆菌EHA105/pDSBar1300转化,分别获得77和55个转植株。用0.25%浓度的Basta对转基因在T0代进行了涂布试验,其抗性植株率分别为92%和78%,对除草剂抗性转基因株系做PCR检测,均能扩增出400bp的Bar基因特异条带,证明外源基因已整合到水稻基因组中。对转基因T1代进行潮霉素抗性鉴定,大多数转基因株系表现为3∶1的分离比。  相似文献   

7.
抗蚜虫转基因枸杞株系的光合生理特征   总被引:4,自引:0,他引:4  
对5个转基因枸杞株系的光合生理进行测定,结果表明:有1个株系的叶片叶绿素(CHI)含量显著低于对照,叶绿素荧光参数和光合气体交换参数也显著低于对照,其它4个株系与对照相比变化不大。说明转基因对枸杞植株的光合生理影响不大。  相似文献   

8.
通过开展转BpGLK1基因白桦叶色变异规律研究,探讨BpGLK1干扰表达株系叶绿素含量的降低对生长的影响。以2年生3个BpGLK1过表达株系(OE1~3)、7个干扰表达株系(RE1~7)为试材,采用PCR及qRT-PCR技术对目标基因进行分子检测,同时测定其叶色参数和叶绿素相对含量的时序变化规律,分析转基因白桦的生长特性。结果表明:2年生的转BpGLK1基因白桦中,导入的目标基因仍整合于转基因株系的基因组中,且BpGLK1干扰表达株系中BpGLK1显著下调,BpGLK1基因的低表达对2年生苗高生长无影响,7个干扰表达株系中有6个株系在整个生长期叶绿素含量低于WT株系,叶色亮度及黄色程度高于WT株系,其中RE1、 RE7株系上述性状均优于其他株系,是后续城市园林绿化应用推广的首选株系。  相似文献   

9.
通过开展转BpGLK1基因白桦叶色变异规律研究,探讨BpGLK1干扰表达株系叶绿素含量的降低对生长的影响.以2年生3个BpGLK1过表达株系(OE1~3)、7个干扰表达株系(RE1~7)为试材,采用PCR及qRT-PCR技术对目标基因进行分子检测,同时测定其叶色参数和叶绿素相对含量的时序变化规律,分析转基因白桦的生长特性.结果 表明:2年生的转BpGLK1基因白桦中,导入的目标基因仍整合于转基因株系的基因组中,且BpGLK1干扰表达株系中BpGLK1显著下调,BpGLK1基因的低表达对2年生苗高生长无影响,7个干扰表达株系中有6个株系在整个生长期叶绿素含量低于WT株系,叶色亮度及黄色程度高于WT株系,其中RE1、RE7株系上述性状均优于其他株系,是后续城市园林绿化应用推广的首选株系.  相似文献   

10.
本文探讨了不同浓度稀土浸种对水稻破胸发芽、秧苗素质的影响,以及本田期不同浓度稀土根外喷施对杂交水稻叶绿素含量、灌浆速度、经济性状和产量的影响,结果表明,稀土浸种水稻破胸快,秧苗白根数增多。盛蘖前,盛花期两次叶面喷施,叶绿素含量和灌浆速率及千粒重比对照明显增加,杂交稻施用稀土可提高稻谷产量。  相似文献   

11.
利用基因枪转化法将抗除草剂的bar基因和抗二化螟的SCK(修饰后的CpTI)基因导入到优质粳稻恢复系超优一号中。经对转基因植株进行分子检测,表明外源基因已整合到水稻基因组中;经田间除草剂抗性检测和二化螟接种鉴定,表明转基因稳定株系直到T6仍表现高抗除草剂且没有分离,说明bar基因能稳定遗传并高效表达;转基因恢复系与非转基因恢复系相比,抗虫性有所提高,但提高程度在株系间有差异。经对转基因恢复系所配杂交组合进行除草剂检测和优势测定,表明转基因杂交稻也高抗除草剂,且F1全部正常结实,结实率达80%以上,并具很强的杂种优势,说明亲本抗性基因通过制种已转移到F1中并得到高效表达,同时说明外源基因的导入没有改变原受体的优良性状;经对部分转基因杂交稻进行纯度鉴定,表明秧田喷施除草剂后,本田的不育株率和杂株率明显降低,特别是两系杂交稻效果更明显。  相似文献   

