不同提取方法的铁线莲属叶片总DNA提取效果   总被引：1，自引：0，他引：1  

盛璐  张逢凯  潘婷  季孔庶 《林业科技开发》2014,28(2)

以铁线莲属植物的叶片为材料,采用CTAB-SDS法、简易CTAB法、改良CTAB法等3种提取方法,比较耗时、纯度、得率、浓度和质量等指标,以期为铁线莲属植物叶片总DNA的提取筛选适宜方法.结果表明,在纯度和浓度方面CTAB-SDS法＞简易CTAB法＞改良CTAB法,在节省提取时间方面改良CTAB法＞CTAB-SDS法＞简易CTAB法.以CTAB-SDS法所提取的9种铁线莲DNA为模板,进行PCR扩增,CTAB-SDS法提取的DNA得率高、质量好,PCR扩增成功率也较高.综合比较,采用CTAB-SDS法进行铁线莲属叶片总DNA提取效果更佳.  相似文献   

山核桃基因组DNA提取方法的比较研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

郭传友  黄坚钦  王正加 《福建林业科技》2004,31(2):12-15

植物体内所含的蛋白质、单宁、酚类、多糖及色素等次生代谢物质影响TaqDNA聚合酶的活性,是导致PCR扩增反应失败的主要因素。以山核桃嫩叶为材料,对分别用经过改良的SDS法、改良的CTAB法、简易CTAB法及改良的高盐低pH法提取的基因组DNA进行检测比较,结果显示,改良的SDS法更适合于山核桃基因组DNA的提取,此方法提取的DNA能很好地用于PCR扩增。  相似文献   

枣叶片DNA的提取以及AFLP反应体系的建立   总被引：5，自引：0，他引：5  

文亚峰  何钢 《中南林业科技大学学报(自然科学版)》2007,27(3):25-28

扩增片断长度多态性(AFLP)实验过程中,DNA提取质量和适合的PCR扩增反应体系是2个关键因素.利用CTAB法对枣树叶片DNA的提取方法进行探讨.结果表明:改良CTAB法抽提到了较高质量的枣基因组DNA,可用于AFLP实验分析;通过对酶切-连接体系和PCR扩增体系中的关键因素实验分析,建立了适合枣AFLP荧光反应体系,并得到清晰的DNA指纹图谱.  相似文献   

八角基因组DNA的提取方法     

陈海云  吴涛  耿树香  白平  陈少瑜  宁德鲁 《福建林业科技》2012,39(4):26-29

采用4种植物基因组DNA提取方法(CTAB法、SDS法、高盐法、试剂盒法)对八角基因组DNA进行提取试验.结果表明,对传统CTAB法稍加改良可以得到较为理想的提取效果,改良的内容包括①在加入CTAB提取缓冲液之前,先用CTAB-free缓冲液抽提1～2次;②将CTAB提取缓冲液中CTAB的用量从2％提高到3％;③提取缓冲液的用量由样品干重的10倍增加到60倍.用改良CTAB法提取的DNA经RAPD-PCR扩增,条带清晰,其质量能够满足分子标记的要求.  相似文献   

米槠叶片基因组DNA的提取及分析     

林莉莉  郭丽倩  陈潇潇  游章湉  游水生  曹世江 《福建林业科技》2019,(2):25-29

以米槠(Castanopsis carlesii)群落的叶片为材料,采用改良的CTAB法提取米槠基因组DNA,并对获得的基因组DNA进行浓度检测、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测、含量测定分析以及扩增结果测序。结果表明:米槠叶片提取的基因组DNA质量和浓度较好,具有良好的完整性,PCR效果好,电泳图谱条带显示清晰,测序结果长度符合要求。利用该方法提取的DNA可用于米槠遗传多样性的分析,可进一步为米槠和格氏栲等其它栲属植物的DNA提取以及其它分子研究提供参考。  相似文献   

白草种子基因组DNA五种提取方法的比较     

《西部林业科学》2016,(3)

用5种方法 (传统CTAB法、改良CTAB法、高盐低p H法、改良SDS法、试剂盒法)对白草种子基因组DNA进行提取,分别用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法、PCR扩增检测提取的DNA的质量。结果表明,传统CTAB法提取的DNA浓度低,含有较多杂质,抑制PCR反应;改良SDS法和改良CTAB法提取的DNA纯度低,不符合检测要求;高盐低pH法和试剂盒法提取的DNA纯度高、完整性好,但试剂盒法成本高、DNA得率低。所以高盐低pH法为5种方法中最经济、效果最好的白草种子DNA提取方法。  相似文献   

枫香DNA提取方法与PCR扩增程序的优化   总被引：12，自引：0，他引：12       下载免费PDF全文

孟现东  陈益泰 《林业科学研究》2004,17(1):42-46

从SDS、CTAB、高盐低pH值3种方法中选择了CTAB法作为枫香适合的DNA提取方法,同时构建了枫香DNA的PCR扩增程序,并从Mg^ 浓度、Taq酶用量、dNTP浓度、引物浓度、DNA模板用量等方面优化了PCR扩增程序。  相似文献   

