几个杨树木质部特异启动子的分离与序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

张爽  武会  杜克久  李成德  苏金浩 《蚕业科学》2009,35(2)

为了获得能在桑天牛(Apriona germari)寄主树种木质部特异表达的启动子用于害虫的防治,参照美洲山杨(Populus tremuloidMichx.)木质部纤维素合酶基因(PtCesA)序列(GenBank登录号:AF072131)设计引物,分别以三倍体毛白杨-93(Populus tomentosaCarr.-"93")、加杨-1(Populus CanadensisMoench.-"1")、意大利214杨(Populuscanadensiscv."I-214")基因组DNA为模板进行体外扩增,分离得到了MDCesAP、MXCesAP、JCesAP、YCesAP共4个片段。虽然4个片段序列之间及与美洲山杨中分离到的PtCesAP基因的同源性较低,但4个片断序列中的A/T含量都在60%~75%之间,且都有TATA box、poly(A)等启动子调控元件,因而有可能是新发现的特异启动子。  相似文献   

植物叶片气孔运动机制研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨金华  杜克久 《河北林果研究》2011,26(1):47-53

就气孔运动上游调控因素、调控因素的感受、跨膜信号转导以及下游生理反应等几个方面对植物叶片气孔运动机制以及试管苗的气孔行为进行了综述。  相似文献   

抑制4CL基因表达的转基因毛白杨中木质素含量与茎杆颜色的关系   总被引：3，自引：0，他引：3  

贾彩红  王宏芝  杜克久  宋艳茹  魏建华 《农业生物技术学报》2004,12(6):621-624

摘要： 将反义4CL（4-香豆酸辅酶A连接酶, 4-coumarate:CoA ligase）基因转入三倍体毛白杨（Populus tomentosa Carr.）可显著降低转基因植株的木质素含量。转基因植株茎杆在剥皮后呈现程度不等的红褐色,而对照为白色。茎杆全部为红褐色的转基因株系中木质素含量下降最多,茎杆局部为红褐色或呈现红褐色斑点的株系中木质素含量下降幅度减小。野生型对照茎杆的Wiesner反应为典型的紫红色,转基因植株红褐色茎杆的Wiesner反应为红色。茎杆为红褐色斑块的株系中,红褐色部分的Wiesner反应呈红色,白色部分与对照相同,呈典型紫红色,进一步证明颜色改变与转基因株系木质素含量的关系。茎杆颜色的改变可作为一个辅助指标筛选低木质素含量的转基因株系。  相似文献   

鸭梨Hc ISSR-PCR反应体系的优化     

支婷  刘春琴  崔建州  杜克久 《北方园艺》2011,(12):89-92

应用正交设计的方法对影响鸭梨Hc ISSR-PCR反应的4个因素(模板DNA、引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶)进行5个水平的优化试验,以DPS 7.55软件分析。结果表明:鸭梨HcISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:模板DNA 60 ng、引物浓度0.4μmol/L、dNTPs浓度0.1mmol/L、TaqDNA聚合酶2 U。  相似文献   

杨树木质部特异启动子的分离与功能分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

张爽  杜克久  李成德 《江西农业学报》2006,18(5):105-108,117

从三倍体毛白杨-93(Populus tomentosaCarr.)中分离得到了MDCesAP这一木质部纤维素合酶基因启动子。通过对其进行序列分析,发现A/T含量达63%,有TATA box、polyA等启动子调控元件。与PTCesAP比较,同源性较低。用MDCesAP分别替换PCAMB IA1302及PB I121中的CaMV 35S启动子,转入植物后检测目的片段的启动子功能,结果表明MDCesAP为木质部特异性启动子。  相似文献   

根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)对毛白杨五种防御酶系统的影响     

王召元  袁玉欣  杜克久  王颖  侯西成  王艳芬 《河北农业大学学报》2007,30(4):31-35

用野生根癌农杆菌接种毛白杨后,定期测定叶片内5种酶活性的动态变化,旨在揭示毛白杨对根癌农杆菌侵染后的生理响应,阐明杨树根癌病的病害生理。毛白杨接种病原菌后,SOD、POD、PPO前期活性高于对照,有1个酶活高峰,后期下降接近对照;CAT出现2个酶活高峰,25 d虽有下降,但一直高于对照;PAL活性变化幅度比较小,基本保持在对照水平,与对照相比差异不显著。研究结果表明:SOD和CAT对根癌农杆菌最敏感,POD和PPO次之,PAL敏感性最差。  相似文献   

