CRISPR/Cas9技术敲除酿酒酵母gpd2基因对产2,3-丁二醇的影响     

刘磊  李娜  姜雪雍  孙健  吕雨泽  葛菁萍 《中国农学通报》2020,36(29):69-77

旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除酿酒酵母甘油-3-磷酸脱氢酶基因(gpd2),探究其对2,3-丁二醇产量的影响。根据酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)W5甘油-3-磷酸脱氢酶基因(gpd2)设计供体片段及gRNA片段,将gRNA片段与可表达Cas9蛋白的敲除载体相连,之后将重组质粒及供体DNA片段转化到S. cerevisiae W5细胞中,根据表型筛选及PCR验证获得gpd2基因缺失菌株。结果表明目的基因gpd2敲除成功,基因缺失菌株与原始菌株经发酵实验相比,甘油产量下降22.01%,乙醇产量提高24.65%,2,3-丁二醇产量下降10.60%。gpd2基因的敲除并没有提高2,3-丁二醇的产量,原因可能是逐渐积累的NADH会优先被细胞内大量的乙醇脱氢酶所氧化,作用于乙醇的产生,而不是优先作用于2,3-丁二醇的合成。本实验构建了适用于酿酒酵母的基因敲除系统,该系统对进一步探究酿酒酵母其他代谢产物与2,3-丁二醇合成之间的关系具有实际的借鉴意义。  相似文献   

预酶解-滚筒干燥加工工艺对全麦片品质的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

余可  刘磊  张瑞芬  池建伟  贾栩超  张名位 《中国农业科学》2020,53(6):1256-1268

【目的】探讨预酶解-滚筒干燥处理对全麦片品质特性的影响,为高品质全麦片的加工提供理论依据。【方法】以小麦全粉为原料,采用α-淀粉酶、纤维素酶及其复合酶进行预酶解-滚筒干燥制备全麦片：未经预酶解处理直接滚筒干燥全麦片（drum-dried whole wheat groats,DWG）,α-淀粉酶-滚筒干燥速食全麦片（drum-dried whole wheat groats with α-Amylase,DWGA）,纤维素酶-滚筒干燥速食全麦片（drum-dried whole wheat groats with cellulase,DWGC）,α-淀粉酶-纤维素酶-滚筒干燥速食全麦片（drum-dried whole wheat groats with α-Amylase and cellulase,DWGAC）,以及以小麦精粉为原材料制备直接滚筒干燥精麦片（drum-dried refined wheat groats,DRG）,分别测定其复水性速率、结块率、水溶性指数、吸水性指数、糊化度、黏度、色度,淀粉、还原糖、植酸含量、淀粉和蛋白质消化特性等指标,比较并分析预酶解-滚筒干燥对全麦片品质特性的影响。【结果】预酶解-滚筒干燥处理能显著改善全麦片的冲调性,其中DWG样品复水速率最低,DWGAC复水速率最高,与对照样品DWG相比,DWGA、DWGC、DWGAC的结块率显著降低。预酶解-滚筒干燥处理显著提高了全麦片的溶解性,其中DWGA、DWGC、DWGAC相比于DWG水溶性指数分别提高了4.98、2.07和5.04倍。同时,预酶解-滚筒干燥处理使全麦片的淀粉、植酸含量显著降低（P＜0.05）,还原糖含量和糊化度显著升高（P＜0.05）,适当降低了全麦片的色度。此外,预酶解-滚筒干燥处理使全麦片中快消化淀粉比例显著提高,快消化淀粉含量分别比对照增长了22.34%、34.84%和46.59%,其中DWGAC快消化淀粉含量最高;蛋白质体外消化速率加快,蛋白质体外消化率分别提高了0.33、0.25、0.26倍,消化率升高。【结论】预酶解-滚筒干燥处理提高了全麦片的冲调分散性,降低了结块率和黏度,提高了淀粉和蛋白质体外消化性能,对全麦片品质有提升作用。  相似文献   

枸杞多糖对糖尿病小鼠胰岛细胞形态与功能的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘磊  李青旺  赵蕊  黄晶 《黑龙江畜牧兽医》2008,(3)

糖尿病(diabeties mellitus,DM)是严重影响人类健康的非传染性疾病,近年来发病率呈上升趋势.糖尿病病因复杂,其发病机理尚不完全清楚.  相似文献   

SIRT3调节脂代谢和抗氧化防御研究进展     

邢东梅  刘磊  李心慰  雷红宇  苏建明 《动物医学进展》2019,(5):94-97

沉默信息调控因子2样蛋白3(SIRT3或Sirtuin3)是位于线粒体的主要去乙酰化酶,是机体脂代谢及抗氧化防御的重要调节者。SIRT3对脂肪酸β-氧化关键酶长链酰基CoA脱氢酶(LCAD)等进行脱乙酰化修饰调节脂代谢,还可活化AMPK通路调节脂代谢。SIRT3还可对抗氧化因子超氧化物歧化酶(Mn-SOD/SOD2)和异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)的赖氨酸活化位点脱乙酰化增强抗氧化防御。论文总结SIRT3在脂代谢和抗氧化防御的调节作用,以期为揭示能量代谢障碍性疾病的发病机制提供启示,进而为探寻防治新靶标奠定理论基础。  相似文献   

