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鱼类精子的长期保存对于遗传育种、生物多样性保护、濒危物种保护、渔业可持续发展具有重要意义,引起了人们越来越广泛的关注和重视.低温生物学的不断研究和发展为精子的长期稳定保存提供了理论和技术方面的支持.近年来鱼类精子的冷冻保存在保存原理和技术方面都取得了极大的成就,实现了多种鱼类精子冷冻保存的技术突破,并对冷冻保存的原理、冷冻损伤机制等方面有了更深刻的认识,在冷冻精子的生产应用方面也越来越趋于成熟稳定.本文仅针对鱼类精子冷冻保存的研究现状及发展前景作以阐述,以期对更加深入广泛的研究工作有所帮助. 相似文献
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鱼精冷冻保存作为鱼类选种育种的一项新手段，已为人们所重视，并取得了可喜的进展。实验证明，鱼类精液经超低温(-196℃)冷冻保存之后，解冻复苏的精子具有正常的受精能力，且胚胎发育正常，孵出正常鱼苗。但随着研究工作的深入，人们十分自然地关注到这样一个问题， 相似文献
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鱼类精液超低温冷冻保存研究进展 总被引：28，自引：0，他引：28
鱼类精液超低温冷冻保存研究是从五十年代开始的,经过三十年的努力已取得很大成就。国外的工作主要是在海水鱼类和鲑科鱼类中开展的,并在某些鱼类,如鳕鱼、虹鳟、鲑鱼,大马哈鱼等的精液冷冻保存中获得成功。不少学者还对精液冷冻的原理,冷冻保存的技术环节如稀释液的配制、抗冻剂的种类及浓度、降温平衡、冷冻速度及保存方法等进行了较为详细的研究。我国在鱼类精液超低温冷冻保存方面的工作开展得比较晚。近年来,广东、广西和新疆等地对草、鲢、鳙、鲮等鱼的精液冷冻保存作了一些 相似文献
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黄鳝精子保存液的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
在鱼类的繁育工作中，为解决雌雄亲鱼性成熟不同步、雄性亲鱼少、精液不足等问题，开展了鱼类精液保存技术的研究，以提高雄亲鱼的利用率。目前对鱼类精子的保存技术已取得明显进展，“四大家鱼”的冷冻精子保存技术已用于生产实践，并取得令人满意的结果，而对黄鳝精子的保存尚未见报道。笔者用不同种类的保存液保存黄鳝精子，观察对精子活力的影响，以筛选出保存效果好的精子保存液，并在人工授精技术的研究中应用，现将研究情况报告如下。 相似文献
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鱼卵和胚胎冷冻保存研究进展 总被引：3，自引：1，他引：3
<正> 一、前言自Polge等(1949)成功地用甘油冷冻保存动物精子以来,低温生物学的原理很快被应用于动物卵子和胚胎的冷冻保存。目前,冷冻配子和胚胎已在医学和畜牧业中得到广泛应用。低温生物学在畜牧业生产和种群管理中的成功应用极大地鼓舞了鱼类生理学者们,并使其对鱼类卵子和胚胎的低温保存进行实验研究。由于鱼类卵子体积很大,具有二层 相似文献
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鱼类精液超低温冷冻保存的基本原理、研究现状及应用前景 总被引：6，自引：1，他引：6
<正> 利用低温保存生命是一项新兴的科学手段。自1949年英国Polge用甘油冷冻保存动物精液成功以来,这项技术突飞猛进。目前冷冻配子及胚胎已经应用在医学研究和畜牧业生产上。而水产生物配子(主要是精子)的冷冻保存,经过三十年的努力也取得很大成就。从现有资料看,鱼类精液冷冻保存的研究大多集中在冷水性的鲑鳟鱼类以及某些海水鱼类上,结果较为理想。而有关鲤科鱼类精液冷冻保存的研究报道尚不多。冷冻配子具有超越时空的功效,可以使不同生殖期或地理间隔的品系得以交配,性转换的个体得以自交;可以不间断地为水产遗传学及生物技术研究提供配子材料;还可 相似文献
