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间接免疫酶组织化学法检测雏鹅感染鸭疫里默氏杆菌的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
应用鹅源血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)作为抗原免疫兔制备兔抗RA的IgG，建立了检测雏鹅感染鸭疫里默氏杆菌的间接免疫酶组织化学法(Indirect Immunoperoxidase Staining，IIS)，该法与大肠杆菌（O1、O8、O79、O138)、鸭沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌(5：A)感染发病和死亡雏鹅组织不出现阳性反应而与RA感染发病死亡雏鹅组织出现特异性阳性反应。RA人工发病死亡雏鹅可在心脏、肝脏、脾脏、肾脏、回肠、直肠、肺脏、十二指肠、空肠和盲肠检测到RA抗原，RA抗原分布于细胞胞浆、组织间隙和血液，检测RA人工感染病例与RA肝脏分离符合率为100％，检测临床可疑病例的血清1型RA的阳性率(92.96％)比细菌分离率(75．12％)高。该法具有特异、直观和敏感的特点，可用于雏鹅RA人工感染和临床感染的诊断、检测及RA感染雏鹅后抗原定位和RA致病机理的研究。 相似文献
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以蔗糖密度梯度离心提纯的Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV—Ⅰ）免疫兔制备兔抗DHV—Ⅰ抗体，建立了检测石蜡组织切片中DHV—Ⅰ抗原的间接免疫酶染色（indirect immunoperoxidase staining，ⅡS）方法，并对DHV—Ⅰ强毒人工感染死亡或濒死雏鸭的各个组织器官进行了检测。结果表明，ⅡS与DHV—Ⅰ感染死亡或濒死雏鸭的肝等呈现阳性反应，与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝以及健康雏鸭的肝呈现阴性反应。感染DHV—Ⅰ死亡或濒死雏鸭的肝、脾、肾、心、胸腺、腔上囊、胰腺、十二指肠、盲肠、空肠、回肠、直肠的免疫组织化学检测呈阳性或强阳性，DHV—Ⅰ抗原主要分布于感染细胞的细胞质。该ⅡS法具有良好的特异性，可用于DHV—Ⅰ在感染雏鸭组织细胞中的亚细胞定位、DHV—Ⅰ感染雏鸭的实验室诊断、甲醛固定组织的回顾性诊断。 相似文献
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鸭疫里默氏杆菌病的发病特点与防治 总被引：2，自引：0，他引：2
鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer，RA）引起的雏鸭的一种急性或慢性的接触传染性疾病。该病又称为鸭传染性浆膜炎、新鸭病、鸭败血症、鸭疫综合征、鸭疫巴氏杆菌病等。主要侵害1～8周龄的幼鸭，尤以2～3周龄的雏鸭最易感，常引起大批幼鸭发病和死亡。 相似文献
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为确定引起2015年6月底福州仓山区某一养鸭场10日龄左右麻鸭发病死亡的病原,无菌采取病死鸭的肝脏、脾脏、脑等组织,经病毒分离、细菌分离纯化、PCR检测、血清学检测、药物敏感性试验,结果检测并分离到鸭1型甲肝病毒和11型鸭疫里默氏杆菌,该鸭1型甲肝病毒分离株与MPZJ1206株和GD株同源性最高,均为98.7%。结果表明,该病例为鸭甲肝病毒1型和11型鸭疫里默氏杆菌混合感染。 相似文献
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根据我们实验室发现的鸭疫里默氏杆菌（RA）荚膜多糖蛋白基因序列（DQ151838）,设计和合成荧光定量PCR引物和探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法。该法的表达式Y=-3.416X＋39.492,相关系数1.000,PCR循环效率96.2%,DNA拷贝数在10^0～10^8范围内检测曲线有良好的线性关系。该法的最适Mg^2＋、引物和探针浓度分别为4～5mmol/L、0.16～0.2μmol/L和0.16μmol/L,最低能够检测到RA的DNA模板为2.0copies/μL。1/10半数致死量的RA人工皮下注射感染7日龄樱桃谷鸭后2h即可在心、肝、肺、胸腺、食管中检测到RA核酸;感染后8h即可在心、肝、脾、肺、肾、脑、胰、食管、气管、胸腺、法氏囊、十二指肠、直肠、血液和咽喉拭子检测到RA核酸,36～120h是RA在感染雏鸭除了咽喉、食管和气管各个组织器官繁殖数量最高峰期,其后逐渐下降。RA人工感染致死雏鸭的心、肝、脑RA分离和FQ-PCR检测符合率为100%。对临床送检具有典型鸭疫里默氏杆菌病临床症状和病理变化的死亡雏鸭的肝脏、心血和脑组织的FQ-PCR检测的阳性率均为100%,而RA分离的阳性率分别只有74.3%（26/35）、82.9%（29/35）和91.4%（32/35）。FQ-PCR可用于鸭疫里默氏杆菌感染的快速诊断、流行病学调查和鸭产品的检疫等。 相似文献
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《中国动物传染病学报》2015,(3)
本研究对安徽省某鹅场急性死亡的雏鹅进行了细菌分离鉴定,无菌采集病死鹅肝脏、脑和心包液,经过培养特性观察、染色镜检、生化特性检测以及16S rRNA和血清学检测,鉴定病原菌为血清15型鸭疫里默氏杆菌,命名为LAG1株。该分离菌株对四环素类药物敏感,而对卡那霉素等耐药;对雏鸭的致病性强,半数致死量(LD50)测定为7.75×103CFU/只;交叉免疫保护试验结果显示LAG1灭活油乳剂疫苗对自身菌株攻毒的免疫保护率可达80%以上,对血清10型鸭疫里默氏杆菌HXb2攻毒的保护率可达70%,对血清1型鸭疫里默氏杆菌WJ4和血清2型鸭疫里默氏杆菌Yb2攻毒的保护率低于20%。本研究结果可为安徽省养鹅业鸭疫里默氏杆菌病的防治工作提供参考。 相似文献
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The influence of RA233, an inhibitor of platelet function, on the occurrence of metastasis in 18 dogs with osteosarcomas was evaluated. At least 24 hours before surgical removal of the primary tumor, dogs were given RA233 orally (20 mg/kg of body weight divided into 3 equal doses). Original sites of the osteosarcoma included humerus, 6 dogs; radius, 5 dogs; tibia, 3 dogs; femur, 2 dogs; maxilla, 1 dog; and mandible, 1 dog. Survival time for 13 dogs euthanatized for progression of neoplastic disease ranged from 3 months to 10 months, with a mean survival time of 5.5 months. Medication was discontinued in 1 dog because of possible adverse reaction. One dog died of disease unrelated to the tumor, and one dog was euthanatized after the surgery. Two dogs were tumor free 9 and 17 months after surgery. Seemingly, the metastasis potential was not diminished in dogs given 20 mg of RA233/kg/day. 相似文献
