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中国对虾上皮样细胞培养研究 总被引：8，自引：1，他引：8
１９８９年８月起进行了中国对虾上皮细胞的原代和传代细胞培养。对取自甲壳，步足等部位的对虾上皮组织培养研究，共培养６批，获得传代细胞１１株，其中１株传至２５代，传代细胞形态为梭形和下沉上皮细胞形态相似。生长率测定结果，第４天细胞增殖达高峰，倍增时间为４８．７２ｈ。 相似文献
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斑节对虾性腺组织、细胞的原代培养条件优化 总被引：1，自引：0，他引：1
通过观察不同成分培养基及不同培养方法培养的斑节对虾性腺组织及细胞原代培养生长情况,分析细胞活力及生长相关基因表达情况,判断3种改良培养基的适用条件,为进一步细胞培养试验提供支持。试验结果表明,以L-15培养基为基础培养基,不同配方的培养效果差距较大,其中机械分离法可成功培养离体斑节对虾性腺组织,而酶解法与3号培养基结合效果较好;在培养过程中可见离体卵母细胞多呈悬浮生长,部分可见分裂相,离体精原细胞多呈贴壁生长,1号、2号培养基中的细胞可维持良好生长状态达一周以上;CCK测试结果表明,机械分离的性腺组织和酶解法分离的性腺细胞分别在1号、3号培养基中有更高的细胞活力,而2号培养基中的性腺组织及细胞在两种培养方法下的活力差别不大。进一步的荧光定量PCR检测了离体培养过程中MAPK信号通路相关基因的表达变化情况,结果表明,Ras、c-Mos、MEK1、ERK基因在卵母细胞中表达变化更显著,且c-Mos基因与离体细胞生长发育情况呈正相关。本试验系统性地筛选了适宜斑节对虾性腺组织、细胞的原代培养方法,为了解培养过程中的生理过程变化提供了相关参考数据。 相似文献
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本研究在酶消化法的基础上,通过比较不同的肝组织分离和培养条件,获得鲤鱼肝原代细胞培养的最佳培养方法和条件。首先,结合细胞数量和台盼蓝染色所得的细胞存活率,比较了胰蛋白酶消化鲤鱼肝组织的不同反应温度和时间,结果表明:肝组织用0.25%(m/V)胰蛋白酶在25℃消化40 min时细胞分离效果最好。其次,经酶消化得到的肝原代细胞粗制液,设置4种不同的细胞纯化和培养条件:1)将细胞直接重悬于含10%胚牛血清(FBS)的L-15/DMEM培养基中培养;2)以10%鲤鱼血清取代培养基中的胚牛血清重悬细胞并培养;3)将细胞经Percoll液密度梯度离心纯化后,重悬于含10%胚牛血清的L-15/DMEM培养基中培养;4)细胞经Percoll纯化后,重悬于含10%鲤鱼血清的L-15/DMEM培养基中培养。利用光学显微镜观察肝细胞的形态,进而通过HE染色法检测,结果表明经Percoll纯化后,肝细胞纯度显著提高;采用MTS/PMS法检测肝细胞的增殖情况,结果表明鲤鱼血清代替胚牛血清培养细胞,肝细胞活力显著提高。本研究将为建立稳定的毒理学肝原代细胞实验模型奠定基础。 相似文献
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国内外对虾病毒病研究综述 总被引：3，自引：0，他引：3
本文就对虾病毒最新进展与动态进行了概述。具体介绍了对虾病毒研究的各项成果,列出了已见报道的近20种对虾病毒病原的中英文名称;描述它们的生物学和病理学的一些特征,包括对虾病毒的地理分布、对虾病毒的传播途径、感染病对虾的发病症状以及宿主虾细胞、组织和器官的病理变化;概述了对虾病毒的诊断方法:显微镜观察生物学测定、免疫学方法、细胞培养、生化检验、分子生物学方法;根据目前还未发现有效治疗对虾病毒病的药物现状,指出了几种预防对虾病毒病的措施。 相似文献
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为深入了解对虾白斑综合征病毒(WSSV)的致病机理和体外培养的对虾细胞对WSSV的敏感性,实验以1.5×L-15培养基培养刀额新对虾原代淋巴细胞,待细胞形成单层后接种WSSV,通过倒置显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜观察接种病毒后细胞的病理变化。结果显示,使用1.5×L-15培养基培养对虾淋巴组织,3 h后可观察到有细胞迁出,并能迅速形成单层,36 h后细胞的迁出汇合率可达80%,且能存活20 d以上。接种WSSV 24 h后,出现病变的细胞变圆、漂浮,细胞之间的网状结构消失,最后细胞破碎、溶解;接种WSSV 48 h后Hoechst 33342染色结果显示,感染的细胞核深染,且变形、膨大;电镜下,细胞核内含大量成簇分布的杆状病毒,细胞器被挤向细胞边缘,细胞膜轮廓模糊。研究表明,纯化的病毒粒子接种体外培养的淋巴细胞,能够使其产生明显病理变化,证明了WSSV对体外培养的淋巴细胞具有感染力,并且可在淋巴细胞中增殖。 相似文献
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青海湖裸鲤肾细胞的原代培养和传代培养 总被引：2，自引：0，他引：2
采用组织块移植培养技术,用RPMI 1640培养基对来源于青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)肾组织的细胞进行原代培养。结果显示:培养48 h可见组织块周围有细胞迁出,并形成生长晕;培养一周可形成单层细胞;对原代培养的单层细胞用胰蛋白酶-EDTA消化后,传代培养至第四代。实验初步确立青海湖裸鲤肾细胞培养条件为:培养基RPMI 1640,培养温度为27℃,pH值为7.0~7.5,原代培养血清浓度为20%,传代培养的血清浓度为10%,无需通入CO2。 相似文献