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【目的】本文旨在探究长期超低温冷冻保存中鞍带石斑鱼精子质膜、活力、超微结构及酶活性的变化，为阐明影响鞍带石斑鱼精子冷冻保存质量的相关机制提供理论依据。【方法】采集2022年鞍带石斑鱼鲜精及储存时间分别为23、49、61个月冷冻保存精液，用伊红-苯胺黑染色方法检测精子质膜完整性；用计算机辅助精子分析仪（CASA）检测精子运动参数；测量精浆和精子中琥珀酸脱氢酶（SDH）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽还原酶（GR）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和肌酸激酶（CK）共六种酶活性的变化及三磷酸腺苷（ATP）浓度变化；用扫描电镜和透射电镜观察鲜精和冻精超微结构。【结果】伊红-苯胺黑染色检测结果发现，鲜精质膜完整性最高为83.43±2.73 %，经过超低温冷冻后，精子质膜完整性显著降低（P<0.05），且随着冷冻保存时间的延长而逐渐降低。CASA结果显示鲜精活力最高为90.47±3.34 %，经过超低温冷冻后精子活力显著降低（P<0.05），但长期保存23-61个月精子活力无显著性差异，精子活力保持在63.95±3.66 %-68.58±2.73 %，具有稳定的活力，且鲜精与冻精之间精子平均直线运动速度（VSL）、平均曲线运动速度（VCL）和平均路径速度（VAP）均没有显著差异（P>0.05）。精子超微结构显示，鲜精形态结构正常、线粒体排列结构规则、形态大小正常。经过超低温冷冻保存后，精子形态结构损伤明显，表现为精子头部质膜破损、细胞质外漏、细胞核膜破损、尾部鞭毛断裂或脱落等损伤；鞍带石斑鱼精浆和精子超低温冷冻前后六种酶活性的变化及ATP含量结果显示，经过超低温冷冻后，精子内SOD、GSH-PX和CAT三种酶及ATP含量均有显著性降低（P<0.05）。精浆中酶活力升高，除GR和CAT外，其余酶活性均差异显著（P<0.05）。【结论】长期超低温冷冻对鞍带石斑鱼精浆和精子酶活性、精子活力及精子超微结构均具有较显著影响，【意义】研究结果为鱼类精子冷冻损伤机理研究积累了丰富的数据，为鱼类精子长期冷冻保存提供了技术参考和评价指标。 相似文献
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鱼类精液冷冻保存技术操作规程 总被引：7，自引：1，他引：7
经过十多年的努力，完成了我国主要淡水养殖鱼类，如青鱼、草鱼、鲢鱼、鳙鱼。兴国红鲤、镜鲤、团头动，以及大口鲶、长吻既和中华鳄等十余种鱼类基础生物学的多项研究，超低温冷冻保存技术和批量冷冻保存技术研究，达到生产上实际应用水平。在长江水产研究所建成我国第一座淡水渔类冷冻精液库，冷冻精液的解冻复活率、解冻后冻精受精率和孵化率分别达到（60－75％。80-95％和75－90％。为促进我国鱼类精液冷冻保存技术的进一步发展，使淡水养殖鱼类精液冷冻保存规范化、标准化，并逐步在渔业生产上推广应用，特制订本规程。l亲鱼的选择和精… 相似文献
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《渔业科学进展》2014,(1)
以云纹石斑鱼精液为实验材料,对精子稀释液、抗冻剂种类和适宜浓度、冷冻保存液进行了筛选。结果表明,利用9g/L NaCl、10g/L KHCO3和10%小牛血清配制而成的稀释液EM1-2适宜于云纹石斑鱼精子冷冻保存,以2ml冷冻管为精子容器,在60L液氮生物保存罐中冷冻保存精子,冷冻解冻精子活力可达56.67%±5.77%,要优于TS-2、ES1-3和其他EM系列稀释液冷冻保存精子活力。利用EM1-2为基础液对抗冻保护剂进行筛选,结果显示,10%~20%的二甲基亚砜(DMSO)和1-2-丙二醇(PG)冷冻保存后精子活力无显著差异(P0.05),其中15%的DMSO和10%PG冷冻保存精子效果最优,解冻后精子活力分别可达54.52%±7.81%和57.24%±3.69%。利用冷冻保存1年的精液与云纹石斑鱼卵进行受精,受精率和孵化率均达到80%以上,与新鲜精子无显著性差异(P0.05)。本研究表明,利用EM1-2配制15%的DMSO或10%的PG可用于冷冻保存云纹石斑鱼精液。在此基础上,建立了精子冷冻库,保存精子130ml,为人工繁育和杂交育种提供了丰富的精子源。 相似文献
