猪腺病毒3型Protease蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗体制备     

吴思雯  胡聪  唐青海  韩涛涛  刘祯珍  向冬梅  王姝姝  李彦  杨海  王芳宇 《中国畜牧兽医》2019,46(6):1764-1773

试验旨在研究猪腺病毒3型（PADV3） Protease蛋白在大肠杆菌中的表达,并制备该蛋白的多克隆抗体。利用PCR扩增PADV3 Protease基因,构建重组原核表达载体pET28a-PADV3-Protease和真核表达载体pEGFP-PADV3-Protease,采用双酶切和测序鉴定;将原核表达载体pET28a-PADV3-Protease转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞得到重组原核表达菌株,经IPTG诱导收集蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定,将目的蛋白纯化后与佐剂乳化制备免疫原免疫家兔,制备Protease蛋白多克隆抗体;将真核表达载体pEGFP-PADV3-Protease转染HEK293细胞经G418筛选建立稳定表达EGFP-Protease融合蛋白的细胞系,以该稳定表达细胞系为包被抗原,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法（IPMA）检测抗体的免疫活性与抗体滴度。结果显示,Protease基因开放阅读框（ORF）为615 bp,原核表达系统中Protease蛋白以包涵体形式存在,分子质量大小为23 ku,与真核细胞表达的Protease蛋白分子质量一致,该蛋白在细胞核与细胞质中均有分布,制备的Protease蛋白多克隆抗体能与EGFP-Protease融合蛋白稳定表达真核细胞系发生特异性的反应,与对照细胞无反应。本试验构建了Protease蛋白原核表达菌株和真核表达细胞株,制备的PADV3-Protease蛋白多克隆抗体免疫活性良好,为进一步研究Protease蛋白的生物学功能和PADV3的血清学诊断提供了基础材料。  相似文献   

硒对番茄叶片中谷胱甘肽过氧化物酶活性及产量和品质的影响   总被引：26，自引：0，他引：26  

李彦  罗盛国 《山东农业科学》1999,(6):38-39

在大棚栽培条件下,研究了硒对番茄叶片中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH- px) 活性、膜脂过氧化产物丙二醛(MDA) 的积累、果实中维生素C(Vc) 含量及产量的影响。结果表明:与对照相比,施用一定量的硒可使番茄叶片中GSH- px 活性提高46.0% ,F= 11 .25* ;使MDA 含量降低16-5 % ,但未达到显著水平;GSH- px 活性与MDA含量间呈显著负相关,r= - 0 .70* ;果实中Vc 含量增加11 .4 % ,F=9 .06* ;产量提高19 .8 % ,但未达到显著水平。  相似文献   

膜下滴灌棉田土壤水分参数的空间变异性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

申祥民  雷晓云  李彦  谢训园 《灌溉排水学报》2010,29(2)

以新疆生产建设兵团石河子国家农业科技园区的膜下滴灌棉田作为试验区,采用均匀法布点方式,测定了各个采样点0～20、20～40和40～60 cm三个不同深度土壤的含水率,利用地统计学理论分析了膜下滴灌棉田均匀布点方式下土壤含水率的空间变异规律,并利用Sufer绘制了土壤含水率的等值线图,结果表明:①膜下滴灌棉田均匀布点采样方式下,东西方向即沿膜向的半方差函数值在0～20、20～40和40～60 cm深度层的变化规律趋于一致,随着深度增加棉田的土壤含水率的空间变异强度在逐渐减小;②各方向的半方差函数值的相关性均随着深度增加棉田的土壤含水率的空间结构性更加显著;③东西方向的空间变异性随着深度的增深而减小,其他方向的空间变异性随着深度的增深而增大;东西方向即沿膜向为弱变异,其他方向20～40 cm层为强变异,0～20、40～60 cm层为中等变异。  相似文献   

