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为奠定油桐蛋白质组学研究的基础,针对影响油桐种仁蛋白质分离效果的几个重要因素进行单因素优化实验,建立了油桐种仁蛋白质组分离效果良好的双向电泳技术平台。实验结果显示:采用TCA-丙酮结合酚抽法提取的油桐种仁蛋白质,经裂解液(7 mol.L-1尿素,2 mol.L-1硫脲,4%CHAPS,65 mmol.L-1DTT,2%IPG buffer)裂解之后,上样700μg聚焦70 000 Vh,经过SDS-PAGE电泳(分离胶浓度15%,恒功率5 W,电泳时间8 h)后有良好的分离效果,能满足开展后续蛋白质组学研究的实验要求。 相似文献
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葛根的综合开发与利用 总被引：2，自引：1，他引：1
从葛属植物中可提取丰富淀粉、纤维素、蛋白质、尿囊素、葛根异黄酮、膳食纤维等重要医药,食品化工原料,作者对葛属植物资源综合开发与利用作了阐述,尤其是对总黄酮在植物中分布情况、提取分离、检测方法做了主要介绍,以期推动我国对葛属植物的深入研究与利用。 相似文献
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对6个无性系:RRIC 7、RRIC45、RRIC100、RRIC101、RRIM600和PB86的正常树及褐皮病树的乳清蛋白质带型进行了研究。6个无性系的褐皮病树的乳清蛋白质含量都显著减少,PB86减少最大,为50％。乳清蛋白质凝胶电泳分离补充了上述试验结果,一些电泳蛋白质带消失了,而剩留的一些蛋白质带密度降低。不同采胶高度的乳清蛋白质含量,RRIC101在割面以上,而RRIM600则在割面以下下降幅度大。乳清蛋白质的变化可表明病皮传播到邻近树皮组织的程度,尽管这种传播还没有在树皮的外观上或乳胶产量上产生明显的变化。 相似文献
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高效毛细管电泳法检测印楝素A的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从理论角度分析了高效毛细管电泳技术检测印楝素A的可能性，并以试验进行证明。在十二烷基硫酸钠（SDS）浓度为25mmol／L、0．02mol／LpH值6．86混合磷酸盐缓冲溶液，甲醇-缓冲溶液（体积比7：3）作为运行缓冲液，分离电压20kV下得到稳定的电流曲线，二极管阵列检测器（PDA）检测波长214nm，在迁移时间2．6min处检测到印楝素A的电泳特征峰，电泳谱图面积积分结果和高效液相色谱分析结果无显著差异。 相似文献
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[目的]建立基于毛细管电泳的日本落叶松最佳MSAP反应体系,获得条带清晰,信号强度均一的DNA甲基化图谱,为今后开展日本落叶松表观遗传变异研究奠定基础。[方法]以日本落叶松未成熟木质部为试材,设置不同梯度的DNA模板用量以及选择扩增体系中引物浓度、Mg~(2+)浓度、dNTP浓度和exTaq DNA聚合酶浓度,确定各组分不同用量对毛细管电泳效果的影响,从而确立最适的MSAP反应体系。[结果]结果表明模板DNA以及exTaq DNA聚合酶浓度对毛细管电泳结果影响不明显,而高的引物浓度会引起条带的减少。Mg~(2+)及dNTP浓度是影响毛细管电泳结果最为关键的因素,浓度过低或过高会导致毛细管电泳图谱条带明显减少,杂峰显著增多。[结论]最终确立的反应体系为:DNA模板100 ng,引物0.75 pmol·μL~(-1),Mg~(2+)2 mmol·L~(-1),dNTP 0.375 mmol·L~(-1)和exTaq DNA聚合酶0.05 U·μL~(-1)。 相似文献
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双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)是蛋白质组学研究中常用的技术之一,因具有较高的稳定性和重复性,在植物蛋白质组学中应用广泛。蛋白质双向电泳(2-DE)过程复杂、时间持久以及影响因素众多,本文立足蛋白质双向电泳实验过程中可能出现的各种现象,如：分离的蛋白质点过少、条纹过多导致凝胶背景模糊、高丰度蛋白点聚集沉淀及低丰度蛋白点被掩盖等,着重分析其产生的原因并提出具体的解决办法,为蛋白质双向电泳技术初学者提供参考。 相似文献
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指出了聚丙烯酰胺凝胶电泳技术是生物科学研究的基础技术之一，是分离纯化核酸和蛋白质、检测蛋白质纯度、评估蛋白质分子量的基本方法。为了降低危害和保护实验者健康，对SDS—PAGE的多个环节进行了初步的预防改进。 相似文献
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为了研究不同提取方法对黄皮叶片蛋白质提取质量的影响,以‘杨妃山黄皮’的叶片为材料,采用TrisHCl法、三氯乙酸(TCA)/丙酮法、尿素(Thi)/硫脲(Urea)法、酚(Phe)-甲醇/醋酸铵沉淀法提取叶片组织蛋白质,对获得的蛋白质产量、单向电泳图谱和双向电泳图谱分析比较。结果显示,不同方法的提取效果各异,就提取的蛋白质产率、单向电泳以及双向电泳结果来说,三氯乙酸(TCA)/丙酮法提取效果较理想,单双向电泳图谱辨识度强,蛋白点数多、蛋白点整洁、且纵横纹少。说明该法不但可以较好地去除黄皮叶片中存在的非蛋白物质,而且可以获取高质量的蛋白质。 相似文献
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本试验以灵蜜瓜为原料,经2年研制,掌握了灵蜜脯的加工工艺。实验和生产结果表明,该工艺简单、易掌握、成本低、经济效益高。产品色艳、质优,是具有推广前景的新产品。 相似文献