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乳酸菌胞外产物对副溶血弧菌抑制作用的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
分离到对副溶血弧菌有抑制作用的3株乳酸菌,命名为A-1、A-2、A-3。对其胞外产物的抑制作用进行研究,结果表明:3株乳酸菌胞外产物对副溶血弧菌有较强抑制作用,抑菌环直径分别可达18.6mm、20.3 mm1、9.5 mm;抑菌物质对热处理不敏感:在60℃、80℃抑菌活性基本不变,在121℃处理20min条件下抑菌效果分别是原液的67%,83%,74%,蛋白酶K处理对其活性有较大影响,抑菌成分可能是细菌素。进一步研究了细菌素抑菌活性与乳酸菌培养时间的关系。根据形态特征和常规生理生化反应进行鉴定,A-1、A-2鉴定为嗜热链球菌,A-3鉴定为嗜酸乳杆菌。 相似文献
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鱼源乳酸菌对水产病原菌的抑制作用研究 总被引：1，自引：0，他引：1
《水产科学》2015,(9)
为研究高活性乳酸菌的抑菌作用,采用牛津杯法体外评价了6株鱼源乳酸菌对9种水产致病菌的抑菌特性,并通过纸片扩散法测定21种抗生素对嗜水气单胞菌的抑制作用。试验结果表明,6株乳酸菌对嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、维氏气单胞菌及豚鼠气单胞菌均有明显的抑制作用,而对鳗弧菌、大肠杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、杀鲑气单胞菌、小肠结肠炎耶尔森菌无抑制效果,且发酵上清液的抑菌能力大于菌体。药敏试验发现仅3种药物能有效抑制嗜水气单胞菌的生长,而17种抗生素的抑菌效能已不同程度减弱甚至消失。与抗生素类药物相比,乳酸菌发酵液的抑菌能力在一定程度上优于抗生素,为抗生素替代品开发奠定基础。 相似文献
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解淀粉芽孢杆菌HE活性成分鉴定及抗菌特性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为明确解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)HE发酵液中的活性成分及抗菌特性,根据解淀粉芽孢杆菌发酵液抑菌活性稳定性,用PCR检测脂肽合成相关的基因,再采用UPLC-Q-TOF-MS对活性物质进一步分析;用二倍稀释法测定脂肽对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并从显微结构上来探讨其抗菌作用。稳定实验表明该菌株产生抑菌活性物质对高温、酸、碱和蛋白酶具有一定的耐受性;4对引物的扩增产物经过克隆、测序和BLAST分析,表明解淀粉芽孢杆菌HE基因组含有ituA、fenB、sfP、mycB的脂肽合成相关基因;液质联用分析发现脂肽粗提物中含有Surfactin、Iturin和Fengycin这3类脂肽类抗生素;抑菌圈法测定抗菌脂肽对嗜水气单胞菌的MIC和MBC均为137.97μg·mL-1;显微特征表明脂肽可以导致嗜水气单胞菌细胞膜塌陷和孔洞。该研究结果可为解淀粉芽孢杆菌活性代谢产物结构鉴定和安全性评价提供参考。 相似文献
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从大菱鲆（Scophthalmus maximus）肠道内分离出8株乳酸菌，经16S r DNA鉴定为Lactobacillus sp.，以对水产病原菌的抑制和对抗生素的敏感性为指标，研究乳酸菌的特性。其中，菌株N5对鳗弧菌（Vibrio anguillarum）、哈维氏弧菌（V. harveyi）、副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）均具有较强的抑制作用，对氨苄青霉素、庆大霉素和罗红霉素敏感。菌株N5发酵上清液经加热、排酸和过氧化氢酶处理后，仍有抑菌作用；经蛋白酶处理后失去抑菌能力，推测菌株N5分泌的抑菌物质为耐热的乳酸菌素，其可以抑制病原菌生物膜的形成。菌株N5在凡纳对虾（Litopenaeus vannamei）肠道定植5 d后，加入鳗弧菌和哈维氏弧菌，继续养殖7 d，死亡率显著降低。本研究结果可为菌株N5制备水产养殖益生菌剂提供实验依据。 相似文献
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带鱼肠道中芽孢杆菌的分离鉴定及其发酵液抗菌性质研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从带鱼肠道中分离筛选到1株具有广谱抗菌活性的菌株JFL15,其发酵液对嗜水气单胞菌、美人鱼发光杆菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、大肠杆菌、迟钝爱德华氏菌、铜绿假单胞菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、查氏弧菌均有较强抑菌作用。通过形态特征、生理生化特征、16S rDNA序列分析以及系统发育进化分析,菌株JFL15与暹罗芽孢杆菌的同源性最高,达98.05%,初步鉴定为暹罗芽孢杆菌。对暹罗芽孢杆菌JFL15的发酵液进行研究发现,暹罗芽孢杆菌JFL15的发酵液对酶、温度、酸碱度和紫外线均不敏感,且发酵产物储存较长时间后仍具有较强抑菌活性。 相似文献
