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111.
人血清白蛋白DNA片段的扩增及克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
根据人血清白蛋白(HSA)基因的第八个外显子区DNA序列及相应cDNA序列和KB小鼠血清蛋白DNA序列设计的一对引物P_1:5'-GGATCCACCAACTTACTTATAGGCG-3'和P_2:5'-AGGATCCTACTTACATGCCCAGGAAG-3'.以人白细胞和KB鼠DNA为模板,在50_(μl)PCR反应体系中,经94℃、lmin,58.5℃,35S,72℃、lmin三个循环.94℃、lmin,57.5℃,40S.72℃、lmin32个循环扩增,获得了约为256bp的单一带DNA,KB鼠无专一带.将人HSA DNA扩增的单一带DNA以BamHI-Sst I位点克隆到pUC19中,得到HSA DNA扩增片段的克隆子. 相似文献
112.
113.
114.
115.
青岛市节水灌溉运行机制及效益浅祈 总被引:1,自引:1,他引:1
简述了山东省青岛市“九五”期间发展节水灌溉的基本情况,介绍了发展节水灌溉的基本思路及管理运行模式,即加强领导、加大投入,抓好工程建设和建后管护,推广应用新技术、新设备等,取得了节水、增产、节地、提高灌溉水有效利用率的效果,具有显著的社会效益和生态效益,有利于农业产业结构的调整。 相似文献
116.
"翠冠梨"是一种砂梨品种,具有适应性广、抗逆性强、品质优良、成熟期早、丰产性能好等特点,是近年来江浙一带推广的梨树新品种.梅堰镇农服中心自1997年底引种以来,栽培面积已发展有520亩,经5年栽培管理,摸索出一套"翠冠梨"栽培技术. 相似文献
117.
118.
【目的】明确重组蛋白 pGEX-TPO18 的免疫保护效果。【方法】提取豆状带绦虫六钩蚴 RNA,根据带科其他种属绦虫 18 kD 基因的保守区设计引物,5′端分别引入EcoR I、Xho I限制性酶切位点,RT-PCR 扩增,产物克隆于 pMD18-T中进行序列测定,并对序列进行生物信息学分析。将纯化后的 PCR 产物和质粒 pGEX-4T-1 分别用 EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切,回收目的片段,连接后转化至 E.coli BL21感受态细胞,挑斑摇菌,通过 PCR 方法和重组质粒测序技术进行鉴定,将鉴定正确的重组表达质粒命名为 pGEX-TPO18。用 IPTG 诱导表达重组质粒,收集菌体进行 SDS-PAGE 分析,用 GST 琼脂糖树脂纯化 TPO18 蛋白,进行 Western blottting 检测。将纯化后的重组蛋白分别乳化弗氏佐剂、206 佐剂、氢氧化铝佐剂后免疫家兔,每次 50 μg/只,共免疫 3 次,末次免疫后 34 d 每只家兔感染 1 500 个虫卵,感染 58 d 后扑杀并计算各免疫组减囊率。免疫前后每隔 7 d 采血分离血清,ELISA 法检测血清抗体水平,以 40 µg•mL-1重组蛋白包被酶标板,血清 1﹕200 稀释,检测血清样品的 OD492nm 值。【结果】TPO18 基因的 RT-PCR 扩增产物为 339 bp, 与预期大小相符;测序结果表明无碱基突变,重组质粒pGEX-TPO18构建成功。pGEX-TPO18 在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物为 38.6 kD 的可溶性蛋白,Western blotting分析结果显示兔抗豆状囊尾蚴阳性血清与重组蛋白在38.6 kD处有一条明显的反应条带,表明该重组蛋白具有反应原性。经ELISA检测,免疫后7 d 免疫组家兔抗体水平开始升高,第43 天达到峰值。经口感染虫卵后,免疫组抗体水平开始降低,但仍保持一定水平。家兔免疫保护试验表明弗氏佐剂、206 佐剂和氢氧化铝佐剂免疫组减囊率分别为 79.13%、65.66% 和 50.43%。【结论】研究表明弗氏佐剂免疫效果较好,有望研制出抗豆状囊尾蚴病的高效疫苗。 相似文献
119.
刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3的克隆与原核表达 总被引:2,自引:0,他引:2
根据Genbank中编码MIC3的已知基因序列设计并合成一对引物,应用PCR技术对刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3进行克隆、表达及鉴定.结果表明:克隆的MIC3基因的开放阅读框与Genbank收录的MIC3基因在核菌酸和氨基酸水平上高度一致,说明弓形虫MIC3蛋白的高度保守性;构建的原核细胞表达质粒PET-MIC3表达产物分子量为46 ku,且经Western-blot显示可被猪抗弓形虫免疫血清识别. 相似文献
120.
塔里木河上游河岸胡杨径向生长对温度的敏感性 总被引:1,自引:1,他引:0
基于塔里木河上游近64 a的气象数据和上游河岸胡杨年轮资料,分析塔里木河上游河岸胡杨径向生长特征及其与气候因子的关系,并采用敏感度分析方法研究胡杨径向生长的敏感温度。结果表明:(1)近170 a来,胡杨年轮生长出现了两个峰值和一个低值,两个峰值出现在1857年和1879年。在1879年以后年轮生长呈现明显下降趋势,1955年达到最低值。此后年轮生长又开始出现增加趋势,1989年以后年轮生长略微降低。(2)树轮年轮指数与6—9月的平均温度呈现显著负相关,说明温度是限制塔里木河上游河岸胡杨径向生长的主要因子。随着温度的上升,胡杨径向生长呈现逐渐减小的趋势。(3)河岸胡杨径向生长对温度变化响应敏感度不同。随着温度上升,胡杨径向生长灵敏度降低幅度呈现先增强后减弱的趋势,灵敏度最大值所对应的温度为18.6℃。因此,该采样区域的胡杨径向生长的最佳温度是18.6℃。 相似文献