响应面法优化丹参中抗无乳链球菌活性成分的提取工艺          下载免费PDF全文

邓恒为  郭伟良  孙晓飞  谢珍玉  王世锋  胡文婷  周永灿 《渔业科学进展》2014,35(4):132-140

在单因素提取工艺优化的基础上,选取液料比、浸润时间、提取时间和提取温度进行四因素三水平的Box-behnken实验设计,并结合响应面分析法进一步优化丹参中抗无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,SA)活性成分提取工艺。优化所得最佳提取工艺为液料比37.8:1.0(ml:g)、浸润时间104 min、提取温度86.7℃、提取时间182 min。响应面模型预测在该提取工艺下抗SA活性成分提取得率极值为25.95%,经4次平行验证实验的实际提取得率为(25.87±0.03)%,为优化前的2.59倍,表明优化方法高效可靠。  相似文献   

溶藻弧菌诱导对三疣梭子蟹血淋巴非特异性免疫水平的影响     

谢建军  许文军  施慧  查智辉 《水产学报》2011,35(9):1392-1398

以平均体质量为(162±26)g雌性三疣梭子蟹为试验对象,注射组从游泳足第一关节基膜注射200 μL浓度为2.4×107 CFU/mL的溶藻弧菌菌悬液,对照组注射等量无菌生理盐水.各组在注射0、24、48、72、96h后随机取9只三疣梭子蟹,从游泳足基膜部位抽取血淋巴,测定血淋巴的血细胞总数、大颗粒细胞比例、血清蛋白、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、一氧化氮和诱导型一氧化氮合成酶等非特异性免疫指标.结果表明,遭受低剂量的溶藻弧菌侵袭后,三疣梭子蟹血细胞总数迅速降低(P＜0.05),与对照组相比降低36％,而大颗粒细胞比例则先上升(P＜0.05),72 h后恢复至正常水平;血清蛋白含量则无明显变化;血清中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性也迅速增加,并分别在24、72 h达到峰值(P＜0.01,P＜0.05),在96h后两种酶的活性均恢复至对照组水平;血清中一氧化氮含量及诱导型一氧化氮合成酶活性则稳步增加,并在96 h达到峰值(P＜0.01).研究证实低剂量的溶藻弧菌能刺激三疣梭子蟹调动血细胞、酸、碱性磷酸酶、一氧化氮合成酶系统进行免疫防御,但是各非特异性免疫指标大多具有明显的时间效应,响应速度有较大差异.  相似文献   

杀香鱼假单胞菌Ⅲ型分泌系统转录调控蛋白ExsA突变株的构建及其对大黄鱼的毒力特征分析     

张杰  郭海杰  高丽婷  毛芝娟 《水产学报》2017,41(4):613-621

杀香鱼假单胞菌是大黄鱼内脏白点病的致病菌,感染该菌常会导致养殖大黄鱼很高的死亡率和严重的经济损失。病原株NB2011编码典型的Ⅲ型分泌系统,可能是该菌重要的毒力因子,ExsA是控制此分泌系统表达的重要调控蛋白。为确认ExsA在NB2011致病过程中的作用,开发有效疫苗,实验采用双交换同源重组法构建了ExsA内部序列被卡那霉素基因替换的突变株,检测突变株与野生株对鼠巨噬细胞J774的黏附、内化和胞内增殖特性,并比较对大黄鱼的毒力变化,同时,通过透射电子显微镜观察人工感染后大黄鱼内脏组织的病理变化。研究表明,巨噬细胞对突变株的内化率降低,内化的细菌在12 h内被清除,野生株在内化后虽然一段时间内数量稍有下降,12~24 h期间数量急剧上升;突变株对大黄鱼的96 h LD_(50)为2.59×10~7/mL,比野生株高数百倍;电镜切片中未观察到组织内有菌体的存在,表明突变株的毒力明显减弱,可以作为弱毒疫苗的开发对象。  相似文献   

群体与单体养殖条件下三疣梭子蟹生长、消化酶与免疫酶活性的比较研究     

何杰  许文军  郑宽宽  谢建军  施慧  王庚申  汪玮 《水产科学》2017,(5):585-590

水温(27±3)℃下,将体质量为(2.18±0.14)g的三疣梭子蟹幼蟹以多只(10只)或单只的方式饲养在半径为50cm的圆形养殖桶中,比较群养与单养条件下三疣梭子蟹的生长特性、消化酶与免疫酶活性。结果显示:(1)群养组幼蟹在蜕壳后的软壳期间被同类捕食和残杀现象严重,死亡率和残疾率显著高于单养组幼蟹(P0.05);(2)两种养殖条件下幼蟹在夜间完成蜕壳的比例显著高于白天;群养组幼蟹在白天蜕壳的比例显著高于单养组(P0.05);(3)群养组幼蟹的蜕壳周期显著小于单养组(P0.05),但蜕壳同步率低于单养组,群养组幼蟹的体质量、甲宽增长率和特定生长率均略高于单养组,差异不显著;(4)群养组幼蟹肝胰腺和胃中的胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性均高于单养组,肝胰腺中最为明显;(5)群养组幼蟹肝胰腺和血淋巴中超氧化物歧化酶的活性显著高于单养组(P0.05),而两种养殖条件下幼蟹组织中的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性差异不显著。  相似文献   

