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1.
鸡毒霉形体病(Mycoplasma gallisepticum Disease)是鸡的一种接触传染性慢性呼吸道病,以呼吸道发生(口罗)音、咳嗽、流鼻液和窦部肿胀为特征,其病原为鸡毒霉形体(Mycoplasma gallisepticura,MG),因病状发展缓慢,病程较长,故亦称为慢性呼吸道病(CRD)。该病对纯种鸡和1～2月龄青年鸡易感性高。1990年,我们对江苏省7个市常见的12个品种鸡群进行了临床和血清学调查,结果表明,MG感染已波及被检的25个禽场中的22个,共12个品种,平均感染率为48.5％,最高的鸡场达100％。 相似文献
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用构建的人基质蛋白酶-2（MMP-2）类血红素结构域原核表达载体PET25b—PEX转化大肠杆菌BL21（DE3），筛选阳性菌落LB液体培养基培养，异丙基-β—D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达产生的表达蛋白，大小约29kD，与预期大小相符。设置不同的IPTG诱导终浓度，诱导时间，诱导时菌液OD值和LB液体培养基的pH值，SDS-PAGE电泳和软件分析发现，当IPTG浓度为0．7mmol／L，诱导4h，诱导时菌液OD值为0．7时，实验能获得最高的PEX蛋白表达；5L大规模培养时，LB培养基pH值为7．5时，可获得较高的重组PEX蛋白表达。 相似文献
3.
按进出口捡疫规程对乌鲁木齐市某养禽场引进的种雏进行鸡败血霉形体检疫表明,血清平板凝集试验阳性者占抽检总数的37％。选择血清学阳性滴度高且有轻微临床症状的雏鸡使用霉形体培养基进行分离,分离物的培养特性、生化特性、形态学以及血清学试验和L菌鉴别试验都符合鸡败血霉形体的特征,证实此批进口种雏携有鸡败血霉形体。 相似文献
4.
用超声波裂的鸡毒霉形体（ＭＧ）Ｓ６菌液作抗原建立了检测鸡血清和卵黄中ＭＧ抗体的血凝抑制（ＨＩ）试验，ＨＩ试验的敏感性比血清平板凝集（ＳＰＡ）试验提高了２－３２倍。ＨＩ中检出卵黄中ＳＰＡ试验不足以检出的ＭＧ抗体。以ＳＰＦ鸡血清、卵黄抗体、鸡滑液囊霉形体（ＭＳ）阳性血清作对照，证明无假阳性反应及交叉反应。 相似文献
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用超声波裂解的鸡毒霉形体（ＭＧ）Ｓ６菌液作抗原建立了检测鸡血清和卵黄中ＭＧ抗体的血凝抑制（ＨＩ）试验，ＨＩ试验的敏感性比血清平板凝集（ＳＰＡ）试验提高了２～３２倍。ＨＩ试验可检出卵黄中ＳＰＡ试验不足以检出的ＭＧ抗体。以ＳＰＦ鸡血清、卵黄抗体、鸡滑液囊霉形体（ＭＳ）阳性血清作对照，证明无假阳性反应及交叉反应 相似文献
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利用 IPTG 作为诱导剂进行鸡β 防御素 3 基因重组蛋白的表达,探讨工程化生产的可能性。分别对影响重组蛋白表达的因素（IPTG浓度、诱导时机、诱导时间、诱导温度和溶氧量）进行优化,最终得到最佳的IPTG诱导条件： IPTG的终浓度为0.6 mmol/L，诱导起始吸光度A600为0.6，最适溶氧量为150 mL 三角瓶装50 mL培养基，且在 33 ℃ 下诱导4 h 重组蛋白表达量达到最大。该方法为工程化生产提供良好的试验依据。 相似文献
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Bloom综合症(Bloom s syndrome)是人类一种少见的常染色体隐性遗传疾病,BLM基因突变导致这种疾病的发生,患者染色体极不稳定,是多种癌症的易患体,其致病机理不清楚.该研究在优化诱导表达温度、时间、IPTG质量浓度、pH值、培养基种类以及培养基成分的基础上,建立了BLM642-1290重组蛋白表达、分离和纯化方法.最优表达条件为IPTG0.45 mmol/L,诱导温度18℃,诱导表达时间20 h,pH值7.0.在LB培养基中添加终质量浓度为5 mmol/L的EDTA能够增加蛋白的表达量.该实验所建立的方法为进一步开展Bloom综合症的研究奠定了基础. 相似文献