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以云纹石斑鱼精液为实验材料,对精子稀释液、抗冻剂种类和适宜浓度、冷冻保存液进行了筛选。结果表明,利用9g/L NaCl、10g/L KHCO3和10%小牛血清配制而成的稀释液EM1-2适宜于云纹石斑鱼精子冷冻保存,以2ml冷冻管为精子容器,在60L液氮生物保存罐中冷冻保存精子,冷冻解冻精子活力可达56.67%±5.77%,要优于TS-2、ES1-3和其他EM系列稀释液冷冻保存精子活力。利用EM1-2为基础液对抗冻保护剂进行筛选,结果显示,10%~20%的二甲基亚砜(DMSO)和1-2-丙二醇(PG)冷冻保存后精子活力无显著差异(P0.05),其中15%的DMSO和10%PG冷冻保存精子效果最优,解冻后精子活力分别可达54.52%±7.81%和57.24%±3.69%。利用冷冻保存1年的精液与云纹石斑鱼卵进行受精,受精率和孵化率均达到80%以上,与新鲜精子无显著性差异(P0.05)。本研究表明,利用EM1-2配制15%的DMSO或10%的PG可用于冷冻保存云纹石斑鱼精液。在此基础上,建立了精子冷冻库,保存精子130ml,为人工繁育和杂交育种提供了丰富的精子源。 相似文献
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为研究适用于乌克兰鳞鲤精子的超低温冷冻保存方法,分析比较3种稀释液[Hank′s、Cortland、Freezefish冻精稀释液,精子与每种稀释液均设置3种比例(1∶1、1∶3、1∶5)]及3种体积分数为10%的抗冻剂(二甲基亚砜、1,2-丙二醇和丙三醇)对乌克兰鳞鲤精子低温(4 ℃)保存活力的影响;运用筛选出的冷冻保护液及稀释比例,分析比较3种“3步冷冻法”以及3种解冻温度(20、30、40 ℃)对乌克兰鳞鲤精子活力的影响。试验结果表明,采用Hank′s作为稀释液,10%二甲基亚砜为抗冻剂,精子与稀释液比例为1∶3,平均降温速率为12 ℃/min,解冻温度为30 ℃时,精子活力最高(>68%)。通过对稀释液、抗冻剂、稀释比例、降温速率和解冻温度的层层筛选,建立了适宜乌克兰鳞鲤精子超低温冷冻保存的方法,在其种质保护方面具有重要意义,为开展其他鱼类精子超低温冷冻保存提供参考。 相似文献
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一部分鱼类,尤其是鲑科鱼类雌雄成熟期相差几周时间,因而给种苗生产带来一定困难。为解决这一问题,同时也为了进行异种间杂交技术的研究,开发简便易行的鱼类精子的保存方法,便成为一个重要和现实的课题。精子低温保存方法的研究自40年代以来一直在不断地进行,但鲑科鱼类的精子大都在保存10天前后便失去运动和受精能力。本次试验,成功地将虹鳟精子保存了50天以上。下面将这种方法向读者做一介绍。 相似文献
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半滑舌鳎精子冷冻保存对于人工繁殖育苗、杂交育种、雌核发育及其性别控制研究具有重要的意义,为此,本文对半滑舌鳎精子冷冻保存方法进行了研究。分别利用2．8mol／L的二甲基亚砜（DMSO）、甘油（Gly）和1,2-丙二醇（PG）冷冻保存该鱼精子。结果显示,DMSO冷冻保存精子的活力较高。利用MPRS＋2．8mol／L DMSO以1：0．5、1：1、1：1．5和1：2的比例稀释并冷冻精子,1：1比例在冻前能够抑制精子的运动,冻后活力可达82．50±3．54％,显著高于其他稀释比例（P〈0．05）。分别利用冷冻保存液A（MPRS＋2．8mol／L DMSO）和B（TS-2＋2．8mol／LDMSO）稀释平衡精子,精子在A中的冻前快速运动时间、寿命分别为37．75±6．45S和145．00±78．98S,与鲜精无显著差异（P〉0．05）。利用以上两种冷冻稀释液冷冻保存精子,精子在A液中的冻后活力和寿命分别可达53．50±6．69％和98．00±13．51s,冷冻效果优于B液（P〈0．05）。冷冻后精子的受精率和孵化率分别为55．00±5．00％和35．00±13．23％,受精率与鲜精无显著性差异（P〉0．05）,因此认为MPRS＋2．8mol／L DMSO可用于半滑舌鳎精子的冷冻保存。 相似文献