羊口疮病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用     

姚俊  李富祥  彭海生  鲁富有  张乔明  李华春 《动物医学进展》2012,(11):31-36

根据GenBank中的羊口疮病毒基因组(AY386264)ORFVgORF121及ORFVgORF122基因的DNA序列,应用Beacon Designer 7.7软件设计一对引物和一条TaqMan探针,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了羊口疮病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。该方法组内及组间重复试验变异系数均低于2%,上机检测时间不超过40min,检测灵敏度达1×101copies/μL,山羊痘及禽痘病毒特异性检测均为阴性,标准曲线的相关系数(R2)为0.998 088,线性关系良好。应用该方法对云南保山和普洱送检的羊口疮临床组织病料进行绝对定量检测,送检样品抽提DNA中病毒拷贝数分别为1.35×108copies/μL和9.62×107copies/μL。结果表明,研究建立的羊口疮病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法具有特异、灵敏、稳定、快速和安全的特点,适于羊口疮临床组织样品的早期检测及常规病原监测。  相似文献   

猪瘟间接血凝(IHA)诊断试剂制备及应用     

解天珍  高华峰  姚俊  单于乃纯 《云南畜牧兽医》2005,(1):1-2

猪瘟病毒细胞培养物经病毒释放、浓缩及系列纯化 ,致敏醛化处理绵羊红细胞不发生自凝 ,排除非特异抗原影响后 ,制备红细胞抗原。诊断液不与其它传染病阳性血清发生交叉凝集 ,保存 2 4个月效价大于 1∶2 0 4 8。不同批次检测同一血清样品结果一致。保存在 4～ 6℃ 2 4个月以上效价不变。该诊断液与标准诊断液同一检测不同滴度猪血清 ,符合率达 91%。检测四个地州市县 2 5 6 0份猪血清 ,血清保护率为 6 5 8%。  相似文献   

云南山羊痘流行毒株P32基因的克隆与表达     

姚俊  李华春  高华峰  单于乃纯  张念祖 《中国兽医杂志》2008,44(7)

山羊痘是由山羊痘病毒引起的一种严重的、高度接触传染的动物疾病,被国际兽疫局(OIE)列为A类动物传染病.临床上以体温升高、全身性或局部性皮肤痘疹及内脏病变(特别是肺)乃至死亡为特征.山羊痘病毒(GTPV)属痘病毒科脊索动物亚科羊痘病毒属的成员,该属其他成员还有绵羊痘病毒(SPPV)、疙瘩皮肤病病毒(LSDV).P32抗原是一种结构蛋白抗原,包含有一个主要的抗原决定簇,存在于所有的羊痘病毒属的3个成员中.针对山羊痘病毒与副痘病毒属存在免疫交叉反应,缺乏有效的鉴别诊断试剂盒,本研究克隆表达出羊痘病毒属特异的P32蛋白,为进一步研制抗体及抗原检测试剂盒奠定前期工作基础.  相似文献   

山羊痘云南流行毒株的分离鉴定及P32基因PCR-RFLP分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

姚俊  李华春  高华峰  单于乃纯  高林  张念祖 《中国兽医杂志》2008,44(4):5-8

应用牛睾丸细胞,从12份采集自云南省不同疫点的山羊痘病羊肺脏中分离获得3株可疑毒株.这3株流行毒株经本动物回归试验、PCR鉴定及P32基因PCR-RFLP分析后确诊为山羊痘病毒,并据分离地被命名为MYS、XW、XD毒株.  相似文献   