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《水产科学》2021,(4)
以副溶血弧菌、创伤弧菌为指示菌,采用牛津杯法测定37株海洋放线菌菌株无菌发酵液的抑菌作用,筛选出抑菌作用较强的菌株并测定其抑菌谱;将抑菌作用较强的菌株接种到氨氮质量浓度为50 mg/L的培养基中发酵7 d,采用靛酚蓝分光光度法测定不同菌株发酵液中的氨氮质量浓度,筛选出兼具抑菌和降解氨氮功能的放线菌优良菌株;通过形态学观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析,对筛选出的优良菌株进行种类鉴定。结果表明,15株放线菌对副溶血弧菌和创伤弧菌均具有抑制作用,其中菌株F28的抑菌作用最强,对副溶血弧菌和创伤弧菌的抑菌圈直径分别为(31.57±0.63) mm和(18.93±0.92) mm,且该菌株对供试的10种病原菌均有较强的抑制作用,抑菌谱较广;菌株F28具有氨氮降解能力,降解率为46.86%;结合抑菌作用测定结果,认为菌株F28兼具抑菌和降解氨氮功能,具有潜在的开发应用前景。初步鉴定F28菌株为梅久兰链霉菌。 相似文献
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分别以蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides)、皮杆菌(Dermabactersp)、噬菌蛭弧菌(Bdell ovibro bacteriovorus)和蜂房芽孢杆菌(Bacillus alvei)4株细菌代谢产物不同溶剂(石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇)的提取物腹腔注射鲫鱼(Carassius auratus),通过测定注射提取物后鲫鱼的血清凝集抗体效价、离体白细胞吞噬活性、吞噬细胞杀菌活性,研究不同代谢产物、不同提取物对鲫鱼免疫功能的影响,以确定代谢产物中活性物质的有效活性部位。结果表明:蕈状芽孢杆菌代谢产物中的活性物质主要集中在石油谜和乙酸乙酯提取物中;噬菌蛭弧菌代谢产物中的活性物质主要集中在石油醚和三氯甲烷提取物中;蜂房芽孢杆菌代谢产物中的活性物质主要集中在石油醚提取物中;而皮杆菌代谢产物中的活性物质则集中在乙酸乙酯和石油醚提取物中。试验结果为进一步追踪分离活性单体提供了基础资料。 相似文献
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一株短小芽孢杆菌B1的筛选鉴定及其抗菌特性研究 总被引：3，自引：0，他引：3
为筛选抗水产弧菌的益生菌株,自西沙海域采集的珊瑚和海水样品共分离到125株细菌,从中筛选出1株无溶血性且对多株病原菌具有拮抗作用的海洋细菌B1。基于生理生化及16SrDNA序列鉴定海洋细菌B1为短小芽孢杆菌。以副溶血弧菌13150为病原指示菌,用琼脂扩散法测定发酵液抑菌活性,并通过卤虫浸泡方式和药敏试验方法检测短小芽孢杆菌B1的安全性,同时进行温度、酸碱度、盐度的发酵条件优化研究。试验结果显示,短小芽孢杆菌B1对副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈氏弧菌等有显著的拮抗作用;共培养试验显示,加入等量短小芽孢杆菌B1无菌上清液可显著抑制副溶血弧菌的生长;安全性试验发现,短小芽孢杆菌B1对卤虫的72h半致死密度为108cfu/mL,副溶血弧菌13150的72h半致死密度为105cfu/mL。此外,药敏试验表明,短小芽孢杆菌B1只对20种常规抗生素中的5种产生抗性;优化后的短小芽孢杆菌B1发酵条件为:温度30℃,pH 7.0,NaCl质量分数为2%。研究表明,短小芽孢杆菌B1具有防治水产养殖病原弧菌的应用潜力。 相似文献
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采用复性电泳技术,研究环境pH、温度及培养时间对哈维氏弧菌TS-628菌株胞外产物(ECP)蛋白酶活性的影响。结果表明,胞外产物蛋白酶最适反应pH在8.5左右,酸对ECP蛋白酶活性的抑制明显强于碱对它的抑制作用;最适反应温度在20～50℃之间,20℃以下或50℃以上蛋白酶活性则受到明显抑制,表明蛋白酶不仅对高温敏感,对低温也很敏感;培养12h的胞外产物蛋白酶活性最强。最适温度和pH条件下,主要出现3种蛋白酶,其中分子量为94kDa和26kDa的两种蛋白显示了很强的蛋白酶活性,而且能在比较极端的温度和pH值条件下保持活性,而分子量为35kDa蛋白酶只在最适反应条件下出现,并且该蛋白酶的最适反应条件与弧菌病暴发时的环境条件极为相似。由此可推测分子量94kDa和分子量为26kDa的两种蛋白可能是弧菌维持生存所必需,而分子量为35kDa的蛋白酶虽然只出现在特定条件下,却可能在致病过程中起重要作用。 相似文献
