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《中国家禽》2017,(20)
保存好各个世代家禽血样和基因组DNA对于研究家禽各世代变化规律以及更好地监测家禽保种效果具有重要意义。试验分别抽取-20℃保存0.5年、1年、3年、5年、7年、8年和10年的狼山鸡全血基因组DNA样品,以及-70℃保存8年的狼山鸡DNA样品,采用核酸电泳和PCR检测,比较不同年份和不同温度保存DNA的效果。结果表明:DNA样品随着-20℃保存时间的延长,DNA越容易降解。-20℃保存10年的狼山鸡DNA降解率很高,条带模糊;-20℃保存8年和7年的DNA,降解也较严重;-20℃保存5年的狼山鸡DNA总体完好,条带相对清晰;-20℃保存3年、1年和0.5年的狼山鸡DNA条带清晰鲜明。-70℃保存8年的DNA条带清晰,无降解现象。降解的DNA浓度普遍显著低于不降解的DNA。DNA纯度均在1.8~1.9之间。降解和不降解的DNA用鸡内参引物PCR检测,均出现条带,说明DNA的部分降解不影响一般的PCR检测试验。本研究结果表明:-20℃保存5年以内DNA保存效果尚可,如果长期(5年以上)保存DNA,需-70℃超低温保存。 相似文献
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波德代羊是新西兰于20世纪30年代用边区莱斯特羊和考力代羊杂交育成的绵羊品种。自20世纪70年代以来进一步横交固定,巩固了其品种特征。甘肃省永昌肉用种羊场首次于2000年1月份从新西兰引入波德代羊。研究分析了波德代羊在4个微卫星位点上的遗传多样性,以期为波德代羊的合理利用积累基础资料。1材料和方法1.1试验材料试验采集甘肃省引入的波德代种羊血样30头份,肝素抗凝,-20℃保存,备用。1.2试验方法1.2.1 DNA的提取用高盐法提取基因组DNA,长期保存在70%乙醇中(-20℃冷冻保存)。使用前取部分溶于TE中,4℃保存,待用。1.2.2微卫星位点的选… 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2016,(16)
为优化出可获得完整瘤胃细菌总DNA的方法,以满足分子生物学研究需要,试验采用3种DNA提取方法对瘤胃细菌DNA进行提取并对提取效果进行了比较。结果表明:细菌基因组试剂盒法提取的DNA其OD_(260)/OD_(280)值在1.8以上,电泳无杂带,DNA的提取效果最佳,PCR扩增效果较好;珠磨-CTAB法提取的DNA其OD_(260)/OD_(280)值在1.8以上,电泳结果存在少量杂带;水煮法提取的DNA其OD_(260)/OD_(280)值在2.0以上,无电泳条带,DNA严重降解。推荐采用细菌基因组DNA试剂盒法和珠磨-CTAB法对瘤胃细菌进行DNA提取。 相似文献
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本试验以不同浓度甘油对家兔精液冷冻保存的影响为研究目的,以柠-葡-卵基础液于三种浓度(6%、8%、10%)的甘油相配伍做为冷冻保存液对精液进行稀释,平衡,冷冻,解冻等处理,从而确定兔精液冷冻保存的最佳甘油浓度,得出如下结论:冷冻保护液中添加浓度为6%的甘油时,对精液进行冷冻保存、稀释、平衡,解冻后的精子活率与浓度为8%,10%的甘油冷冻效果比较差异显著. 相似文献
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《畜牧兽医学报》2015,(10)
旨在研究高效鸡囊胚细胞(Blastodermal cells,BCs)冷冻保存技术,为利用BCs保存禽类雌性遗传资源以及胚胎干细胞研究奠定基础。采用解冻后二乙酰荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)染色以及培养24h后细胞贴壁率双重检测BCs活力方法,比较二甲基亚砜(DMSO)不同浓度、不同冷冻与解冻速率等对BCs的冷冻保存效果。结果表明:(1)DMSO不同浓度,20%组解冻后活力最高(0.58),与15%组差异不显著(P0.05),但与5%、10%和25%组差异极显著(P0.01);细胞复苏后贴壁率,20%组最高(30.5%),与15%组差异不显著(P0.05),与25%组差异显著(P0.05),与5%和10%组差异极显著(P0.01)。(2)冷冻速率,使用三步法冷冻,以-1℃·min-1的速率降温至-7℃,保持10min,继续降温分别至-15、-35、-55、-75℃后,投入液氮中保存,-75℃组解冻后活力最高(0.53),但与-35℃、-55℃组差异不显著(P0.05);贴壁率,各组间差异极显著(P0.01),其中-35℃组最高(36.6%)。(3)37℃水浴解冻,10s、1min、2min、3min解冻后,各组间活力差异不显著(P0.05),其中10s组最高(0.60),解冻后贴壁率,37℃水浴1min组结果最好(43.9%),与水浴2min组差异不显著(P0.05),但与水浴10s组差异显著(P0.05),与水浴3min组差异极显著(P0.01)。50℃水浴5s、20s、40s、1min解冻,5s组活力最高(0.70),与20s组差异显著(P0.05),与40s、1min组差异极显著(P0.01),解冻后贴壁率,各组间差异均极显著(P0.01),其中50℃水浴5s组最高(36.9%),50℃水浴1min组最低(5.6%)。综上表明,鸡BCs使用DMSO浓度为20%的冷冻保护剂进行细管冷冻,以-1℃·min-1的速率降温至-7℃保持10min,继续以此速率降温至-35℃后,投入液氮保存,37℃水浴1~2min解冻,BCs通过FDA染色与体外培养贴壁率双重检测均可获得较好效果。 相似文献