转基因败育毛白杨雄株试管苗气孔行为观察     

杨金华  朱美秋  杜克久 《安徽农业科学》2011,39(18):10860-10861,11002

[目的]探寻试管苗叶片气孔行为异常的原因。[方法]利用指甲油涂抹撕取法将转基因败育毛白杨雄株试管苗与10年生植株叶片下表皮制成切片,并对其气孔密度：气孔大小、气孔开度日变化、气孔开张率日变化进行观察比较。[结果]试管苗气孔密度小于140年生植株;试管苗气孔明显比10年生植株气孔大;试管苗气孔开度日变化呈明显波峰状,2个高峰分别出现在9：00和15：00,10年生植株曲线平稳,无明显波动,且试管苗气孔开度大于10年生植株;试管苗气孔开张率在一昼夜均为100％,10年生植株气孔开张率在一昼夜呈双曲线变化。[结论]转基因败育毛白杨雄株试管苗与10年生植株气孔行为存在差异。  相似文献   

几个杨树木质部特异启动子片段表达载体的构建与功能分析     

张爽  武会  杜克久 《蚕业科学》2012,38(2):199-203

木质部纤维素合酶基因(CesA)在植物正常生长期的木质部特异表达,受到外界压力时可诱导在韧皮部表达,因而被用作杨树抗桑天牛转基因研究中的特异性表达启动子。将前期分离的CesA上游DNA片段JCesAP、YCesAP和MDCesAP分别替换植物表达载体pCAMBIA1302中的组成型启动子CaMV35S,构建成新的植物组织特异性表达载体pJCesAP-GFP、pYCesAP-GFP和pMDCesAP-GFP,然后采用农杆菌介导法转化烟草,均得到完整的再生烟草植株。经PCR初步检测证明目的基因已整合到烟草基因组中。荧光检测JCesAP、YCesAP和MDCesAP片段均能启动GFP蛋白的表达,在395 nm激发光下出现黄绿色荧光,显示3个CesA片段均具有在木质部特异表达的启动子活性。  相似文献   

拮抗灰霉菌的海洋细菌甲基营养型芽胞杆菌的筛选、鉴定及其抑菌活性物质的研究     

魏新燕  黄媛媛  黄亚丽  杜克久 《中国生物防治学报》2017,(5):667-674

采用Zo Bell’s 2216E培养基从65份渤海海水和底泥样品中分离到海洋细菌464株,通过平板对峙法获得了对灰霉菌具有较强拮抗作用的海洋细菌47株,其中菌株BH21的抑菌作用最强,抑菌带宽度为(11.8±0.3)mm;采用形态学、生理生化和分子生物学相结合的方法,将菌株BH21鉴定为甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus,该菌具有较强耐盐、耐甲醇能力;通过排油圈法确定菌株BH21能够产生具有表面活性的代谢产物,随后以脂肽类物质相关基因的特异序列为引物进行菌株BH21抑菌活性成分相关基因的扩增,确定该菌株中含有itu A、itu B、itu C、itu D、fen D、srf AB和ynd J等7种脂肽物质的合成基因;利用盐酸沉淀和甲醇抽提法获得了BH21发酵液中脂肽粗提物,通过牛津杯法确定该脂肽粗提物具有明显抑制灰霉菌菌丝生长的能力,抑制率达到73.9%。  相似文献   

蛋白质组学概况及在植物中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘颖丽  杜克久  裴东 《河北林果研究》2006,21(3):262-265

蛋白质组学是后基因组时代的新兴领域,本文简要介绍了其研究内容和方法,特别介绍了蛋白质组学的关键技术———双向凝胶电泳和质谱,概括了蛋白质组学在草本及木本植物中的主要研究进展,展望了植物蛋白质组学的发展前景。  相似文献