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为探明光合理细菌对水产养殖动物病害的生物防治功能，对病鳖、鳗及南美白对虾动物体上的病原菌进行分离、纯化与鉴定，人工感染健康动物检测致病性；探讨耐盐红螺菌对病害细菌分离株的仰菌效能，和有效抑菌作用时细胞所处的生长期。试验结果表明，水产动物病害细菌分离株为孤菌属，气单胞菌属和假单胞菌属菌株；耐盐红螺菌的代谢产物对商害细菌分离株均有抑制作用，其平坂柳菌圈为1.2-1.4cm，最低抑菌浓度多为4-8倍稀释液；耐盐红螺菌的拮抗物质随细胞对数生长过程中生成，至细胞衰亡期达到最大值。 相似文献
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本研究利用MRS培养基,从山东东营刺参(Apostichopusjaponicus)养殖池塘环境中分离到56株乳酸菌。以刺参腐皮综合征2种重要致病菌灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为指示菌,采用牛津杯法测定所分离的乳酸菌对2株致病菌的抑制效果,筛选出1株具有较强抑菌活性的乳酸菌CSND-6,并对该细菌的形态、胞内产物和胞外产物的抑菌活性、生理生化实验、16S r DNA序列分析、菌株生长特性及对刺参安全性进行了研究。结果显示,菌株CSND-6对灿烂弧菌和假交替单胞菌的生长具有较好的抑制作用。其中,胞内产物的抑菌圈分别为17、22 mm,胞外产物的抑菌圈分别为25、31 mm。该菌株对刺参的高浓度浸浴胁迫实验结果表明,所分离的菌株对刺参是安全的。通过生理生化和16S rDNA序列分析表明,CSND-6属于乳杆菌科(Lactobacillaceae),与副干酪乳杆菌(LactobacillusparacaseiJCM1171)的相似性为99.83%。菌株CSND-6在30℃~44℃、pH为6~8范围内生长较快,24 h后进入对数生长期,28~32 h时达到生长高峰,最高值达2.10×109CFU/ml。本研究筛选的副干酪乳杆菌属于刺参池塘养殖环境中土著益生菌,对刺参的主要病原菌抑制效果较好,并表现出了较好的生长特性,可为养殖池塘刺参疾病的生态防控和乳酸菌开发提供参考。 相似文献
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为了解仿刺参体腔液的抗菌谱以及不同二价金属离子对仿刺参体腔液抗菌活性的影响,实验采用生长曲线测定法分别测定了仿刺参体腔细胞破碎液上清和体腔液上清对哈维氏弧菌、灿烂弧菌、希瓦氏菌、假交替单胞菌、金黄色葡萄球菌、溶壁微球菌、停乳链球菌、拟诺卡式菌生长的影响,并通过该法以溶壁微球菌为受试菌测定了海洋环境中常见的Fe2+、Ca2+、Cd2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+对仿刺参体腔液上清抗菌活性的影响。结果显示,仿刺参体腔细胞破碎液上清对受试的8株细菌的生长均无抑制作用,体腔液上清对溶壁微球菌的生长有明显的抑制作用,而对其他7株受试菌的生长无明显影响;Mn2+和Zn2+可明显增强体腔液上清对溶壁微球菌的生长抑制作用,而Fe2+、Ca2+、Cd2+、Mg2+对体腔液上清的抗菌活性无明显影响。研究表明,仿刺参体腔液在体外状态下只具有窄谱抗菌活性,与抗菌相关的免疫因子主要存在于体腔液上清中;体腔液中的抗菌免疫因子对海洋环境中的常见二价金属离子有一定的适应性,而且适当浓度的Mn2+和Zn2+可能具有促进仿刺参抗菌应答能力的作用。 相似文献
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植物源杀菌剂因其成分复杂、无污染、属性天然等特点,为水产养殖防治病原菌提供了新思路。本文以虎杖、千里光、黄柏、黄岑、苦参等为原材料,研制开发植物源杀菌剂,研究结果表明其对12种水产养殖常见病原菌均有较好的抑菌效果,对大肠杆菌、荧光假单胞菌的的最低抑菌浓度（MIC）为33μL／L,对金黄色葡萄球菌、痢疾志贺氏菌、温和气单胞菌的MIC为25μL／L,对肠炎沙门氏菌、单增李斯特氏菌的MIC为50μL／L,对拟态弧菌的MIC为100μL／L,对溶藻弧菌的MIC为250μL／L,对弗尼斯弧菌、副溶血弧菌的MIC为500μL／L,对创伤弧菌的MIC为1000μL／L。 相似文献
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Jyotirmayee Pradhan Basanta Kumar Das Swagatika Sahu Nilima Priyadarshini Marhual Anil K Swain Bibudhendra Kumar Mishra Ambekar E Eknath 《Aquaculture Research》2012,43(9):1287-1295
