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[目的]建立重复性好的感受态细胞的快速制备方法和质粒转化方法。[方法]采用改进的氯化钙法制备感受态细胞后,将带有目标片段的质粒转入感受态细胞,使工程菌DH5α转化成具有抗氨苄青霉素的大肠杆菌,接种于添加氨苄青霉素的LB培养基上,并通过蓝白斑筛选和菌落PCR进行检测。[结果]制备的感受态细菌在不加Amp的LB平板上能较好生长,表明感受态细菌具有较强活性。感受态细菌在添加Amp的平板上不能生长,表明感受态细菌未被杂菌污染。转化后获得白色菌落1 410个,转化率为1.41×105cfu/μg。菌落PCR表明获得的白色菌斑为带有目标片段的阳性菌斑。[结论]该方法十分简便,是一种适于实验室操作的高效感受态细胞的制备方法。 相似文献
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水稻根际固氮作用的研究概况朴哲,石铁源,崔宗均,金滢完,崔一龙(延边农学院)(北京农业大学)(延边农学院)1前言水稻(OryZasativaL·)是当今世界的主要粮食作物,其总产量居各类粮食作物之首。我国水稻种植面积约3.OX107lla,占全国粮食... 相似文献
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为优化提高玉米膜上穴播轮的播种精度,针对目前玉米膜上精密穴播轮装置单粒率低、空穴率较高等问题,根据玉米播种时的特殊要求,优化设计了一种农机与农艺深度结合的玉米膜上精密穴播轮。系统介绍了所设计装置的机械结构及工作原理,并通过对穴播轮的结构和工作原理分析,确定将取种器中夹种板板长、夹种板偏角及夹种板与接种杯间距为作为影响试验结果的关键试验因素,将单粒率和空穴率作为目标值,通过数学软件对影响单粒率Y1和空穴率Y2的因素进行数据处理并全面优化,得到影响单粒率Y1的显著因素顺序为夹种板与接种杯间距X3>夹种板板长X1>夹种板偏角X2,影响空穴率Y2的显著因素顺序为夹种板与接种杯间距X3>夹种板偏角X2>夹种板板长X1。优化分析与试验验证结果表明:当取种器中夹种板板长X1为17mm、夹种板偏角X2为40°、夹种板与... 相似文献