鲢鱼酶解产物的特性及其对乳酸菌的抗冻保护作用     

崔美丽  刘永乐  俞健  李向红  罗阳阳  李彦  王发祥 《江苏农业学报》2021,37(1):197-203

为筛选新型乳酸菌抗冻保护剂,通过复合蛋白质酶水解15 min、30 min、60 min、120 min、240 min制备了不同水解度的鲢鱼酶解产物,研究其相对分子质量分布、氨基酸组成、表面疏水性、活性巯基含量等特性及其不同酶解时间鲢鱼酶解产物和不同质量分数鲢鱼酶解产物对乳酸菌冻融存活率的影响.结果表明,不同酶解时间酶解产物相对分子质量主要在9.00×101～5.40×105,其氨基酸组成和含量基本相同,亲水性氨基酸比例占总量的68％;随着酶解时间增加,酶解产物的表面疏水性和活性巯基含量均呈先降后升趋势,其中酶解120 min的鲢鱼酶解产物表面疏水性最低,酶解30 min鲢鱼酶解产物的活性巯基含量最低;在不添加抗冻保护剂情况下,乳酸菌耐冻性能较差,4次冻融循环后存活率为22.82％;添加不同酶解时间鲢鱼酶解产物均对乳酸菌有一定的抗冻保护效果,其中酶解120 min的酶解产物对乳酸菌的抗冻保护效果最好,添加质量分数为4％时可使乳酸菌4次冻融循环后的存活率提高至85.20％.说明鲢鱼酶解产物是一种潜在的乳酸菌抗冻保护剂.  相似文献   

不同培肥措施对采煤塌陷区复垦土壤氮素矿化的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

李彦  李廷亮  焦欢  高继伟  何冰  李顺 《水土保持学报》2018,32(4):227-232,239

为揭示不同培肥措施对采煤塌陷区复垦土壤氮素矿化特征,采用间歇淋洗好气培养法,研究了不施肥(CK)、单施化肥(CF)、单施有机肥(M)、化肥配施有机肥(MCF)和化肥配施生物有机肥(MCFB)5种培肥措施对复垦4年和8年土壤矿质态氮和可溶性有机氮变化及氮素矿化特征的影响。结果表明:间歇淋洗好气培养过程中,复垦8年土壤累积NO_3~-—N产生量较4年增加2.63%~26.83%,NH_4~+—N累积产生量增加12.50%~32.14%,可溶性有机氮(SON)累积产生量在CF和M处理下减少31.59%~62.50%,其他处理增加3.44%~34.69%。同一复垦年限下NO_3~-—N、NH_4~+—N和SON累积产生量均以MCFB最高。从矿化参数来看,5种培肥措施土壤矿化势(N_0)均表现为复垦8年高于复垦4年土壤,增加幅度为MCFB(26.9%)CK(15.9%)CF(15.0%)M(12.7%)MCF(4.8%);CK和CF处理下潜在可矿化有机氮(N_0/N)随复垦年限增加而减少,减少率分别为9.4%和13.8%,其余3种培肥措施N_0/N呈增加趋势,增加率表现为MCF(13.2%)MCFB(7.5%)M(2.8%);MCF处理下矿化率(N_t/N)随复垦年限增加而增加,增加率为13.2%,其余4种培肥措施的矿化率(N_t/N)均表现为复垦8年低于复垦4年土壤,减少幅度为CF(12.1%)CK(9.4%)MCFB(7.5%)M(2.7%)。不同处理间N_0、N_0/N和N_t/N值则均以8年复垦土壤的MCFB处理最高。综合来看,经过连续8年复垦,化肥配施生物有机肥较其他培肥措施更大程度上提高了各项矿化参数值,但随着复垦年限的增加,以化肥配施有机肥处理的N_0、N_0/N的增加幅度最大,以化肥配施生物有机肥处理的N_t/N减少率最低,长期单施化肥有降低潜在可矿化有机氮量(N_0/N)的趋势。  相似文献   

施肥对黄河三角洲盐碱地作物产量及其构成因素的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

薄录吉  李彦  罗加法  张英鹏  井永苹  孙明  仲子文  刘兆辉 《江西农业学报》2018,(5)

通过田间试验探讨了抗盐施肥对黄河三角洲盐碱地小麦、玉米、棉花和花生产量及其构成因素的影响。结果表明:与农民习惯施肥处理(FP)相比,优化施肥处理(OPT)、化学抗盐施肥处理(CHP)和有机抗盐施肥处理(ORP)分别使小麦产量增加了16.0%、17.9%和28.0%,生物抗盐施肥处理(BIP)和ORP处理分别使玉米产量增加了18.3%和17.6%,OPT、CHP、ORP及BIP处理分别增加棉花产量14.0%、18.2%、21.0%和24.6%,ORP和BIP处理分别增加花生产量15.6%和13.7%。说明合理施肥配合生物、化学和有机抗盐措施可显著提高黄河三角洲盐碱地的作物产量。  相似文献   

