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猪日本脑炎病毒RT-PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
设计了1对引物,利用RT-PCR技术检测乙型脑炎病毒(JEV)。从GenBank中查出收录的31株猪乙型脑炎病毒E基因的已知序列,用DNA star软件对这31株猪乙型脑炎病毒E基因进行同源性分析,以确定扩增的靶序列。以这段靶区域为模板,利用Primer 5软件设计了1对引物,用减毒株SA14-14-2建立了检测乙脑病毒的RT-PCR方法,经敏感性,特异性试验测定,证明该方法敏感,特异;该法可检出样品稀释至256倍的鼠脑毒,相当于0.06个TCID50,对4株河北地区JEV分离株进行检测,结果所设计引物对4株病毒均能扩增出预期的片段。 相似文献
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近年来,华北地区的各养羊场流行着一种云翳病。作者对发病的羊只进行了病原的分离,经生化试验及生物学特性。试验证实,该分离菌为李氏杆菌,经动物试验,验证了李氏杆菌即是引起羊云翳的病原菌,试验过程中对分离菌进行了11种药物的敏感性试验,其中对氨苄青霉素、庆大霉素、卡那霉素、林可霉素高度敏感。 相似文献
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为构建3种中毒性弧菌多联融合毒素基因及重组表达载体,制备多联融合毒素的血清抗体,本试验采用柔性Linker序列(Gly4Ser)对目的基因进行串联(tdh-vvhA-ctB),构建重组表达质粒pET-22b(+)-TVC并在原核表达载体内进行表达,将表达蛋白纯化后免疫动物制备多联融合毒素血清抗体,利用琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验验证抗体的特异性与敏感性。结果表明,试验成功构建了多联融合毒素重组表达质粒pET-22b(+)-TVC,并在原核表达载体内成功表达,表达量为11.38%,表达蛋白主要为包涵体,少量为可溶性蛋白,基因序列全长2 196 bp,编码731个氨基酸,蛋白分子质量为81.7 ku,测序结果与设计序列同源性为99.6%。ELISA和琼脂扩散试验表明,融合毒素TVC与3种目标中毒性弧菌均发生反应,与多种非目标菌均不反应。本试验成功构建了多联融合毒素基因的表达质粒并制备了抗血清,为利用重组毒素的方法检测目标毒素,进而建立更广谱的食物中毒菌快速检测方法奠定基础。 相似文献
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从各种各样的病毒免疫逃逸机制中归纳概括出病毒逃避宿主抗感染反应的三个大方面,包括病毒逃避体液免疫系统的识别、病毒抑制细胞免疫应答以及病毒干扰免疫效应功能,以期为研制新的病毒疫苗和抗病毒药物提供参考。在宿主和病毒的长期共同进化过程中,宿主发展了各种免疫机制以清除病毒,而病毒则进化出各种免疫逃逸机制来躲避宿主的免疫应答。 相似文献
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