安徽地区禽源临床样品药敏试验结果分析     

沈学怀  张丹俊  刘磊  潘晓成  赵瑞宏  胡晓苗  戴银  朱林 《中国兽医杂志》2019,(2):96-99

对2015-2017年安徽地区送检至安徽省兽医临床诊断中心的365份禽源临床样品的药敏试验结果进行分析,结果显示,10种常用抗生素检测中以2、3种可推荐的抗生素为主,在可推荐抗生素中头孢噻肟比例最高,达到70.14%,其次是阿米卡星和多西环素,分别为60.27%和49.04%,而阿莫西林、氟苯尼考和庆大霉素的比例均低于5%;在首选抗生素中头孢噻肟、阿米卡星和多西环素的比例分别为38.36%、30.96%和16.36%。氟苯尼考、庆大霉素、左氧氟沙星和头孢噻肟作为可推荐药物的比例逐年升高,阿莫西林、阿米卡星的比例则逐年降低,表现出一定的规律性。本分析结果对指导安徽地区禽病临床治疗用药具有重要的参考意义。  相似文献   

四个紫花苜蓿品种对秋冬低温条件的生理适应性   总被引：2，自引：0，他引：2  

张小英  卫智军  陈立波  刘磊  褚文彬 《中国草地学报》2008,30(3):48-51

通过测定4个紫花苜蓿品种根部游离脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白质、过氧化物酶(POD)的含量,研究了不同紫花苜蓿品种对低温的生理适应能力.结果表明:在不同时期,阿尔冈金苜蓿的可溶性糖、游离脯氨酸、可溶性蛋白质、过氧化物酶(POD)活性都明显高于其它品种,抗寒能力较高;品种牧歌401和驯鹿居中,三得利根部中的积累比其它品种低,三得利抗寒能力较弱.  相似文献   

减少动物防疫失败的综合措施     

刘磊 《兽医导刊》2016,(20)

减少动物防疫失败有多种措施,其中预防接种是预防疾病的重要因素,但是免疫接种能否获得成功受多种因素影响.同时,正确的饲养管理和饲料安全素也非常重要,因此,只有认真做细、做好每一环节工作,才能减少动物防疫失败发生.  相似文献   

黄芩苷增强中国对虾组织免疫和解毒代谢能力   总被引：1，自引：1，他引：0       下载免费PDF全文

付媛媛  李健  陈萍  刘磊 《渔业科学进展》2011,32(4):102-111

用含不同浓度梯度(0、50、100、150 mg/kg)黄芩苷的饲料连续投喂健康的中国对虾Fen-neropenaeus chinensis,于给药第1、3、5、7、9、11天采集实验对虾的血淋巴、肝胰腺、肌肉组织,测定不同组织的酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮合酶(INOS)、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,研究黄芩苷对中国对虾非特异性免疫酶活指标和解毒代谢能力的影响。实验结果表明,中、高浓度处理组血淋巴、肝胰腺、肌肉组织的ACP、INOS、SOD在第3天后呈上升趋势,分别达到峰值后趋于稳定状态,与同期对照组相比差异显著(P<0.05);低浓度黄芩苷处理组各种酶活性与同期对照组相比差异不显著(P>0.05),而低、中、高浓度处理组血淋巴LSZ酶活性与同期对照组相比差异极显著(P<0.01)。各种酶活亦存在组织差异性,其中ACP、CAT在肝胰腺中活性最高,肌肉和血淋巴次之;而INOS、LSZ、SOD活性,血淋巴中最高,肌肉和肝胰腺次之。同时攻毒试验表明,黄芩苷能有效地降低试验组中国对虾的死亡率,提高免疫保护率。其中,中浓度处理组的保护效果最佳。  相似文献   

三疣梭子蟹微卫星多重PCR技术建立及条件的优化   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

任宪云  刘萍  李健  李晓萍  韩智科  刘磊 《渔业科学进展》2011,32(3):76-83

选择三疣梭子蟹22个多态性高的微卫星标记,经过引物间的搭配、组合测试以及反应条件的优化(退火温度、Mg2+含量、dNTPs的浓度等参数),构建了多重PCR扩增技术体系.本研究最终建立了47个二重PCR组合,并在47个二重引物的组合基础上建立15个三重PCR组合,3个四重PCR组合.该多重PCR技术体系的建立为三疣梭子蟹品种选育、种系评估提供快速、有效分子检测技术.  相似文献   

银鲳不同组织中4种同工酶的表达差异     

刘磊  张晨捷  彭士明  高权新  施兆鸿 《海洋渔业》2017,39(1)

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了银鲳(Pampus argenteus)脾脏、肝脏、肌肉、心脏、肾脏等5种组织中酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、乙醇脱氢酶(ADH)等4种同工酶的表达模式,并对各种同工酶的酶谱进行了分析。结果表明:这4种同工酶在银鲳5种组织中的分布均存在一定的组织特异性,其与各组织的生理机能密切相关。银鲳4种同工酶共记录出61条酶带,其中EST被检测出的酶带数量最多也较复杂,ADH同工酶酶带数量最少,只有6条酶带被检测到,LDH和GDH分别检测到16条和9条酶带;组织特异性主要表现在位点表达和酶活性强弱不同这两个方面,GDH1和ADH2只在肝脏中表达。  相似文献