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Bloom综合症(Bloom's syndrome)是人类一种少见的常染色体隐性遗传疾病,BLM基因突变导致这种疾病的发生,患者染色体极不稳定,是多种癌症的易患体,其致病机理不清楚.该研究在优化诱导表达温度、时间、IPTG质量浓度、pH值、培养基种类以及培养基成分的基础上,建立了BLM642-1290重组蛋白表达、分离和纯化方法.最优表达务件为IPTG 0.45 mmol/L,诱导温度18℃,诱导表达时间20 h,pH值7.0.在LB培养基中添加终质量浓度为5 mmol/L的EDTA能够增加蛋白的表达量.该实验所建立的方法为进一步开展Bloom综合症的研究奠定了基础. 相似文献
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据基因库中鸡源霉形体16SrRNA基因序列，设计了一对跨幅为1026bp的引物，用这对引物对致病性鸡源霉形体MG，MS的DNA进行PCR扩增，结果扩增片段大小与设计相一致，而其它细菌扩增结果则均为阴性。 相似文献
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鸡毒霉形体（ＭＧ）中毒株Ｓ６在固体平板上的３次克隆后，在无细胞培养上基上传１００代以上进行致弱培养，用ＭＧＳ６Ｆ１０８株培养物在雏物和ＳＰＦ鸡胚上作６次回归感染，证明ＭＧＳ６Ｆ１０８不返强，通过气管环培养，纤毛运动损伤试验及对鸡点眼，滴鼻，工胸气囊注射不同代培养物（Ｆ１０８，Ｆ１４３，Ｆ１２１，Ｆ１５０，Ｆ１５３）检查气囊病变和病原体再分离，结果证明Ｆ１０８以上代次的菌株低毒，安全，且有较强的免疫 相似文献
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鸡毒霉形体感染的PCR检测方法的建立及应用 总被引：2，自引：0，他引：2
用多聚酶链反应检测了鸡毒霉形体种内菌株的特异性ＤＮＡ片段,并用该法对人工感染鸡及野外野群进行了ＭＧ感染的分子流行病学调查。结果表明,通过基因扩增及电泳,仅ＭＧ出现特生扩增条带,最低能检出１８ｐｇＭＧＤＮＡ,说明该方法具有很高的特异性和敏感性。人工感染６０只鸡,３ｄ后即可用ＰＣＲ查出ＭＧ阳性,６ｄ后１００％为阳性,对照鸡全部为阴性。与分离培养的结果完全一致。ＰＣＲ对野外鸡群的ＭＧ检出率为１０．５－３ 相似文献
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对已构建的含β2毒素基因重组质粒p ETXB2进行限制性核酸内切酶酶切鉴定,并用SDS-PAGE检测不同培养条件下β2毒素基因的表达情况。经酶切鉴定证实,p ETXB2重组质粒含有β2毒素基因而且阅读框架和基因序列正确。同时采用IPTG诱导剂在改变培养基的p H、培养温度、诱导剂的加入量及诱导时间4个方面对β2毒素基因表达进行调控,其最佳的表达条件是37℃,p H 7.0的培养基中,用终浓度为0.8 mmol/L IPTG诱导4 h,β2毒素蛋白的表达效果最好。 相似文献
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[目的]为鸡γ-干扰素的进一步研究奠定基础。[方法]根据GenBank发表的鸡γ-干扰素核苷酸序列,设计1对特异性引物。利用RT-PCR技术从ConA诱导培养的鸡脾脏淋巴细胞中克隆鸡γ-干扰素基因,并在IPTG诱导下在大肠杆菌中表达重组菌。[结果]克隆的鸡γ-干扰素基因全长495bp,编码165个氨基酸,与国外克隆的鸡γ-干扰素基因序列的同源性为100%。鸡γ-干扰素蛋白含有12个α螺旋,3个β折叠,7个β转角。它具有强抗原性,而第16～23位氨基酸无抗原性。重组蛋白的分子量约18kD,其经IPTG诱导表达4h后,表达量最高,表达产率高达25%。[结论]鸡γ-干扰素具有一定的抗原性,预示其在免疫反应中起一定作用。 相似文献
