改良一步法提取植物RNA、DNA和蛋白质的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

肖笑  韩斌  徐晟  李乐  何健  黄明  谢贵水  沈文飚 《农业科学与技术》2010,(9):58-62

[目的]利用改良的一步法提取植物RNA、DNA和蛋白质。[方法]采用CTAB试剂对Biozol抽提法进行改良,用一步法分别对玉米（Zea maysL.）、大豆（Glycine maxL.）、苜蓿（Medicago sativaL.）和黄瓜（Cucumis sativusL.）4种作物根的RNA、DNA和蛋白质进行共提取,并对其HO-1和CDPK1基因及HO-1蛋白进行鉴定。[结果]经紫外分光光度计测定和琼脂糖凝胶电泳分析证明获得的RNA和DNA样品纯度较高;HO-1基因和CDPK1基因的RT-PCR结果呈阳性;所提取的蛋白质也可用于Western blot分析;整个提取过程只需3h。[结论]该方法实用性较强,具有广泛的应用价值。  相似文献   

改良一步法提取植物RNA·DNA和蛋白质的研究     

肖笑  韩斌  徐晟  李乐  何健  黄明  谢贵水  沈文飚 《安徽农业科学》2011,39(1):59-62

[目的]利用改良的一步法提取植物RNA、DNA和蛋白质。[方法]采用CTAB试剂对Biozol抽提法进行改良,用一步法分别对玉米（Zea mays L.）、大豆（Glycine max L.）、苜蓿（Medicago sativa L.）和黄瓜（Cucumis sativus L.）4种作物根的RNA、DNA和蛋白质进行共提取,并对其HO-1和CDPK1基因及HO-1蛋白质进行鉴定。[结果]经紫外分光光度计测定和琼脂糖凝胶电泳分析证明获得的RNA和DNA样品纯度较高;HO-1和CDPK1基因的RT-PCR结果呈阳性;所提取的蛋白质也可用于Western blot分析;整个提取过程只需3h。[结论]该方法实用性较强,具有广泛的应用价值。  相似文献   

惠农区林木资源管护工作的对策建议     

郭永玲  高旭东  牛博宇  白宇  徐晟 《宁夏农林科技》2023,(12):29-32

林木作为重要的生态资源,能改善生态环境,因此,加强林木管护工作十分重要。在介绍惠农区林木资源管护采取的主要措施及取得的成效基础上,分析林木资源管护存在的问题,提出加强林木资源管护的对策建议,旨在提升林木资源管护工作水平,提高林木质量。  相似文献   

免疫PCR检测技术及其在食品安全领域中的应用     

黄明  肖笑  徐晟  周兴虎  周光宏  沈文飚 《南京农业大学学报》2010,33(6)

免疫PCR技术是一种在免疫学和PCR技术基础上建立起来的新型检测技术,这种技术同时具有ELISA的高特异性和PCR的高灵敏性。本文介绍了免疫PCR的技术原理和反应体系,比较其不同种类和应用范围,指出免疫PCR存在的问题并提出相应的对策;归纳了目前免疫PCR在食品安全等领域中的应用;并结合免疫PCR技术的优势提出其在食品安全检测中的应用前景。  相似文献   

设施樱桃番茄高产优质栽培技术     

徐晟 《吉林蔬菜》2020,(1):22-22

樱桃番茄因其营养丰富,具有生津止渴、健胃消食、清热解毒、凉血平肝,补血养血和增进食欲的功效。食用方便(既可做蔬菜、又可当水果食用),且风味独特,很受市场青睐。经济效益比较明显。随着人们对农产品品质及安全的要求不断提高,高品质的樱桃番茄成为种植的趋势。随着设施农业在当前农业中占的比例越来越大,设施番茄在保证优良品质和风味的同时,还能兼顾到高产量的落实,而受广大菜农的青睐。樱桃番茄生长发育的适宜温度,在20~28益,种子发芽期需要温度25~30益,低于14益发芽困难。幼苗期白天温度为20~25益,夜间为10~15益。开花坐果期,白天20~28益,夜间15~20益,低于15益,生长发育缓慢,气温高于35益时,植株生长缓慢,也会引起落花落果。果实发育期,一般白天为24~28益,夜间为16~20益,昼夜温差保持在8~10益。  相似文献   

