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犬瘟热病毒水貂分离株F1基因的克隆表达 总被引：1，自引：1，他引：0
本研究旨在利用基因工程的方法,制备犬瘟热(canine distemper,CD)疾病诊断用抗原。提取犬瘟热病毒基因组,RT-PCR扩增犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)F1基因序列,克隆并测序。将F1基因定向克隆到原核表达载体pET28a多克隆位点,阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达产物,并用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。结果显示表达的F1重组蛋白能与犬瘟热标准阳性血清发生反应,具有良好的反应原性,可以作为犬瘟热疾病的诊断用抗原。 相似文献
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果园传统的清耕管理方式劳动强度大,土壤保水、保肥能力低,肥料投入高,而且造成冬春季节土壤裸露,易发生风沙扬尘。果园自然生草覆盖技术能够增加土壤有机质含量,改善土壤理化性质;减少土壤水分蒸发,提高果园蓄水保墒及抗旱能力;有利于天敌繁育,减少农药用量;提高大桃品质;省工、省力,降低成本,提高效益;具有良好的景观效应,减少环境污染,抑制大气扬尘。通过对北京平谷区桃园自然生草覆盖技术的调查,结果表明:果园自然生草覆盖后能够增加土壤有机质含量,增加幅度为10.40%～38.10%;能够提高大桃产量与品质,单果质量提高2.80%～5.40%,可溶性固形物增加6.80%～18.80%。 相似文献
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以肇东紫花苜蓿和Pleven6紫花苜蓿的子叶、下胚轴为外植体,建立离体再生体系。结果如下：最佳愈伤诱导培养基：肇东苜蓿为MS+2.0mg/L2,4-D+0.5mg/ＬKT+3%蔗糖,Pleven6为MS+1.5mg/L2,4-D+0.5mg/LKT+3%蔗糖;分化培养基：MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L NAA+3%蔗糖;分化继代培养基：MS+0.3mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.3mg/LKT+3%蔗糖;生根培养基：1/2MS+0.5mg/LNAA+1.5%蔗糖。两个品种的子叶均较下胚轴分化时间短、分化效率高,肇东苜蓿诱导率和分化率明显高于pleven6苜蓿。 相似文献
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以番茄新品种T431、1911、0701为材料,以9天苗龄的叶片为受体,通过农杆菌Ri质粒介导,将几丁质酶基因和?-1,3葡聚糖酶基因转化番茄。共获得再生植株100株,经PCR技术检测,导入几丁质酶基因和?-1,3葡聚糖酶基因的植株分别为27株和13株,转化率为27% 和13%;两个目的基因同时导入的植株10株,转化率为10%。PCR-Southern检测呈阳性,表明外源基因已经整合到番茄基因组中。对9株双转化的植株进行RT-PCR检测,几丁质酶基因和?-1,3葡聚糖酶基因的阳性植株分别为5株和4株,证明转化的基因已表达。 相似文献
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高盐对作物造成渗透胁迫和离子毒害,是影响作物生长发育的主要非生物胁迫因子之一。Na+/H+逆向转运蛋白能够通过将Na+排出细胞或将其区隔化入液泡中来调节细胞内的离子平衡,是植物耐盐的关键因子。本研究将质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因nhaA构建到植物表达载体pBI121上,通过发根农杆菌介导转化大豆子叶节,获得6株卡那霉素抗性再生植株。对抗性植株进行PCR、Southern blot和RT-PCR鉴定,3株植株呈阳性,平均转化率为0.42%。对阳性植株的耐盐生理指标测定结果显示,盐胁迫后转基因植株的质膜相对电导率显著低于对照植株,叶绿素含量和脯氨酸含量显著高于对照植株。nhaA基因在大豆植株中的表达显著提高了大豆对盐胁迫的耐受性,为大豆耐盐新品种的选育和广泛应用该基因进行其它农作物的耐盐性改良提供了材料和依据。 相似文献
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为寄蝇科昆虫应用于农林害虫生物防治提供参考,通过对标本进行鉴定分类,并结合文献资料,对贵州寄蝇科昆虫物种多样性及动物地理区系进行研究。结果表明:贵州省寄蝇科昆虫54属182种,分别占全国属种总数的27.9%和21.6%,贵州特有种10个,仅占全省总数的5.5%;在世界动物地理区划中共有8种区系类型,无世界性分布种。其中,以跨东洋界和古北界的种类为主,占70.3%;东洋种次之,占23.0%,其他区系型种类较少。在中国动物地理区系中有24种区系类型,以全国性分布型种类为主,占20.8%,跨华中区-华南区-西南区型种类次之,占11.5%,其他区系型种类较少。 相似文献
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根据GenBank上发表的犬瘟热病毒(CDV)核蛋白(N)蛋白基因序列,设计合成了1对寡聚核苷酸引物,提取犬瘟热病毒疫苗株CDV3的RNA为模板,采用RT-PCR扩增病毒的N蛋白基因,并进行产物克隆和序列分析。将CDV3疫苗株N基因与GenBank数据库中的疫苗株Onderstepoort及中国、美国和德国等分离的疫苗株或毒株共14株CDV N基因序列进行同源性分析,发现CDV3 N基因序列与疫苗株Onderstepoort的同源性为97.1%,与其他分离毒株的核苷酸同源性为92.8%～94.0%,其中与中国分离的TN株同源性为93.6%;然而,CDV3 N蛋白与它们的氨基酸同源性却基本都为96.6%～97.3%。这说明虽然犬瘟热弱毒株CDV3在核苷酸水平上与其他疫苗株毒株的差异较大,但是在氨基酸水平上的比较差异较小。 相似文献
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[目的]探讨烟青虫室内饲养的合理方法。[方法]利用人工饲料饲养烟青虫幼虫,研究其在室内饲养环境下各项指标的变化。[结果]3龄之前幼虫死亡率先下降后升高,3龄之后死亡率呈下降趋势,5龄期降至最低,3龄期达到高峰。3龄幼虫体长增长最快,其次是2龄和4龄幼虫,1龄幼虫增长最慢;1龄、2龄、4龄幼虫体长增长速率分别是3龄幼虫的0.40、0.80、0.73倍。3龄幼虫体重增长最快,其次是2龄和4龄幼虫,1龄幼虫增长最慢;1龄、2龄、4龄幼虫体重增长速率分别是3龄幼虫的0.61、0.70、0.71倍。[结论]试验结果为烟青虫的室内饲养提供了理论依据。 相似文献