The crude ethanol, methanol and aqueous extracts of Spirulina (Spirulina platensis) have been investigated for antibacterial activity using disc diffusion assays against various strains of fish and shellfish pathogens e.g. Pseudomonas putida (ATCC 49128; PP1, PP2), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 35032; PA1, PA2), Pseudomonas fluorescens (PF1, PF2), Aeromonas hydrophila (ATCC 49140; AH1, AH2, AH3, AH4), Vibrio alginolyticus (VA), Vibrio anguillarum (VAN), Vibrio fluvialis (VF), Vibrio parahaemolyticus (VP), Vibrio harveyi (VH), Vibrio fisheri (VFS), Edwardsiella tarda and animal isolates of Escherichia coli (O115, O1, O156, O164, O111 and O109). The minimum inhibitory concentrations (MIC) of crude extracts were determined using the tube dilution method. Ethanolic extract showed comparatively higher antibacterial activity (15.66 mm) than that of methanolic and aqueous extract of S. platensis along with their respective MIC values, ranging from 100 to 150 μg mL?1. The aqueous extract had no effective antibacterial activity against the test microorganism. The study suggested that S. platensis may have potential use in aqua feed as an antimicrobial agent of pharmaceutical interest. 相似文献
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Haisheng Lin Shoichiro Ishizaki Yuji Nagashima Kiyohito Nagai Kaoru Maeyama Shugo Watabe 《Fisheries Science》2017,83(3):489-498
The aim of this research was to characterize immune-related antibacterial substances from pearl oyster Pinctada fucata induced by bacterial invasion. Bacteria inoculation was performed by injecting 0.1 ml of 1.0 × 1012 colony-forming units/ml Vibrio parahaemolyticus into adductor muscle. Acidic extracts were prepared with 0.1% trifluoroacetic acid from different tissues after 8 h of injection, and antibacterial activity against V. parahaemolyticus was determined via the microdilution broth method. The acidic extracts from gills of inoculated oysters (AEg) showed stronger antibacterial activity than those from non-inoculated ones. Based on this result, antibacterial proteins were purified from AEg via two-step gel filtration chromatography, followed by high-performance liquid chromatography using a TSkgel G3000 column. Protein