一步法同时提取棉铃虫中肠RNA和蛋白质     

黄晶晶  韩斌  徐晟  沈文飚  沈晋良 《南京农业大学学报》2010,33(6)

利用一步法从单个棉铃虫(Helicoverpa armigera(Hübner))的中肠样品中分离出RNA和蛋白质。进一步试验证明提取的RNA纯度和完整性较高,能应用于RT-PCR;所获得的棉铃虫中肠蛋白的SDS-PAGE电泳显示,蛋白条带清晰且能应用于Western blot分析。该方法具有简便和快速的特点,并能够实现核酸和蛋白水平上的相互验证。  相似文献   

外源一氧化氮供体硝普钠对小麦种子萌发早期β-淀粉酶及其亚细胞分布的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

孙永刚  凌腾芳  王家杰  徐晟  宣伟  汤国辉  沈文飚 《作物学报》2008,34(9):1608-1614

采用药理学和生物化学实验技术, 研究了外源一氧化氮(nitric oxide, NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)处理对小麦种子萌发早期β-淀粉酶及其亚细胞分布的影响。β-淀粉酶的专一性抑制剂α-环糊精可以明显抑制0.5 mmol L^-1 SNP诱导的小麦种子萌发, SNP还能诱导自由型β-淀粉酶酶活性, 上调β-淀粉酶基因转录本的水平。Western blotting结果发现, SNP处理可以增加β-淀粉酶蛋白的表达; 运用NO专一性清除剂cPTIO及转录抑制剂放线菌素D可以逆转上述转录本和蛋白水平的变化。免疫电镜亚细胞定位证实小麦胚内的β-淀粉酶主要定位于蛋白储藏体内, 并可能附着在淀粉粒上, SNP处理增加了β-淀粉酶蛋白的分布。推测外源NO供体SNP在小麦种子萌发早期不仅提高了自由型β-淀粉酶的活性, 还可能诱导了β-淀粉酶的重新合成。  相似文献   

吉林省畜禽粪便污染分析及对策   总被引：7，自引：0，他引：7  

高洪军  朱平  彭畅  李强  徐晟  鲁俊梅 《吉林农业科学》2008,33(5)

阐述了吉林省畜禽粪便污染现状及原因;并根据相关数据,评价和分析了畜禽粪便对环境的污染;提出了相应的应用和管理措施。  相似文献   

一氧化氮供体对盐胁迫下水稻幼苗叶片脂质过氧化的调节     

黄本开  刘开力  徐晟  宣伟  樊颖瑞  黄思睿  凌腾芳  刘志兵  孙永刚  沈文飚 《农村．农业．农民》2005,(3):22-25

以100mmol·L-1NaCl作为盐胁迫条件,研究不同浓度的外源一氧化氮供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)处理5 d对盐胁迫下水稻幼苗叶片脂质过氧化的影响.结果表明,低浓度SNP(10 μmol·L-1)可以在处理后期(第4～5天)显著地缓解盐胁迫对水稻幼苗叶片造成的氧化损伤,并与其对过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等H2O2清除酶活性以及脯氨酸含量的上调作用一致.此外,较高浓度的SNP处理(50μmol·L-1)也具有在一定程度上缓解脂质过氧化的作用.  相似文献   

山桃醇腈酶基因PdHNL1的克隆、序列分析与原核表达     

傅江燕  徐晟  夏冰  汪仁 《江苏农业科学》2015,(7)

以山桃叶片为材料提取RNA,反转录后得到c DNA,通过PCR扩增得到1个山桃醇腈酶基因全长编码序列,并命名为Pd HNL1。Pd HNL1的开放阅读框为1 737 bp,预测编码蛋白包含539个氨基酸。氨基酸序列比对结果表明,Pd HNL1编码的蛋白具有葡萄糖甲醇胆碱氧化还原酶的序列特征,与黑樱桃醇腈酶Ps HNL4蛋白相似度为92%,与桃假定的HNL蛋白相似度为77%。通过将Pd HNL1基因连接到原核表达载体p ET28(a)上,并转化大肠杆菌BL21(DE3)后,成功构建了原核表达重组菌株。SDS-PAGE电泳结果显示,重组蛋白受IPTG诱导表达,分子量大小约为62.4 ku,与已报道的其他蔷薇科植物的醇腈酶蛋白大小基本一致。  相似文献