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采用组织块移植培养技术,对来源于中华鳖(Trionyx sinesis)肝脏、脾脏、肾脏、心脏、皮肤及裙边组织细胞进行了原代培养,细胞均可从组织块中迁出并生长成单层细胞。对原代培养的单层细胞用胰酶-EDTA消化后传代培养,初步建立了可连续传代的中华鳖肝脏、脾脏、肾脏、心脏及皮肤组织细胞系;还对细胞的培养条件、冷冻保藏与复苏、染色体数目等进行了研究,初步确定中华鳖细胞培养的条件为32℃,MEME或R1640培养基,血清浓度为20%(V/V)。二甲基亚砜(DMSO)冻存保藏后,细胞复苏生长良好,中华鳖细胞染色体数目为2n=66。 相似文献
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采用组织块移植培养技术,对来源于中华鳖(Trionyx sinesis)肝脏、脾脏、肾脏、心脏、皮肤及裙边组织细胞进行了原代培养,细胞均可从组织块中迁出并生长成单层细胞.对原代培养的单层细胞用胰酶-EDTA消化后传代培养,初步建立了可连续传代的中华鳖肝脏、脾脏、肾脏、心脏及皮肤组织细胞系;还对细胞的培养条件、冷冻保藏与复苏、染色体数目等进行了研究,初步确定中华鳖细胞培养的条件为32℃,MEME或R1640培养基,血清浓度为20%(V/V).二甲基亚砜(DMSO)冻存保藏后,细胞复苏生长良好,中华鳖细胞染色体数目为2n=66. 相似文献
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本文综述了对虾池塘人工调节水质措施的生态作用，旨在为养殖者提供有效的调节水质方法，并兼顾养殖的经济效益和环境效益，为养殖业的可持续发展提供技术保障。本文将水质调节措施分为物理、化学和生物三大类别，每一个类别双包含了若干具体的方法。 相似文献
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Many coral reefs are threatened because of anthropogenic impacts such as destructive fishing methods for marine ornamentals. The marine ornamental industry is currently almost completely dependent upon wild collections. The development of commercially feasible methods to culture ornamental species could help to reduce the need for wild‐collected specimens and reduce pressure on coral reefs. Advances in larval rearing and nutrition would help overcome the bottlenecks that impede the commercial production of many marine ornamental species. This article focuses on research for improving the production of the fire shrimp, Lysmata debelius. Experiments were performed with larval fire shrimp to evaluate (1) the importance of essential fatty acid enrichment of live prey (rotifers and Artemia) and (2) feeding penaeid shrimp muscle tissue to improve survival to metamorphosis. We also provide the fatty acid composition of Day‐1 posthatch fire shrimp larvae. The enrichment of live prey with docosahexaenoic acid did not improve larval growth, survival, or time to metamorphosis, but larvae fed live prey together with pureed penaeid shrimp muscle had survival rates of 9.8 ± 1.2%. The data and protocols developed in this study provide a foundation and baseline for future fire shrimp larval studies. 相似文献
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传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是一种分布较广、危害较大的对虾病毒,已被世界动物卫生组织(OIE)列为须向其申报的甲壳类重要疫病病原。IHHNV在我国已形成了一定的流行趋势,目前仍是严重危害我国养殖虾类的重要病毒。本文从IHHNV的流行地区及危害、宿主、致病类型、对宿主不同年龄阶段的致病性差异、与白斑综合征病毒(WSSV)的干扰作用、感染机制和致病机理方面,综述了与IHHNV致病性相关的研究进展,以期为进一步深入研究IHHNV防控提供参考资料。 相似文献
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文章探讨了无公害健康养殖与环保饲料营养的关系以及环保饲料的应用,对环保饲料的营养饲料源、添加剂的质量要求、研制环保饲料的重要性,对食品安全和养殖安全的关系,以及环保饲料在无公害健康养殖的应用技术进行分析。 相似文献
