鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒和H9亚型禽流感病毒三重荧光定量PCR检测方法的建立     

孙敏华  李林林  董嘉文  刘志成  孙俊颖  沈海燕  张建峰  张春红 《广东畜牧兽医科技》2017,42(4)

参考Gen Bank上已发表的产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列、H9亚型禽流感病毒的HA基因和鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因序列,分别设计了检测EDSV、H9 AIV和DTMUV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为110bp、281bp和266bp。通过PCR验证及引物浓度的优化,建立了针对这3种病毒的三重荧光PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法可以同时检测EDSV、H9 AIV和DTMUV,且不与鸭瘟病毒、鹅细小病毒、番鸭细小病毒和大肠杆菌基因组DNA以及鸭甲肝病毒1型、鸭甲肝病毒3型、番鸭呼肠孤病毒和新城疫病毒的RNA发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对EDSV、H9 AIV和DTMUV核酸的检测下限分别为8.0、4.8和1.3个拷贝,该方法比常规PCR方法敏感10倍;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好。通过标准曲线的建立以及临床样品的检测表明,该方法可以用于EDSV、H9 AIV和DTMUV的定性和定量检测。  相似文献   

鹅细小病毒NS1蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立     

孙敏华  董嘉文  李林林  袁建丰  邝瑞欢  胡奇林  张建峰 《中国动物传染病学报》2014,(6):1-5

本研究克隆了鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)佛山株(Foshan-2009)的NS1基因,并将其克隆至原核表达载体p ET32a(+),构建重组质粒p ET32a-NS1。经转化,IPTG诱导表达及SDS-PAGE和Western blot分析表明,NS1蛋白得到了表达,并且能与抗GPV的番鸭血清发生特异性反应。通过棋盘法确定NS1蛋白包被量为0.5μg/孔,待检血清1:50稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1:10 000倍稀释时ELISA反应条件最佳,并确定阴阳性临界值为0.399。该ELISA方法特异性强,与番鸭细小病毒、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、新城疫病毒和鸭疫里默氏杆菌的阳性血清均无交叉反应;重复性好,批内和批间重复试验的变异系数分别小于5%和10%;检出率高,GPV阳性番鸭血清的检出率为92%。本研究所建立的间接ELISA方法为鹅细小病毒的血清学诊断和流行病学监测奠定了基础。  相似文献   

塑料大棚辣椒良种引进品比试验初报     

唐小丽  张建峰 《农业科技与信息》2023,(1):25-27

在正宁县永和镇罗川村设施蔬菜示范点塑料大棚内对引进的7个辣椒品种进行品比试验，结果表明：过江龙、大肠311、旋龙F₁、禾椒219F₁、螺丝椒王F₁、香辣美螺丝6个辣椒品种适应性广、椒果商品性好、产量高，比尖椒22(CK)分别增产159.92%、85.24%、77.69%、66.49%、57.95%、42.79%，适宜在正宁县大面积示范推广。  相似文献   

乡村振兴背景下茶文化旅游发展策略研究     

张建峰  闫岩  王亮 《福建茶叶》2023,(1):57-59

随着社会经济发展速度的加快，国家全面推进现代化农业建设进程，传统农业发展亟待变革，如何推动乡村经济发展成为重要社会研究课题。由此，国家提出了乡村振兴发展战略，推动乡村经济发展。部分农村地区茶文化发展水平高，乡村经济发展中茶文化产业成为重要发展举措。基于此本文对乡村振兴背景下茶文化旅游发展策略相关知识进行了简单地分析，希望对相关领域研究有帮助。  相似文献   

蘑菇-玉米秸秆缓冲材料的制备及其性能     

张洁婧  赵婕  庞英楠  何佩佩  张建峰 《吉林农业大学学报》2023,(2):237-242

为减缓玉米秸秆废弃物和泡沫材料对环境的污染，以平菇(Pleurotus ostreatus)菌丝为“黏合剂”胶黏玉米秸秆，制备了蘑菇-玉米秸秆缓冲材料，探究其成型机理及培养时间对性能的影响。结果表明：菌丝在具有一定孔隙结构的玉米秸秆粉表面黏附生长，将松散的玉米秸秆粉“黏合”起来，生成蘑菇-玉米秸秆缓冲材料。随着培养时间的增加，复合材料的压缩强度和单位体积变形能逐渐增大，但增幅逐渐降低；回弹率先增大后减小，能量吸收效率迅速增加后趋于稳定。综合考虑材料性能和时间成本，认为蘑菇-玉米秸秆缓冲材料的最佳培养时间为20 d，此时，10%的应变压缩强度可达106.68 kPa，是EPS缓冲材料的1.9倍；最大单位体积变形能为7.40×10⁴ J/m³，是EPS缓冲材料的1.5倍。  相似文献