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试验旨在表达、纯化猪NLRP6蛋白,并制备鼠抗NLRP6多克隆抗体。根据猪NLRP6全基因核苷酸序列(GenBank登录号:XM_003124236.4)设计特异性引物,利用PCR方法从pMD-19T-NLRP6重组载体中扩增NLRP6基因片段,将扩增产物与原核表达载体pET-32a(+)连接,获得重组质粒pET-32a-NLRP6,经抗性筛选阳性菌、双酶切鉴定、PCR及测序分析后,将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,并进行IPTG诱导表达及Western blotting鉴定。对获得的重组融合蛋白进行可溶性分析,经变性、镍柱亲和纯化、复性后得到纯化的融合蛋白,将其免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。结果显示,试验成功克隆大小约为576 bp的NLRP6基因序列,经鉴定重组质粒pET-32a-NLRP6构建正确,通过IPTG诱导获得大小约34 ku的NLRP6重组融合蛋白,Western blotting分析表明其与小鼠抗6×His单克隆抗体呈阳性反应。可溶性分析结果显示,NLRP6重组融合蛋白以包涵体形式存在,约占95%。纯化的NLRP6重组融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体,经Western blotting分析显示出特异性反应。本试验成功制备了具有免疫原性的NLRP6蛋白及其鼠源多克隆抗体,为NLRP6蛋白生物学功能及相关疾病致病机制研究提供了基础材料。 相似文献
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研究探讨了是否可以通过提供吮吸奶嘴和拱鼻软垫等乳头和乳房仿制品来减少人工饲养仔猪的口腔行为。在一个2×2组间因子设计试验中,每个人工饲养仔猪圈内采用了4种处理方法中的一种:提供吮吸奶嘴、提供拱鼻软垫、提供吮吸奶嘴+拱鼻软垫,不提供任何仿制品。在仔猪进入人工饲养系统后的第4天和第18天,对126头仔猪(分成21组,每组6头)进行连续集中观察,每次观察90 min,并对其行为进行评分。使用线性混合模型分析数据。在所有试验处理中,仔猪的拱鼻行为(包括拱腹或拱仔猪的其他任何部位)从第4天到第18天都在增加,但提供复合仿制品(吮吸奶嘴+拱鼻软垫)的仔猪组拱鼻行为增加幅度最小。人工饲养的仔猪将时间更多地用于拱吮吸奶嘴+拱鼻软垫组合仿制品,而不是某一单个仿制品,并且不是因为提供了仿制品而导致仔猪的拱鼻行为。所有仔猪至少有1次拱鼻行为(只有1头例外)。仔猪的休息、玩耍争斗、或其他口腔行为(非拱鼻行为),仿制品(吮吸奶嘴和拱鼻软垫),猪圈设备几乎不受不同试验处理的影响。与其他处理相比,复合仿制品(吮吸奶嘴+拱鼻软垫)处理组里的仔猪平均休息时间更长。总之,随着时间的推移,只有复合仿制品(吮吸奶嘴+拱鼻软垫)处理组里的仔猪才能在减少拱鼻行为增加方面显示现出某种效果。然而,拱鼻行为的减少非常有限,因此可以说提供奶嘴和软垫等仿制品并没有有效地防止仔猪的拱鼻行为。因此,供试仿制品(吮吸奶嘴和拱鼻软垫)未能成功地消除人工饲养仔猪的口腔重定向行为。 相似文献
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科技发展日新月异,食品中微生物检测方法正在由传统的培养方法逐渐向分子水平迈进。通过分析利用聚合酶链式反应技术(PCR)检测食源性致病菌的先进技术,对几种不同的PCR技术研究进展进行归纳总结,旨在为食品微生物的快速检测提供参考。 相似文献
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研究目的在于探讨日粮中添加芦荟多糖对断奶仔猪脾及肝中TLR2及TLR4表达量的影响。试验选取160头(杜×长×大)三元杂交断奶仔猪,随机分为5个处理,每处理4个重复,每重复8头猪。试验猪分别饲喂基础日粮;基础日粮+250 mg/kg 4%黄霉素;基础日粮+0.05%、0.1%和0.2%芦荟多糖。饲喂28 d后屠宰,取脾及肝,用半定量RT-PCR测定其TLR2及TLR4表达量。研究结果表明,在日粮中添加芦荟多糖,可显著提高脾中TLR2和TLR4的表达量(P0.05),并可显著提高肝中TLR4(P0.05)的表达量。因此,芦荟多糖可以提高脾和肝TLR2和TLR4表达,有助于调节断奶仔猪的免疫功能和促进健康生长。 相似文献
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世界上的大部分公猪最终都要上市,为了减少公猪膻味带来的风险,在公猪出生不久就会采用物理法进行去势。然而,与阉公猪相比,未去势公猪生长效率更高,而且脂肪沉积少,尤其是在屠宰体重大的时候。同时,在世界 相似文献
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我国加入WTO后，意味着我国企业与国外企业在世界舞台上已经站在同一起跑线上进行平等竞争。面对入世后的新形势、新挑战、新机遇，企业要在激烈的国际竞争中立于不败之地，必须要思考我国企业营销应进行何种新的选择与变革，进行营销观念、营销方法、营销市场、营销组织等方面的创新，以适应世界经济一体化、全球化带来的激烈的市场竞争，谋求企业的兴旺与发展。 相似文献
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