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莱克多巴胺胶体金免疫层析法快速检测试纸条的研制 总被引：1，自引：0，他引：1
为研制一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法的试纸条,快速检测猪尿中莱克多巴胺（ractopamine,RAC药物残留）,采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单克隆抗体并喷于玻璃纤维上制备胶金垫,RAC-BSA偶联抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装并切割成莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条。试验结果表明该快速检测试纸条的检测限为5 ng/mL,可在8~10 min内完成测试,肉眼即可判断,无需其他检测设备。该试纸条灵敏度、特异性、稳定性和重复性均达到临床使用要求,适用于现场快速检测和筛选工作。 相似文献
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试验研制定性测定羊饲料中黄曲霉毒素总量残留的高灵敏度检测卡。在硝酸纤维素膜上预包被黄曲霉毒素总量全抗原作为检测线,预包被羊抗鼠二抗作为质控线。将抗黄曲霉毒素总量单克隆抗体用胶体金标记作为金标垫。将样品垫、金标垫、预包被的硝酸纤维素膜以及吸水垫依次粘贴在PVC板上,切割成4 mm宽的试纸条,将试纸条装入塑料卡壳中扣紧组装成检测卡。样本中残留的黄曲霉毒素总量与硝酸纤维素膜上的检测线共同竞争胶体金标记的黄曲霉毒素总量抗体,检测线的颜色深浅与其残留物黄曲霉毒素总量呈负相关,从而判定样品中黄曲霉毒素总量的含量。结果表明:检测卡的检测限为10~30μg/kg,黄曲霉毒素总量检测卡对黄曲霉毒素B1的交叉反应率为100%,而与同族的其他物质的交叉反应率大于30%,与不同族的其他物质的交叉反应率小于1%。假阳性率小于5%,假阴性率为0%,密封好的检测卡常温下储存,保质期18个月。因此,本研究的定性测定羊饲料中黄曲霉毒素总量残留的高灵敏度检测卡,可快速准确地应用于羊饲料中黄曲霉毒素总量残留的定性检测,为快速准确地测定羊饲料中黄曲霉毒素总量残留提供了依据。 相似文献
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免疫胶体金法检测磺胺甲噁唑残留的研究 总被引：8，自引：1，他引：8
应用胶体金免疫层析技术（GICA）进行磺胺甲嗯唑（SMZ）的残留检测研究。制备抗磺胺甲嗯唑多克隆抗体，并采用柠檬酸三钠法制备20nm胶体金颗粒。胶体金标记多抗后喷涂到玻璃纤维膜上，特异性抗原（SMZ-OVA）以线状包被在硝酸纤维素膜上，制成快速检测试纸条。滴加检测溶液后，若呈现一条红色条带则为阴性，无红色条带则为阳性。该方法对SMZ标准溶液的灵敏度达到50ng／mL，试纸条显色结果清晰，反应灵敏，整个检测反应在5～10min内完成，稳定性及重复性良好。 相似文献
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动物尿液中沙丁胺醇残留检测试纸条的研制 总被引：1，自引：0，他引：1
为了制备可用于检测动物尿液中沙丁胺醇(SAL)残留的试纸条,试验采用胶体金免疫层析方法,首先将小分子SAL进行改造,并在此基础上制备SAL抗原和抗SAL抗体,进而制备得到胶体金标记抗体,然后将其喷涂于胶体金结合垫,并与样品垫、硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水纸及塑料底板组装,得到SAL检测试纸条。结果表明:试纸条对猪尿、牛尿、羊尿中SAL的检测限为3.0μg/L,检测时间为5 min,特异性高,重复性良好,与仪器检测方法结果一致,可用于动物尿液中SAL的现场快速检测和筛选工作。 相似文献
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动物组织中莱克多巴胺残留胶体金免疫层析和LC-MS/MS检测方法的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