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[目的]研究DNA甲基转移酶1(DNMT1)对类风湿性关节炎(RA)模型大鼠关节滑膜成纤维样滑膜细胞(FLS)凋亡的影响。[方法]采用Real-time qPCR检测对照大鼠和RA模型大鼠FLS中DNMT1表达,检测DNMT1 siRNA转染对抗凋亡基因Bcl-2表达的影响;采用MTT检测DNMT1 siRNA转染对FLS增殖的影响。[结果]与对照组相比,RA模型大鼠FLS中DNMT1表达显著升高,DNMT1表达抑制后,Bcl-2表达显著降低;MTT检测发现,DNMT1表达抑制后,FLS增殖活力显著减弱。[结论]DNMT1表达抑制可能引发RA模型大鼠FLS凋亡。 相似文献
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体外胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）向生殖细胞分化可用于治疗不育症,同时也为揭示种系世代的分子机制提供最佳模型。试验旨在探讨视黄酸（retinoic acid,RA）诱导鸡胚胎干细胞（chicken embryonic stem cells,cESCs）向雄性生殖细胞（male germ cells,MGCs）分化的作用效果。利用胰蛋白酶消化法从新鲜种蛋X期鸡胚中分离胚胎干细胞,以鸡胚成纤维（chicken embryo fibroblast,CEF）细胞为滋养层,进行体外培养,利用形态法、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）染色和胚胎阶段特异性表面抗原（embryo specific surface antigen 1,SSEA-1）检测对获得的胚胎干细胞进行鉴定。结果表明,获得典型的呈巢状或岛状的cESCs克隆,细胞AKP染色呈蓝紫色,表明其具有较高的内源性AKP活性;SSEA-1鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。采用10-5 mol/L RA诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化,镜下观察细胞形态变化,分别于诱导第0、2、4、6、8、10天提取细胞总RNA,反转录成cDNA,用于实时荧光定量PCR检测生殖细胞标志基因的表达。结果表明,在此诱导过程中,作为胚胎干细胞标志基因Nanog、Sox2表达量持续显著下降,而生殖细胞特异性基因Dazl、Stra8、c-kit、integrin α6表达量呈持续上升趋势;免疫细胞化学检测可观察到特异基因相关蛋白的阳性克隆。本研究成功分离出cESCs,可体外培养并保持未分化状态及多能性。10-5 mol/L RA能够促进cESCs向雄性生殖细胞方向分化,可以引起生殖细胞相应基因的表达,为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供参考。 相似文献
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The antibody produced by a murine hybridoma obtained from the fusion of SP2/0 plasmacytoma cells with splenocytes of a mouse immunized with feline bone marrow was found to react with 60% of bone marrow cells and 80% of peripheral blood leukocytes (PBL); reactivity in the latter tissue was restricted almost entirely to mononuclear cells. Two-color FACScan analyses of this antibody with mAbs specific for feline lymphocytes revealed positive and negative populations of CD4 and CD8 cells. The reactivity for CD4 and CD8 cells was animal age dependent, binding to a higher percentage of the cells in young (2-9 months) versus older animals (> 4 years). In a mitogen driven assay for IgG production by PBL the addition of this antibody to the cultures enhanced the suppressor activity of CD8 cells, a function attributed to activation of a CD4 suppressor-inducer population; removal of CD8 cells negated any induction of suppression. Mild papain digestion of bone marrow and PBL completely removed the antigen detected by this antibody while not affecting reactivity of a pan-T antibody. Western blot analysis showed binding of the antibody to polypeptides of approximately 200 kDa on feline bone marrow and PBL. The data suggest that this mAb is identifying the feline homologue of the leukocyte common antigen of cells with a functional specificity characteristic of a CD45RA isoform. 相似文献
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