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猪瘟Erns基因在大肠杆菌中的高效表达 总被引：3，自引：0，他引：3
提取猪瘟病毒石门系强毒株的基因组RNA,用RT_PCR扩增其Erns基因的cDNA,将其克隆到原核表达载体pPROEXTMHTc中,然后转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导,Erns基因获得高效表达。SDS_PAGE分析显示,表达的重组融合蛋白表现分子量约为31ku。Westernblot分析表明,重组蛋白具有良好的免疫原性。重组蛋白可用于制备诊断抗原,用于标记疫苗接种和野毒感染的鉴别诊断。 相似文献
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猪瘟潜伏期注射猪瘟疫苗暴发猪瘟张景涛，李全喜（扶沟县畜牧兽医站４６１３００）李敏（扶沟县畜牧局）１９９４年１２月２日我县包屯兽医站使用郑州生物药品厂生产的猪瘟疫苗，对宋湾村生猪进行了猪瘟疫苗预防注射。１２月８日宋湾村干部到站反映生猪防疫后发病较多。１... 相似文献
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猪瘟病毒NS4B蛋白是猪瘟病毒编码的一个非结构蛋白,由347个氨基酸残基组成。NS4B在病毒中可能与致细胞病变有关,具体功能尚不清楚。本试验利用PCR扩增NS4B基因,利用双酶切、连接和转化等操作方法,与质粒载体p EGFP-N3构建成真核表达重组质粒,双酶切检测猪瘟病毒NS4B真核表达载体构建成功。测定重组质粒序列,并验证表达成功,为今后的功能研究奠定了基础。 相似文献
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将EGFPEO融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0.将重组质粒转染CHO(dhfr'),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功.通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达.高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础. 相似文献
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猪瘟是一个老病,笔者经常收到基层兽医工作者来信反映:注射猪瘟疫苗的猪为什么还会发猪瘟病?怎样才能正确地防制猪瘟?现根据有关理论结合上述问题进行一些解释。 相似文献
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曹慧 《畜牧兽医科技信息》2023,(2):130-133
<正>猪瘟呈世界性分布,危害程度高,对养猪业造成的经济损失巨大,世界动物卫生组织将猪瘟列为A类传染病,我国将其列为一类传染病。因猪瘟只感染猪,不感染人和其它动物,所以猪瘟的危害主要体现在经济方面。我国虽然实施了猪瘟的全面免疫,有效地控制了猪瘟的大规模流行,但散发依然存在,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。1概况 相似文献
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《中国畜牧兽医文摘》2016,(4)
<正>近几年来,兽医界有尝试用猪瘟疫苗治疗猪瘟的报道。通过加大猪瘟疫苗注射剂量,达到"治疗"猪瘟的目的,而且获得不错的口碑和效果。但是,对此同样存在不一样的声音,各界争论不休。文章查阅资料,走访各大养猪场,得出一些结论,期望为猪瘟疫情的发生,提供很大的帮助。1猪瘟流行特点当前,猪瘟流行和发生的特点,发生了很大的变化。就流行形式而言,由早先的频发性大流行,向周期性、波浪式、散发性等特点转变。 相似文献
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猪瘟超前免疫法操作简单、方便，技术可靠。我们选择观珠、沙琅、霞洞等养猪基础好的乡镇作为试验推广基地，对6926窝共69953头仔猪进行了猪瘟超前免疫，平均每窝断奶仔猪数(21天龄)从原来的9.3头提高到10.1头。该方法有推广的价值。 相似文献
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高枫 《国外畜牧学(猪与禽)》2009,(1):1-3
1猪瘟的定义
猪瘟（Classical Swine Fever,CSF）是猪的一种高度传染性病毒病,其急性型通常可导致很高的发病率和死亡率。 相似文献
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徐兰芳 《江西畜牧兽医杂志》1986,(4)
<正> 猪瘟是猪的高度传染的病毒病,常呈急性经过。其特征是全身性出血。发病率为95—100%,有较高的死亡率;但也可能取慢性经过,慢性经过病例临床症状和病理变化常常很轻或不表现。历史上,猪瘟被认为发源于美国,最早类似猪瘟的报导是在田纳西洲福来克林,大约是1810年。1887年报导发生猪瘟的已有35 相似文献
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朱庆虎 《畜牧兽医科技信息》2004,(1):50-51
猪瘟是猪的一种毁灭性传染病,早年又称猪霍乱,是由猪瘟病毒所引起的一种烈性传染病。目前已遍及全世界,急性型,死亡率可达高达80%～90%。国际兽疫局(OTE)的国际卫生法规,将猪瘟列为16种A类研究的烈性传染病之一,其慢性经过时,多拌有其它细菌继发感染,使病情加剧。1病原猪瘟病毒(HCV)是引起猪瘟的病原。在抗原性的结构上与牛粘膜病病毒和绵羊边界病病毒相关。其理化特征,HCV对干燥、腐败或热等抵抗力较差。在56℃60min或60℃10min即可灭活,PH低于4或高于11迅速灭活。2猪瘟流行和发病特点变化近年来猪瘟的流行和发病特点已发生很大的变化… 相似文献
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根据GenBank登录的非洲猪瘟病毒(ASFV) VP73基因序列,人工合成VP73主要抗原表位区基因片段,克隆至pUC57载体中.设计1对引物,PCR扩增获得429 bp的VP73基因片段;将VP73基因片段使用EcoRI和SalI酶切后亚克隆至表达载体pGEX-KG,经PCR、酶切、测序鉴定挑选阳性克隆,转化至表达菌株BL21 (DM3)中,进行体外诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析蛋白表达及其活性.结果显示,成功构建表达重组载体pGEX-KG-VP73,对该重组载体进行诱导,有效表达了41 ku重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白的17％,Western blot分析证实该蛋白具有良好反应原性. 相似文献
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猪瘟基因疫苗在小鼠肌肉中的动态分布表达 总被引：4，自引：0，他引：4
本研究应用原位杂交法、免疫组化、PCR法对肌肉注射猪瘟基因疫苗pcDST、pcDSW后小鼠胫前肌中质粒存在的方式、部位及时间进行了动态观察，结果表明猪 病毒基因疫苗注射3h后质粒就到达细胞核，至20d在细胞核内仍呈阳性反应；pcDST质粒在肌肉内存在120d，pcDSW质粒在肌肉存在150d;pcDST质粒肌肉注射后第3d，pcDSW质粒肌肉注射后第5d，在胫前肌肌肉中可检测到表达产物，持续表达20d以上。表明构建的猪瘟基因疫苗经肌肉注射是较好的免疫途径。 相似文献
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《上海畜牧兽医通讯》2016,(4)
本文设计特异性引物扩增全长p30基因,得到585bp的目的片段,克隆至杆状病毒Bac-To-Bac表达载体pFastBac/NT-TOPO中,转化大肠杆菌DH10Bac进行同源重组,成功构建了含有p30基因的真核表达载体。转染Sf9细胞,回收得到重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,表达产物20kDa,与预期大小一致,能与AFSV阳性血清产生特异性反应。 相似文献