采用胶体金试纸卡法和LC-MS/MS法分别对猪肉、猪肝样品进行检测,鉴定胶体金试纸卡法和LC-MS/MS法检测结果的符合率。结果表明：应用胶体金试纸卡法检测样品中莱克多巴胺的最低检测限为5.0μg/kg,LC-MS/MS检测方法的检测限为0.25μg/kg;2种方法的检测结果一致。胶体金试纸卡法特异性较高,样品前处理简单,检测快速,成本低,适用于动物组织中莱克多巴胺残留的定性筛查;LC-MS/MS灵敏度高,适合于阳性样品的确证和精确定量。 相似文献
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口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条诊断方法的建立 总被引：1，自引：1，他引：0
为了兽医基层工作人员能够快速诊断口蹄疫病原,与其他传染病做鉴别诊断,有必要建立一种快速、简便区分它们的胶体金免疫层析方法。本试验采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金。将纯化的Asia 1/China/05流行毒株12S偶联抗原的兔抗体制备免疫胶体金,喷免疫胶体金于玻璃纤维制成金标垫。将纯化A/AF72流行株12S偶联抗原的兔抗体和适量O/China/99流行毒株12S偶联抗原的兔抗体混合固定于硝酸纤维素膜上作为检测带。将羊抗兔抗体固定在硝酸纤维素膜的不同区域作为质控带,并组装成口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条。利用其对阴性参考样品、各型阳性参考样品、已知背景的田间样品进行检测。灵敏度试验结果显示:建立的试纸条方法敏感性高、可检测到病毒最低含量为0.98×104 LD50;特异性试验显示:在检测与口蹄疫临床症状相似病原———猪水泡病病毒(SVDV)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)抗原时无交叉反应;重复性试验显示:不同批次间、同一批次内检测结果完全一致;符合性试验显示:检测国家口蹄疫参考实验室已确定口蹄疫病毒血清型的样品90份,阳性符合率、阴性符合率分别为96.70%、100%。本试验研发的口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条具有很好的灵敏度、特异性、重复性和符合性,适合国内流行的口蹄疫病原的鉴别诊断。 相似文献
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为研制定性测定羊奶中黄曲霉毒素M1残留的高灵敏度检测卡,在硝酸纤维素膜上预包被黄曲霉毒素M1全抗原作为检测线,在硝酸纤维素膜上预包被羊抗鼠二抗作为质控线.将抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体用胶体金标记作为金标垫.将样品垫、金标垫、预包被黄曲霉毒素M1的硝酸纤维素膜以及吸水垫依次粘贴在PVC板上,切割成4 mm宽的试纸条,将试纸条装入塑料卡壳中扣紧组装成检测卡.样本中残留的黄曲霉毒素M1与硝酸纤维素膜上的检测线共同竞争胶体金标记的黄曲霉毒素M1抗体,检测线的颜色深浅与其残留物黄曲霉毒素M1呈负相关,从而判定样品中黄曲霉毒素M1的含量.结果表明,检测卡的检测限为0.5μg/L,黄曲霉毒素M1检测卡对黄曲霉毒素M1的交叉反应率为100％,而与同族的其他物质的交叉反应率小于5％,与不同族的其他物质的交叉反应率小于1％.假阳性率小于5％,假阴性率为0％,密封好的检测卡常温下储存,保质期18个月.本研究为快速准确地测定羊奶中黄曲霉毒素M1残留提供了物质基础. 相似文献
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《中国兽医杂志》2016,(9)
为更灵敏地进行全价鸡饲料中喹乙醇(OLA)含量的快速检测,本研究将新型标记物荧光微球与喹乙醇单克隆抗体偶联,以该复合物为检测试剂制备荧光微球免疫层析试纸条,在肉眼检测的同时,将该装置与荧光微球定量侧向层析读数仪联合使用,可进行全价鸡饲料中喹乙醇含量的定量快速检测。研究结果证明,饲料中喹乙醇的定性和定量检测限分别为100μg/kg和0.51μg/kg,IC_(50)值为1.89 ng/m L,定量检测回收率为78.71%~90.83%。该试纸条特异性强、准确性高,保存期长。定量检测只需18 min左右,肉眼检测需38 min左右,与相同抗原和抗体制备的胶体金试纸条相比,该方法可大大提高灵敏度。 相似文献