氮肥减量施用技术及其对作物产量和生态环境的影响综述   总被引：15，自引：0，他引：15       下载免费PDF全文

刘兆辉  薄录吉  李彦  孙明  仲子文  张英鹏  井永苹 《中国土壤与肥料》2016,(4):1-8

氮肥对提高农作物的产量具有重要作用,但过量施氮不仅会影响作物产量和品质,还会对生态环境产生负面影响,而适当减量施氮,既能保证作物产量、提高肥料利用率,又能减少对环境的危害,从而实现农业高产、高效、持续健康的发展。本文综述了氮肥减量施用技术及其对农作物产量和生态环境影响的最新研究进展,提出了减量施肥过程中存在的问题及展望,旨在为保证作物高产和兼顾环境友好的氮肥减量施用技术提供思路和参考。  相似文献   

日粮中不同维生素A和维生素E添加水平对肉仔鸡维生素生物学利用率的影响     

李彦  杨在宾  杨维仁  初晓娜  邹杨  周佳萍 《动物营养学报》2009,21(2)

本文旨在研究肉仔鸡日粮中添加不同水平维生素A、维生素E对其生物学利用率的影响.选用1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡960只,随机分为4个处理,每个处理3个重复,每个重复80只鸡.试验日粮参照AA肉仔鸡推荐标准配制,4个处理的日粮维生素A、维生素E添加水平分别为:6 375和37.5 IU/kg、8 500和50 IU/kg、10 625和62.5 IU/kg、12 750和75 IU/kg.试验期49 d.研究表明:增加日粮维生素A、维生素E水平可以改善肉仔鸡增重和料重比.肉仔鸡血清和肝脏中维生素A、维生素E水平均随日粮添加水平的增加而提高.维生素A、维生素E水平从AA肉仔鸡推荐量(8 500和50 IU/kg)降至6 375和37.5 IU/kg时,肉仔鸡血清中维生素A、维生素E水平降低了8.42%(P>0.05)和12.14%(P<0.05),肝脏中维生素A、维生素E降低了9.04%和5.12%(P>0.05);维生素A、维生素E水平分别增加至12 750和75 IU/kg时,血清维生素A、维生素E水平提高了6.44%(P>0.05)和42.21%(P<0.01),肝脏维生素A、维生素E提高了192.58%和65.03%(P<0.01).由此可知,提高日粮维生素A、维生素E水平可提高肉仔鸡血清和肝脏中维生素A、维生素E的水平.  相似文献   

不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清抗氧化指标的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

庄怀飞  侯明海  李彦芹  王玲玲  宋杰  仲跻峰  李文立 《中国农学通报》2009,25(4):1-5

【研究目的】本试验旨在研究不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清抗氧化指标的影响。【方法】试验选取40头荷斯坦种公牛,随机分为10组,对照组饲喂基础日粮,试验组采用3×3试验设计,分别饲喂不同铜、锰水平的日粮,铜的添加水平分别为4、8、12mg/kg（按日粮干物质计）,锰的添加水平分别为50,125,200mg/kg,试验期8个月。【结果】结果表明：不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）、锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）活性及血清一氧化氮（NO）含量差异极显著（P<0.01）,对总抗氧化能力（T-AOC）、铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）差异显著（P<0.05）,对血清过氧化氢酶（CAT）,铜兰蛋白（CP）活性及丙二醛（MDA）含量无显著差异(P>0.05)。【结论】综合分析不同铜、锰水平下试验牛抗氧化指标的变化,铜的适宜添加水平为4-8mg/kg日粮干物质,锰的适宜添加水平为50mg/kg日粮干物质。  相似文献   

养分综合管理对马铃薯抗冻性的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

石晓华  杨海鹰云庭李彦强  张智芳 《中国农学通报》2014,30(21):158-163

内蒙古马铃薯生产中面临倒春寒和秋早霜的冻害威胁,特别是秋早霜如果较重将造成产量的大幅下降。因此,尽可能提高马铃薯抗冻性对内蒙古马铃薯产业发展具有重要意义。本文从养分综合管理的角度出发,研究了马铃薯叶片矿质元素含量以及叶面积指数与马铃薯抗霜冻性的关系。结果表明,马铃薯叶片中氮磷钾含量以及叶面积指数均与其抗霜冻性存在相关关系,其中,氮肥处理的叶面积指数变化与霜冻损害评分的相关性最为显著,相关系数达-0.948,该处理下叶面积指数变化对霜冻损害评分影响幅度达到1.6,同样为各处理中最高值。  相似文献