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通过SOE-PCR技术获得PstS基因全长并克隆到pColdⅠ,将重组表达载体pCold-PstS转化进BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白PstS,将其纯化后免疫新西兰兔制备多克隆兔抗血清,提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白和胞浆蛋白,通过Western blot分析PstS蛋白的亚细胞定位.结果表明,PstS基因长度为1 065 bp,其蛋白在氨基酸9～31之间存在跨膜区,pCold-PstS经诱导表达获得融合蛋白PstS(存在于细胞膜和胞浆中),其约43 ku并具有较好的抗原性. PstS蛋白是鸡毒支原体膜表面的免疫原性蛋白,可为进一步研究其生物学功能和基因工程疫苗提供依据. 相似文献
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鸡的霉形体病又称慢性呼吸道病，由鸡败血霉形体（MG）和滑膜霉形体（MS）引起。鸡败血霉形体主要感染鸡、火鸡，也感染其他禽类，引起呼吸道疾病。其特征是咳嗽，面部肿胀，流鼻液和呼吸时发出啰音。在鸡群中长期流行，使母鸡产蛋下降。因此鸡的霉形体病成为对家禽，尤其是蛋鸡生产危害最大的疾病之一。 相似文献
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对含猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原区基因插入的重组酵母菌株进行诱导表达,通过对诱导时间、重组酵母菌株、菌体密度、培养液pH、甲醇剂量等培养条件与表达产量关系的分析,对重组蛋白的表达条件进行了优化。优化后的条件为:28～30℃,225r/min振荡培养至BMGY中菌体OD600值为3.0～3.5时,将菌体转入相当于4倍体积BMGY,pH为6.0的BMMY培养基中培养72h,每24h加入甲醇至终浓度为总体积的0.5%～1.0%。在此优化条件下,重组蛋白的表达量可达275.38μg/mL,比较温度对重组蛋白降解率的影响后发现,培养物上清液应保存于-20℃。 相似文献
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王保宁 《甘肃农业大学学报》1998,(1)
肺霉形体在３７℃，ｐＨ７．８的霉形体基础肉汤中，相对温度６５±５％，培养７２～９６ｈ时生长最佳。除基础营养物质外，添加１５％以上血清使其生长旺盛，添加兔、马和小牛血清效果差异不显著；１％和０．３％琼脂培养基能观察到典型菌落；针头滤膜不能完全去除菌体；５６℃作用５ｍｉｎ即死，－３８℃可存活一年以上；基因组为６．２８×１０８Ｄａ；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白的图谱为１５条带，比关节炎霉形体复杂。 相似文献
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用3种实验方法研究了哈茨木霉对禾谷镰孢菌的抑制效果,分别是哈茨木霉和禾谷镰孢菌在PDA培养基上的对峙培养,哈茨木霉和禾谷镰孢菌在载玻片上对峙培养,哈茨木霉发酵液的上清液对禾谷镰孢菌的抑菌圈实验,并对培养基、pH值、温度3种培养条件进行了优化。3种实验方法的结果均表明哈茨木霉对禾谷镰孢菌有较强的抑制作用,哈茨木霉适宜生长的条件为培养基PDB,pH值6.0,30℃。 相似文献