components were analyzed by both sodium dodecyl sulfate and native polyacrylamide gel electrophoresis. As a result, two antibacterial proteins, APg-1 (with a molecular mass of approximately 210 kDa) and APg-2 (of approximately 30 kDa), were obtained from AEg. Matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry analysis and partial amino acid sequences revealed that these proteins might be novel antibacterial proteins. These results indicate that antibacterial proteins are potentially upregulated in the gill of pearl oysters or released therefrom for defense against bacterial invasion. 相似文献
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Phyu Phyu THAN Carmelo S . DEL CASTILLO Takeshi YOSHIKAWA Taizo SAKATA 《Fisheries Science》2004,70(4):659-666
ABSTRACT: Fourteen bacterial strains isolated from marine environments exhibited antagonistic action against a wide range of bacteria including Vibrio spp. A double layer agar method was used for preliminary screening to determine the relative degree of growth inhibition or bacteriolysis exhibited by the isolates. Most of the antagonistic isolates were found to be Gram-negative, motile rods and were oxidase positive, and oxidative in the oxidation and fermentation test, suggesting that they are belong to the genera Pseudomonas . The antagonistic isolates lyzed the dead cells of marine Gram-negative bacteria in both plate and liquid methods. Bacteriolytic and casein hydrolytic activities were observed in the culture supernatant of the isolates. Anion exchange column chromatography (Toyopearl DEAE-650 M) was used to purify the extracellular protease produced by an antagonistic strain A1-J25a. The active fractions of protease collected from the eluted solution also exhibited bacteriolytic activity. 相似文献
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耐盐红螺菌拮抗物质的分离纯化及特性分析 总被引：4，自引：0，他引：4
耐盐红螺菌的无菌代谢产物经CM—Sephadex C-50弱阳离子交换色谱柱分离,获得3个蛋白吸收峰：PSB2-1’峰,PSB2—2’峰,PSB2—3’峰。其中PSB2-1’峰对病原菌具有拮抗作用。PSB2-1’峰组分样品经透析脱盐,后进行SDS—PAGE电泳检测,其冷冻干燥样品进行毛细管电泳与MALDI—TOF质谱鉴定,结果表明PSB2-1’峰的抑菌蛋白物质已达到较高纯度,其准确分子量为9290Da。耐盐红螺菌拮抗物质具有较好的热稳定性,对紫外线不敏感,但对酸碱性较敏感;用蛋白酶处理,其抑菌活性受枯草杆菌蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响。耐盐红螺菌产生的拮抗物质可初步归属于小分子热稳定肽(SHSP)。 相似文献