山羊痘云南流行毒株及疫苗株P32基因序列分析     

姚俊  李华春  高华峰  单于乃纯  高林  张念祖 《上海畜牧兽医通讯》2007,2(6):18-21

将本实验室分离到的山羊痘病毒云南流行毒株MYS、XW、XD及疫苗株VF4主要结构蛋白基因P32基因克隆到PMD18T载体后进行双向测序,所得序列与Genbank中羊痘病毒属成员:山羊痘病毒(GTPV)、绵羊痘病毒(SPPV)、疙瘩皮肤病病毒(SLDV)参考毒株相应序列作对比分析(ByClustalWMethod),结果显示:(1)MYS、XD毒株P32基因全长969bp,疫苗株VF4为974bp,XW毒株为975bp。(2)XW、疫苗株VF4在100～105bp位置处均插入6个A,在947bp位置缺失一个T;SPPV参考毒株在169～171bp位置插入GAT。(3)由于疫苗株VF4P32基因核苷酸序列第414位置处发生了T/A突变,在该处形成一个新的终止密码子TAA,导致完整的开放读码框架(ORF)被打断,只表达第1～411bp(137个Aa)的基因片段,而不能表达出完整的P32蛋白。其余6株毒株的开放读码框架均很相似。(4)在所构建的系统发生树中,LSDV与SPPV参考毒株、MYS和XD株、VF4和XW株、GTPV参考毒株各被划分为一组。所有7个毒株P32基因核苷酸序列的同源性都很高,均在97%以上。其中疫苗株VF4与SPPV参考毒株的同源性最低,为97.6%。XD与XW毒株的同源性最高,为99.8%。(5)酶切位点分析结果显示,MYS、XW、XD、VF4及GTPV和SLDV参考毒株具有唯一的HinfI酶切位点,大约在第694bp位置。SPPV参考毒株具有2个HinfI酶切位点,分别在第391bp和691bp位置处,该酶切位点较适合用来鉴别山羊痘和绵羊痘病毒,而疙瘩皮肤病在临床上就很容易与山羊痘和绵羊痘鉴别开来。  相似文献   

双屏多信息孵化机（二）     

姚俊 《农村养殖技术》2006,(22):38-38

三、主要控制功能 双屏机采用了当代先进的模糊控制技术构架整套控制系统,它能根据操作人员设定的参数信息,自动寻找最合理的控制方法,完成整个孵化过程.双屏机细致新颖的设计思路,使得用户操作简单方便;相互独立的双路控制系统,保证了孵化过程的安全可靠.  相似文献   

玉带凤蝶访花及求偶过程中的视觉及嗅觉识别行为          下载免费PDF全文

李明涛  刘杰  陈顺安  石雷  姚俊  陈晓鸣 《林业科学研究》2020,33(6)

  相似文献   

竹花多样性及其重要价值     

史军义  周德群  孙茂盛  姚俊  李志伟 《世界竹藤通讯》2021,19(5):40

竹子很少开花,开花后通常就会死亡,这是由竹子自身生物学规律和环境变化等综合因素所致。竹花的形态、结构、开花周期和表现形式均具有多样性特点,研究竹子开花的特点及其发生的原因,对于深入研究竹子的形态学、分类学、生物学、遗传学、生理学、生态学、药学和食品学等均具有重要意义。文章从竹花形态、竹花结构以及开花习性等方面分析了竹花的多样性,并阐述了竹花多样性的重要价值。  相似文献   

复方丹参下鼻甲注射治疗慢性耳炎60例的疗效观察     

姚俊  谭继全 《湛江医学院学报》1997,(4)

本文试用活血化瘀药物复方丹参注射液作下界甲注射治疗慢性鼻炎6O例，获得满意的疗效，现报道如下；显材料与方法1．l病例选择按照慢性鼻炎诊断标准［‘j筛选病例，80例均为本科门诊患者，病程最短8月，最长14a，合并明显界中隔偏曲者除外。年龄最小12岁，最大52岁。分为两组：（l）治疗组（复方丹参组）6O例，平均年龄为254岁．男48例，女12例；（2）对照组（5％鱼肝油酸钠组）20例；平均年龄为25岁，男14例．女6例、两组患者临床症状、病程基本一致。互．2药物复方丹参注射液上海第九制药厂生产，Zml／安领，每lml相当于含生药丹参、降…  相似文献   

双屏多信息孵化机（一）     

姚俊 《农村养殖技术》2006,(21):35-35

一、双屏孵化机简介 双屏多信息孵化机是在模糊控制基础上,根据用户需求开发的一种多功能控制孵化设备.  相似文献