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White spot syndrome virus (WSSV) and infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV) are the major viral pathogens of penaeid shrimp worldwide (Lightner & Redman 1998). Litopenaeus vannamei was introduced into China from the Americas, and quickly became widely cultured. Following its introduction, both IHHNV and WSSV have become important pathogens of cultured penaeid shrimp and have had a huge impact on the culture industry in China in recent years. 相似文献
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本文报道了１９９３年和１９９４年在山东烟台地区养殖对虾发生严重流行病原因的调查结果，着重从养殖环境和饲养管理技术上分析产生疾病的原因，提出了在养殖过程中增强对虾体质、预防疾病的七项措施。 相似文献
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<正> 近年来,养虾业在养殖渔业中迅速崛起,并已向大面积、高密度、高产量发展,而虾病的危害严重地影响了这一产业的经济效益。据专家估测,虾类疾病所造成的年损失率在30%左右。目前已知的虾病已有40多种,最主要的病害是由弧菌引起的传染性疾 相似文献
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Biosecurity and Genetic Improvement of Penaeid Shrimp: Applications to the Marine Ornamental Industry 总被引：1，自引：0，他引：1
The marine ornamental industry relies almost exclusively on wild-caught fish, invertebrates, and live rock to meet the market demands of aquarium hobbyists. For the industry to expand, appropriate technologies are needed to mitigate disease problems and reduce the dependence on wild stocks. Biosecurity protocols and techniques for genetic improvement have recently been applied to the culture of penaeid shrimp for human consumption, and these approaches may be applicable to an emerging marine ornamental industry. Biosecure production systems for penaeid shrimp are being developed in response to disease problems and growing concerns about environmental pollution from pond effluent. Biosecure systems rely on minimal water exchange and provide shrimp farmers with an opportunity to move production away from the coastline. In addition to the development of biosecure production systems, researchers at the Oceanic Institute have established a selective breeding program for the Pacific white shrimp, Litopenaeus vannamei. To date, significant improvements in shrimp growth and disease resistance have been made through selective breeding. It is likely that advances in biosecure technologies and genetic improvement will be applicable to the culture of marine ornamental shellfish and finfish and will contribute to an economically viable and environmentally sustainable industry. 相似文献
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对虾的主要疾病及其诊断方法 总被引：3，自引：0，他引：3
诊断对虾病原的方法有传统的形态病理学（光镜和电镜直接观察和组织病理学等）、扩增和生物测定、微生物学和血清学方法，对皮下及造血组织坏死病毒病（IHHNV）、肝胰脏细小病毒病（HPV）、拖拉症（Taura syndrome,TS）、白斑综合症（WSSV）、斑节对虾型杆状病毒病（MBV）和杆状对虾病毒病（BP）等病原均采用非放射性的基因组探针目前已研制出了NHP、某些弧菌（Vibrio spp）和微孢子虫的传统基因探针，根据聚合酶链式反应（PCR），采用DNA扩增方法确立的检测某些病原的高敏感性方法也应用在对虾病原诊断上。 相似文献