鹅副粘病毒的分离和鉴定     

叶伟成  张存  刘蔓雯  徐丽华  袁秀芳  张燕 《浙江畜牧兽医》2005,30(3):1-2

采集疑似鹅副粘病毒病的鹅病料,通过鸡胚接种传代分离到1株病毒(HZ株).该分离病毒经鸡红细胞凝集(HA)试验、凝集抑制(HI)试验、电镜形态学观察等,结果表明与NDV极为相似,属禽Ⅰ型副粘病毒.经动物回归试验,结果说明分离到的副粘病毒为临床疫病病原,毒力较强,能使15日龄的鹅、鸡、番鸭等禽类感染发病,发病率与死亡率均为100%.  相似文献   

玉米无融合生殖种子形成的化学诱导     

Hu  G 徐丽华 《杂粮作物》1992,(6):21-24

无融合生殖,如Winkier(1908)描述的,可定义为以“种子”形式的无性繁殖。不过,还用过另外的定义和提出限定范围更为严格的定义(Brown,1972)。无融合生殖发生可有两个途径:(1)种子由未经减数分裂的胚囊或体细胞中含两组染色体的细胞发育(如珠心细胞);(2)种子从减数分裂了的胚囊  相似文献   

生长调节剂和基因型对诱导玉米花药愈伤组织和胚状体的作用     

Hongc.  M 徐丽华 《杂粮作物》1992,(4):11-13,10

作为一种交替的和补充的选育玉米自交系的方法,花药培养产生单倍体世代已引起许多研究者的兴趣,并已取得很大进展(Kuo 等,1986)。愈伤组织诱导率对育种程序中的单倍体世代法的实际应用是一个主要障碍。然而,愈伤组织诱导率在过去的十年中已有较大的提高。中国科学院植物细胞和组织培养研究室的研究人员(1975)把蔗糖浓度从6％增加到12～  相似文献   

岩藻黄质对人红白血病HEL细胞的凋亡作用及其机制     

徐丽华  丁浩淼  金旭东  黄冠杰  夏彭奎  汪财生  王忠华 《核农学报》2020,34(5):963-972

为探讨岩藻黄质对人红白血病HEL细胞株增殖抑制作用及其诱导凋亡机制,以岩藻黄质处理人红白血病细胞(HEL细胞),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分析细胞周期,测定细胞线粒体膜电位,并应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法检测凋亡相关基因及蛋白表达的变化。结果表明,岩藻黄质呈剂量依赖性抑制HEL细胞增殖(P<0.01)。流式细胞术检测显示,岩藻黄质作用24 h后,HEL细胞早期和晚期凋亡的比率极显著增高(P<0.01),G₀/G₁细胞比例增多,S期和G₂/M期细胞比例减少,线粒体膜电位降低;岩藻黄质通过上调促凋亡基因和下调抑凋亡基因的表达引起细胞的凋亡,Bcl-xL蛋白的表达变化不显著(P >0.05),Bcl-2蛋白的表达下调,Caspase-3和Bax蛋白的表达极显著上调(P<0.01)。由此可见,岩藻黄质能诱导HEL细胞凋亡,这为新型抗白血病功能食品的开发及白血病的治疗提供了理论依据。  相似文献   

非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立     

余斌  徐丽华  李军星  苏菲  叶十一  袁秀芳 《浙江农业科学》2023,64(4):964-967

为建立一种快捷高效的非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法，本研究根据GenBank中登录的ASFV B646L基因保守区序列设计引物和探针，通过优化PCR反应体系和反应条件，建立了非洲猪瘟Taqman荧光定量(ASFV-qPCR)检测方法，验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示：本研究所建立的检测方法特异性强，与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均无交叉反应；灵敏度高，能检出10拷贝阳性质粒DNA;重复性好，组内和组间重复试验变异系数均小于1.5%。本研究为非洲猪瘟快速诊断提供了有力技术支撑，为进一步开发ASFV多重荧光PCR检测技术奠定了坚实的基础。  相似文献   

兔H-Y抗血清的制备和验证   总被引：1，自引：0，他引：1  

李孝初  袁秀芳  苏菲  余斌  李军星  叶十一  徐丽华  肖琛闻 《浙江农业科学》2022,63(9):2128-2131

本研究选取1.5~2.0 kg体重的新西兰兔2窝,提取同窝公兔睾丸H-Y抗原并测定蛋白浓度。采取2种不同的免疫方法,制备兔H-Y抗血清,经Western-blot技术检测兔睾丸H-Y抗原组分,应用ELISA法检测抗血清效价,其中5份抗血清中只有0830#产生较高的效价,达1:100以上。本试验结果为兔睾丸抗原组分的测定和兔H-Y抗血清的效价测定提供了一种新的方法。  相似文献   

人居环境类专业模型实验室的建设实践——以浙江农林大学为例     

邵伟丽  楼红旗  王静  徐丽华 《中国林业教育》2023,(1):1-5

模型制作是设计理念最直观有效的表达方式。模型实验室的建设对于人居环境类专业的学科建设和实践教学具有重要的意义。以浙江农林大学风景园林与建筑学院人居环境类专业的模型实验室建设实践为契机，从培养创新人才需求入手，总结模型实验室主要存在以下问题：位置分散且使用面积不足；仪器设备分散管理，资源未得到充分利用；实验室功能分区不完善，空间规划不合理；未建立有效的实验室管理体系，环境安全存在隐患等。针对这些问题，结合人居环境类专业的特点和模型实验室的规划目标，从实验室资源整合与空间扩充、实验室功能完善、优化实验室分区等方面总结了模型实验室建设思路，并将先进的信息技术手段运用于实验室内人员、设备和环境的管理，切实保障模型实验室安全、高效运行，全力服务于人居环境类专业培养创新人才。  相似文献   

猫冠状病毒核衣壳蛋白的可溶性表达与多克隆抗体反应性鉴定     

张丹  卢舒婷  卢辰赫  王子仪  徐丽华  陈伊玄  王圣文  金子安  倪成章  周继勇  郑肖娟 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2023,(3):424-434

为制备猫冠状病毒（feline coronavirus, FCoV）核衣壳（nucleocapsid, N）蛋白的特异性抗体，本研究将Ⅰ型FCoV(ZJU1709)的N蛋白基因全长c DNA亚克隆到pCold TF原核表达载体上，通过低温诱导表达、镍柱亲和纯化获得可溶性重组N蛋白；进一步以纯化的重组N蛋白为免疫原制备兔多克隆抗血清（多抗血清），再通过酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）、蛋白质印迹法（Western blotting, WB）、间接免疫荧光试验（indirect immunofluorescence assay, IFA）等多种方法对兔多抗血清进行反应性鉴定。结果显示：经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside, IPTG）和低温诱导，成功表达出分子量约为100 kDa的可溶性重组N蛋白，在非变性条件下亲和纯化获得的重组N蛋白质量浓度达到1.4 mg/mL;N蛋白兔多抗血清的ELISA效价可达1×106，与真核表达的重组蛋白Flag-N以及FCoV...  相似文献