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为了探讨氟对体外培养的绵羊成骨细胞中核因子кB受体活化因子配体(RANKL)mRNA基因表达的影响,进行了绵羊成骨细胞体外培养,分别加入含浓度为0、10-6、10-5、10-4、5×10-4mol/L氟化钠(NaF)的培养液,并于第6天提取细胞总mRNA,用半定量RT-PCR方法分析RANKL mRNA表达水平的改变.结果表明,10-6、10-5、10-4、5×10-4 mol/L NaF均能刺激体外培养成骨细胞RANKL mRNA表达,当氟化钠浓度为10-5及5×10-4 mol/L时,可以明显促进RANKL mRNA表达(与对照组相比P<0.01).这说明氟呈剂量依赖性地刺激成骨细胞RANKLmRNA的表达. 相似文献
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为了探究臭参水提物通过miRNA对小鼠结肠癌的调控效果,试验首先采用高通量测序技术测定结肠癌模型小鼠的结肠组织中miRNA表达水平,通过GO注释分析和KEGG富集分析对差异表达miRNA进行功能预测,以筛选出的表达差异较显著且尚无相关报道的miR-3081-3p为研究对象并预测其靶基因;然后在NIH-3T3细胞中转染miR-3081-3p模拟物(mimics)并添加臭参水提物进行孵育,通过Western-blot检测其靶基因的表达水平,并利用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明:在结肠癌模型小鼠的结肠组织中共发现117个显著差异表达的miRNA,其靶基因主要富集在肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)、Ras、泛素化及NF-κB等信号通路中;其中miR-3081-3p在结肠癌模型小鼠中表达量显著下降54%,其靶基因Ubn2表达量显著上升(P<0.05);在NIH-3T3细胞中,臭参水提物孵育和转染miR-3081-3p模拟物(mimics)均可以提高miR-3081-3p的表达量并降低靶基因Ubn2的表达量,还可降低NIH-3T3细胞凋亡水平。说明臭参... 相似文献
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旨在分析VPS28基因调控乳蛋白合成的分子机制,为奶牛泌乳性状的分子育种奠定理论基础。本研究首先利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲降奶牛原代乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)中VPS28基因的表达水平,检测与乳蛋白合成、泛素化-溶酶体和泛素化-蛋白酶体通路相关的11个基因、泛素蛋白的表达水平及蛋白酶体活性;然后抑制BMECs中蛋白酶体和溶酶体的活性,检测酪蛋白相关基因、核糖体蛋白的表达水平;最后利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)比较蛋白质组学分析敲降前后BMECs的差异表达蛋白。结果表明,敲降VPS28基因后,CSN1S1、CSN2、CSN3、RPS8、UBC、PSMC3、PSMC5基因均显著上调,PSMD12显著下调;抑制蛋白酶体后,CSN1S1、CSN2、CSN3显著上调,RPL13显著下调;抑制溶酶体活性后酪蛋白相关基因表达不显著;iTRAQ结果共筛选出129个差异表达蛋白,下调蛋白主要富集在核糖体、溶酶体、剪切体等相关通路,上调蛋白主要富集在内质网的蛋白质加工、加压素调控的水重吸收过程、RNA转运等通路中。研究表明,VPS28基因可通过泛素化信号通路影响BMECs中乳蛋白的合成。 相似文献