12.
 利用基因枪转化法将抗除草剂的bar基因和抗二化螟的SCK(修饰后的CpTI)基因导入到优质粳稻恢复系超优一号中。经对转基因植株进行分子检测,表明外源基因已整合到水稻基因组中;经田间除草剂抗性检测和二化螟接种鉴定,表明转基因稳定株系直到T6仍表现高抗除草剂且没有分离,说明bar基因能稳定遗传并高效表达;转基因恢复系与非转基因恢复系相比,抗虫性有所提高,但提高程度在株系间有差异。经对转基因恢复系所配杂交组合进行除草剂检测和优势测定,表明转基因杂交稻也高抗除草剂,且F1全部正常结实,结实率达80%以上,并具很强的杂种优势,说明亲本抗性基因通过制种已转移到F1中并得到高效表达,同时说明外源基因的导入没有改变原受体的优良性状;经对部分转基因杂交稻进行纯度鉴定,表明秧田喷施除草剂后,本田的不育株率和杂株率明显降低,特别是两系杂交稻效果更明显。  相似文献   

13.
bar基因在杂交水稻制种中的应用及其安全性分析   总被引:11,自引:2,他引:9  
利用水稻基因转化技术 ,将bar基因导入杂交水稻 ,结合除草剂“Basta”的喷施 ,能快速检测并排除杂交水稻制种中的假杂种。对转bar基因杂交稻制种原理、分子证据及其生物安全性进行了探讨  相似文献   

14.
[目的]研究新疆雪莲(Saussurea involucrate Kar.et Kir.)遗传转化中除草剂Basta的筛选压。[方法]用新疆雪莲愈伤组织或再生苗转接于含不同浓度Basta培养基上,观察其存活状况。[结果]浓度为2~12 mg/L的Basta对雪莲愈伤组织或再生苗的生长有不同程度的抑制作用。[结论]Basta可以作为新疆雪莲遗传转化体的一种有效筛选剂,筛选压设为4~5 mg/L比较合适。  相似文献   

15.
转基因抗除草剂两系杂交早稻高产栽培技术研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
2005年对转bar基因抗除草剂两系法杂交早稻的高产栽培技术进行了研究,结果表明:供试组合各项经济性状稳定,生长整齐,使用除草剂Basta后的纯度达99.98%。据取样考种,理论产量平均达550kg/667m^2以上。转bar基因两系杂交稻与非转基因杂交稻在栽培上多一次专用除草剂,其它丰产措施基本相同,但除草剂Basta可视种子纯度等情况使用或不用。旱育软盘秧或旱育秧、早播早栽早管,有利于充分发挥供试组合的增产潜力。  相似文献   

16.
The efficient acceptors for maize transgenic engineering are currently insufficient in China. Seed production by male sterility is the best method for advancing the authenticity of maize hybrid. Maize inbred line 18–599 (white) is an antivirus high-quality maize inbred line in China, which has been used for lots of maize hybrid cultivars. The establishment of high efficiency transgenic acceptors is necessary for advancing the transgenic efficiency in maize transformation work. In this study, the efficient transgenic acceptors were optimized and established. 18–599 (white) was studied in state, types of culture mediums, times of callus regeneration and concentration of the screening reagent, Basta. The results showed that N6-4 medium was the best in 8 types of mediums for the immature embryo of 18–599 (white), 1.6 mm length was the feasible length of immature embryos for tissue culture in establishing the transgenic acceptor system, and it was within 5 times for suitable callus subculture. With the optimized transgenic acceptors, barnase gene was translated successfully into 18–599 (white) by a particle gun using bar as a marker gene. Basta was used as the screening reagent, its lethal concentration was 8 mg·L−1 and its working concentration for screening was 6, 8 and 6 mg·L−1 in 3 turns for callus regeneration, respectively. In this work, a transgenic plant with male sterility was obtained through molecule detection and observation in the field. The result has an important significance for the creation of new male sterility inbred lines in maize in the future. __________ Translated from Acta Agronomica Sinica, 2007, 33(5): 738–743 [译自: 作物学报]  相似文献   

17.
水稻Ds转座子转基因后代的抗性筛选   总被引:7,自引:1,他引:7  
以水稻Ds转基因后代的种子为抗性筛选材料,建立了种子浸润发芽的抗性检测方法,研究表明以340~450mg·L  相似文献   

18.
[目的]探明草铵膦可溶性液剂(Basta SL)的杀草谱和筛选其适宜剂型及用量,为其推广使用提供依据。[方法]以不施药剂作为空白对照,通过田间小区试验,测定Basta SL对番茄田中杂草的防除效果。[结果]在试验剂量≥2250 g/hm2时,200 g/L Basta SL对番茄地杂草的防除效果较好,作用迅速,残效期长。药后30 d,杂草覆盖面积和鲜重的防效都在90%以上;杀草谱广,有效防治禾本科、菊科、苋科和十字花科绝大部分杂草;安全性好,喷药时将番茄植株下部叶片摘去,对番茄产量无显著影响。[结论]用200 g/L Basta SL对茎叶进行喷雾处理能够灭除番茄地的绝大部分杂草,是一种理想的灭生性除草剂。  相似文献   

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