海产蟹类血卵涡鞭虫病间接荧光抗体快速检测技术     

谢建军  许文军  施慧  徐汉祥  史海东  张静 《水产学报》2009,33(1):126-131

以寄生于三疣梭子蟹血淋巴中的血卵涡鞭虫虫体为抗原,制备了多克隆血清抗体。抗体经健康梭子蟹血淋巴吸附处理后,间接ELISA检测效价达7680。应用该抗体建立了血卵涡鞭虫的间接荧光抗体检测技术(IFAT)。采用常用显微镜检、PCR及 IFAT三种方法对采集的养殖青蟹、梭子蟹、及海捕梭子蟹等18个样本进行了检测。检测结果显示：常规显微镜检阳性检出率为33.3%,而IFAT及PCR检测阳性率77.8%,符合率达100%;阳性虫体被染上黄绿色荧光,而正常梭子蟹血细胞则未被染色;可检测到血卵涡鞭虫不同生活阶段的营养体、腰鞭孢子及合孢体阶段。本文为血卵涡鞭虫的流行病学调查及生活史研究提供了简便实用的方法。  相似文献   

辣椒疫病防治剂的室内筛选^*   总被引：1，自引：0，他引：1  

王进强  许文耀  吴刚 《云南农业大学学报(自然科学版)》2008,23(1):113-117

 用菌丝生长抑制法和孢子囊萌发抑制法分别测定了烯酰吗啉、氢氧化铜、王铜、甲霜灵、福美双、三乙膦酸铝、氨基寡糖素、霜霉威、百菌清、代森锰锌等10种杀菌剂对辣椒疫霉菌的毒力。结果表明,烯酰吗啉对辣椒疫霉菌菌丝生长的抑制效果最好,EC₅₀为1.06 μg/mL;氢氧化铜对孢子囊萌发的抑制效果最好,EC₅₀为1.68 μg/mL;代森锰锌对菌丝生长和孢子囊萌发也具有较好的抑制作用;霜霉威对辣椒疫霉菌的菌丝生长和孢子囊萌发几乎都没有抑制作用。对辣椒疫霉菌产孢子囊培养基的筛选结果为米糠琼脂培养基为最佳培养基,产孢子囊量最多且个体较大、均匀一致。  相似文献   

恩诺沙星诱导溶藻弧菌耐药和交叉耐药的研究     

张凯  张明明  谢曦  王蓉  胡文婷 《水产科学》2022,(3):452-458

自收集于海南海水养殖区域内的溶藻弧菌中筛选恩诺沙星敏感株,在含亚抑菌质量浓度恩诺沙星的培养基上进行质量浓度递增法体外诱导,探究耐药性的发生状况,比较诱导耐药前后诱导菌对诱导药物和6种非诱导药物的最小抑菌质量浓度,并在不含药物的培养基上连续传代考察诱导后的耐药株遗传稳定性.试验结果表明,30株养殖源溶藻弧菌中筛选出24株...  相似文献   

茶乡凤庆春茶上市     

许文舟 《广东茶业》2008,(2):30-33

伴着迟来的春风,新茶的芽叶在经过霜雪洗礼的树枝悄然萌动。今年的新茶由于雪灾的原因,是有些迟,但在云南省凤庆县茶乡,3月8日春茶收购开称。尽管开称的鞭炮已经响过,但笔者有意到安石走访,发现所有的茶园还都处于春茶开采前的沉默,有些茶农耐不住已步人茶园,开摘着茶树上春天的讯息,但更多的茶园还在沉默之中。  相似文献   

谈喷射护坡绿化技术   总被引：26，自引：4，他引：22  

叶建军  周明涛  许文年 《水土保持研究》2004,11(2):194-197

喷射护坡绿化方法是近年来传入我国的新技术,具有机械化程度高、生产能力大的优点,在短短几年时间里,迅速推广应用。首先回顾了喷射护坡绿化方法的发展历程,对其进行了归纳总结,随后根据喷射混合料的状态、配方以及与其他绿化方法和材料配合情况探索了喷射护坡绿化技术的分类,同时规范了喷射护坡绿化技术专业术语。  相似文献   

"塔菊"的栽培方法     

许文涛  吕巧岚 《河北林业科技》2004,(6):52-52

<正>"塔菊"是一种艺菊栽培形式,用植株高大、茎杆粗壮、生长迅速的黄蒿作砧木,在其侧枝枝头上采用切接或劈接法嫁接上大菊系菊花的枝梢,通过裱扎,从而培育出3m以上高度的塔状菊花。如果在一棵蒿子上嫁接几种不同花色的大菊,则能构成五彩缤纷的景观,故而又叫什锦菊。  相似文献