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《饲料工业》2021,(19)
为了给桑叶黄酮作为天然抗氧化剂开发提供参考依据,试验以桑叶为研究对象,通过单因素试验分析了超声波辅助、提取时间、提取温度、料液比以及乙醇浓度对桑叶黄酮提取率的影响,利用响应面法优化了桑叶黄酮提取工艺,并结合1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除试验评估了提取物的抗氧化性能。结果表明:超声波辅助能够显著提高桑叶黄酮提取率(P0.05);响应面模型得到的提取条件为乙醇浓度54.75%、提取时间17.61 min、料液比1:30.24(g/m L)、温度50.27℃,此时桑叶黄酮提取率最高为3.64%;实际测得提取时间17 min、提取温度50℃、料液比1:30(g/m L)、乙醇浓度55%的条件下桑叶黄酮提取率为3.62%,与理论值相对偏差为0.55%,且该条件下提取物DPPH自由基清除活性为99.12%。 相似文献
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精液冷冻保存是将精液进行特殊处理,保存在超低温下,以达到长期保存精液的目的。通常采用液氮(—196℃)和于冰(-79℃)保存,其最大优点是可长期保存,使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制,可充分提高公牛的利用率。引进异地种牛多以冻精颗粒的形式供应,现就冷冻精液的保存和解冻应用介绍如下: 1、稀释液的配方:12％蔗糖液7S毫升,甘油5毫升,卵黄20毫升。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2020,(15)
为了进一步研究4℃、20℃、4℃下95%乙醇和4℃下90%甲醇4个保存条件下半散放驯鹿粪便中睾酮、孕酮和雌二醇的保存时效,试验采用酶联免疫吸附法检测了4℃、20℃、4℃下95%乙醇和4℃下90%甲醇4个保存条件下半散放驯鹿粪便中睾酮、孕酮和雌二醇在不同保存时间的含量。结果表明:雄性驯鹿粪便睾酮、雌性驯鹿粪便孕酮和雌性驯鹿粪便雌二醇在4℃条件下可稳定保存30,18,24 h,20℃条件下可稳定保存18,12,12 h,4℃95%乙醇条件下可稳定保存20,15,45 d,4℃90%甲醇条件下可稳定保存30,20,45 d。说明基于我国驯鹿生存环境的气候特点,冬季可以将粪样直接放到室外冷冻保存,其他季节将粪样置于90%甲醇中于地面50 cm以下可保存20 d。 相似文献
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胚胎冷冻保存一般指0~-80℃的温度下保存胚胎,而超低温冷冻保存则是在极低的温度(液氮-196℃、液氦-269℃)下保存动物胚胎。处于超低温下的胚胎,其新陈代谢几乎完全暂时停止,因而可以达到长期保存的目的。朱等(1998)对小鼠扩张囊胚在液氮中冷冻保存1h、1年和2年,解冻后的囊胚恢 相似文献
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《中国家禽》2006,28(19):102-102
目的：研究鸡胚胎原始生殖细胞（EPGCs）对不同冷冻体系的适合性。方法：对发育至第19期和第28期胚胎性腺PGCs，采用二甲基亚砜（DMSO）、乙二醇、聚乙二醇为冷冻保护液，在不同组合、不同浓度、不同的冷冻程序下进行超低温冷冻保存。结果：①采用同一种冷冻保护液，10%浓度与15％浓度之间，除DMSO＋乙二醇（冷冻保护液Ⅳ）外，其他类型的冷冻液对EPGCs保存后存活率的影响差异不显著（P〉0．05）；20%浓度的各种冷冻保护液对EPGCs保存后的存活率最低，且与10%和15％浓度相比差异显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）；②采用同一种冷冻保护液，浓度为10%时， 相似文献
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以金银花为原料,采用微波法辅助提取金银花中的绿原酸,研究浸提时间、乙醇浓度、料液比、提取温度、pH值对金银花中绿原酸提取率的影响。采用正交试验优化提取工艺,结果表明:浸提时间30min、乙醇浓度75%、料液比1∶30、提取温度65℃、pH值为7时金银花中绿原酸的提取率达5.068mg/g。 相似文献