无患子总DNA提取方法研究   总被引：3，自引：2，他引：1  

刘宝  范辉华  彭朱清 《福建林业科技》2013,40(2):28-31

针对无患子富含多酚、多糖、蛋白质及其他次生代谢物质的特点,以无患子叶片为材料,分别采用改良的CTAB法和CTAB与SDS相结合法提取不同种源无患子的总DNA。结果显示,改良的CTAB法提取的总DNA,得率较高,纯度好,可用于酶切、PCR扩增等后续试验,并能获得清晰、稳定的扩增产物。而采用CTAB与SDS相结合的方法得到的基因组DNA效果不稳定,无法检测出DNA。改良的CTAB法具有简单、经济的特点,可用于无患子总DNA的提取,成功地进行SRAP分子标记分析,为研究无患子遗传资源多样性奠定基础。  相似文献   

樟树总DNA提取技术的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

潘晓华  黄儒珠  朱锦懋 《福建林业科技》2004,31(1):31-33,41

比较了常规的CTAB法与改进的CTAB法对樟树总DNA提取的结果。在常规的CTAB法基础上,采取先破碎细胞收集细胞核,将存在于细胞质中的大量影响DNA提取质量的多酚等次生代谢物除去后,再加核裂解液释放DNA,经分离纯化,提得的DNA通过A260/A280比值的测定及电泳,限制性内切酶消化,PCR扩增,结果表明,用改进的CTAB法提取的DNA纯度和完整性均优于常规的CTAB法。  相似文献   

金叶含笑叶片基因组DNA提取方法的比较   总被引：2，自引：0，他引：2  

曹国艳  陈少瑜  司马永康  吴涛  郝佳波 《林业调查规划》2008,33(5)

以金叶含笑叶片为实验材料,分别采用CTAB法、改良CTAB法、简易提取方法、高盐沉淀法和SDS法5种方法提取金叶含笑叶片的基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计及ISSR扩增3种方法对所提取的DNA样品进行检测.DNA纯度、含量比较以及扩增结果表明:5种方法中简易提取法和SDS法提取的DNA纯度较高.高盐沉淀法得到的DNA产量较高.5种方法提取的DNA用于ISSR扩增,其扩增结果基本一致.简易提取方法操作简单.省时省力,是用于ISSR扩增的金叶含笑基因组DNA提取的最佳选择.  相似文献   

基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨   总被引：9，自引：2，他引：9       下载免费PDF全文

高志民  范少辉  高健  李雪平  蔡春菊  彭镇华 《林业科学研究》2006,19(6):725-728

应用CTAB法、改良CTAB法、改良CTAB-高盐沉淀法对毛竹基因组DNA进行了提取,并用紫外分光光度计(UV3300)、琼脂糖凝胶电泳和PCR分析对提取的DNA进行了检测,对DNA的产量、质量、PCR效果等方面进行了综合比较.结果表明:改良CTAB-高盐沉淀法是提取高质量毛竹基因组DNA的较好方法.  相似文献   

RNA干涉培育低木质素杨树   总被引：2，自引：0，他引：2  

宋恩慧  蔡诚  魏国  高慧  项艳 《林业科学》2010,46(2)

采用改良的CTAB法提取南林95杨的基因组DNA,经PCR扩增得到肉桂酰辅酶A还原酶CCR基因的第4个外显子部分序列,通过中间载体pUCCRNAi,构建含正反向干涉片段的pBI121表达载体,导入农杆菌LBA4404。利用叶盘法侵染南林95杨,获得3株转基因植株,经分子鉴定证实干涉片段已导入南林95杨。测定Klason木质素及综纤维素含量的结果显示:转基因植株Klason木质素含量与对照相比平均降低了9.86%,综纤维素含量与对照相比平均增加了3.17%,纤维长宽比明显增加,均表明转基因植株更有利于造纸。  相似文献   

RNA干涉培育低木质素杨树     

宋恩慧  蔡诚  魏国  高慧  项艳 《安徽林业科技》2012,(2):58-62,72

采用改良的CTAB法提取南林95杨的基因组DNA，经PCR扩增得到肉桂酰辅酶A还原酶CCR基因的第4个外显子部分序列，通过中间载体pUCCRNAi，构建含正反向干涉片段的pBll21表达载体，导入农杆菌LBA4404。利用叶盘法侵染南林95杨，获得3株转基因植株，经分子鉴定证实干涉片段已导入南林95杨。测定Klason木质素及综纤维素含量的结果显示：转基因植株Klason木质素含量与对照相比平均降低了9．86％，综纤维素含量与对照相比平均增加了3．17％，纤维长宽比明显增加，均表明转基因植株更有利于造纸。  相似文献   

DNA extraction from dry wood of Neobalanocarpus heimii (Dipterocarpaceae) for forensic DNA profiling and timber tracking     

Lee Hong Tnah  Soon Leong Lee  Kevin Kit Siong Ng  Subha Bhassu  Rofina Yasmin Othman 《Wood Science and Technology》2012,46(5):813-825

Wood can be a good source of DNA for various applications in forensic forestry and timber trade if high-quality DNA can be retrieved from the dry wood. In order to provide a general guideline for DNA authenticity testing established for Neobalanocarpus heimii, this study was designed to evaluate the potential of extracting DNA from the dry wood. Overall, the efficacy of DNA extraction was higher for the cambium and sapwood than for the heartwood tissues. In terms of DNA extraction protocols, the Qiagen kit and CTAB with PTB protocol showed higher PCR amplification rates. In order to safeguard the intactness of the DNA, the DNA extraction from dry wood is recommended to be carried out within 6?weeks after felling for logs and 6?months after felling for stumps. The results also showed that the amplicon size might not account for the PCR amplification success rate, and chloroplast genome yielded higher amplification success rate compared with nuclear genome. However, only the chloroplast region can be perfectly retrieved from heat-treated lumber.  相似文献