蜡梅CpEXP1基因启动子的克隆及活性分析     

马婧  李政  陈信立  张升艳  眭顺照  李名扬 《林业科学》2018,(3)

【目的】细胞扩展蛋白(EXP)作为植物细胞壁的重要组成部分,参与种子萌发、营养器官发育、果实成熟、器官脱落、植物抗逆等植物生长发育过程中的多个环节。通过研究蜡梅细胞扩展蛋白基因CpEXP1启动子活性功能,为研究CpEXP1基因在蜡梅生长发育过程中的功能提供理论依据。【方法】以蜡梅‘磬口素心’为材料,通过hi-TAIL PCR法从蜡梅基因组DNA中克隆CpEXP1基因上游调控序列,利用生物信息学软件,分析CpEXP1基因启动子序列中潜在的顺式调控元件。构建该基因与GUS报告基因融合的植物表达载体,利用农杆菌介导的叶盘法在烟草叶片中进行启动子活性的瞬时表达研究,并进一步利用花序侵染法在拟南芥中进行稳定表达,利用GUS组织化学染色和GUS报告基因的实时荧光定量PCR检测,分析CpEXP1基因启动子的活性。【结果】获得了长度为2 485 bp的蜡梅细胞扩展蛋白基因CpEXP1上游调控序列(GenBank Accession:MG452931),序列分析表明该启动子中除含有核心元件TATA-box和CAAT-box外,还包含多个与植物非生物胁迫及组织特异表达相关的顺式作用元件。在烟草中的瞬时表达分析表明该启动子具备驱动报告基因GUS表达的功能。进一步对转基因拟南芥植株的GUS组织化学染色和GUS基因表达分析结果显示,CpEXP1基因启动子在转基因拟南芥种子萌发初期活性较强,在子叶以及幼苗真叶中未检测到GUS活性;在花和根中活性较弱;在成熟叶片中可以检测到GUS活性,特别是在衰老叶片叶柄脱落区表达强烈。此外,该启动子在幼果中具有较强活性,随后启动活性逐渐下降,成熟果荚中仅在果柄脱落处能够检测到GUS活性。同时,转基因拟南芥植株中的CpEXP1基因启动子活性受高温(42℃)、低温(4℃)和水杨酸(SA)诱导,特别是对低温胁迫响应强烈,在4℃低温处理后,转基因拟南芥叶片中GUS基因的表达量是处理前的的8.7倍。【结论】CpEXP1基因启动子在转基因拟南芥不同发育阶段、不同器官中的活性具有明显差异,推测该启动子可能在种子发芽、叶片脱落以及果实脱落中发挥作用,同时CpEXP1基因启动子活性可被不同非生物胁迫诱导,可能参与植物抵御非生物胁迫的调控途径。  相似文献   

超高压杀菌处理冷破碎猕猴桃果浆的条件优化及其贮藏期杀菌效果   总被引：4，自引：2，他引：2  

杨天歌  邓红  李涵  孟永宏  雷佳蕾  马婧  郭玉蓉 《中国农业科学》2018,51(7):1368-1377

【目的】研究‘海沃德’猕猴桃冷破碎果浆的超高压杀菌最优条件及超高压处理后果浆贮藏过程中的杀菌效果,为猕猴桃的非热加工及产品开发提供参考。【方法】采用冷破碎技术设备获得猕猴桃纯果肉果浆,以菌落总数、VC、褐变度等为评价指标,利用响应面分析建立模型,得到超高压杀菌最优工艺条件;利用微生物学方法,研究超高压处理的果浆在4℃、-20℃下贮藏期菌落总数、霉菌酵母和大肠杆菌的变化。【结果】通过单因素试验和Box-Behnken模型响应曲面分析获得超高压杀菌的最佳条件为压力497 MPa,温度27℃,保压时间24 min;在此条件下超高压处理对果浆的菌落总数、大肠杆菌、霉菌酵母杀菌率分别达到73.18%、97.46%、100.00%。超高压杀菌的冷破碎果浆于4℃、-20℃下贮藏6周、14周,在符合标准范围内菌落总数的增量较大,与贮藏第1天相比分别达到97.19%、85.98%,但菌落总数增长速度不大;而果浆中的霉菌酵母、大肠杆菌的增量相对较少,且增殖也较慢;果浆中的霉菌酵母、大肠杆菌仅分别为1.36、0.67和0.32、0.35 lg（CFU/mL)。【结论】超高压处理作为一种非热杀菌方式对热敏性的猕猴桃果浆有较好的杀菌效果。冷破碎果浆作为猕猴桃加工的中间原料在超高压处理后于-20℃下贮藏14周依然符合商业无菌要求,因此低温贮藏与超高压杀菌结合有利于冷破碎果浆的贮藏和进一步加工利用。  相似文献   

四种肥胖动物造模方法的比较   总被引：6，自引：0，他引：6  

申瑞玲  马婧 《动物医学进展》2007,28(3):105-108

肥胖症是遗传因素与环境因素共同作用所导致的营养代谢障碍性疾病,是慢性疾病发生的主要诱因.随着世界上许多国家工业化和城市化程度的不断加深,肥胖症的发病率和死亡率也不断升高,预防和治疗肥胖症已经成为21世纪的重要健康问题.为了确定引起肥胖的各种关键基因,并对其分子生物学机制进行深入的研究,肥胖动物模型是必不可少的研究对象.文章结合国内外研究进展综述了高脂肪饲料、下丘脑腹内侧核损伤、双侧卵巢切除法以及大量维生素D诱导等四种肥胖动物模型的造模特点、构建方法及造模成功判定的标准,为科研工作者今后在开展肥胖症相关实验研究和前期使用和选择肥胖动物模型提供参考.  相似文献   

开放教育融入陕西乡村文化振兴路径研究     

马婧  窦欣  于军 《农村经济与科技》2023,(12):284-287

为了使开放教育能够为乡村文化振兴提供教育和服务，有效促进乡村文化振兴。以陕西地区为例，介绍了陕西省地域经济文化差异以及开放教育融入陕西乡村文化振兴研究技术路线，分析研究了乡村文化振兴的路径：立足农民需求，精准送课下乡；贴合地域特点，量身打造乡村人才振兴计划；扶志扶智，推进乡村振兴良性化发展。提出了开放教育助力乡村文化振兴的相关建议。  相似文献   

转色期叶果比对果桑¹³C同化物分配及果实品质的影响     

赵珮  夏鹰  何佳洋  吴均  马婧秋  黄传书 《蚕业科学》2023,(1):1-7

以果叶兼用桑树品种中桑5801号为试材，在田间调查叶果比的基础上，采用¹³C同位素标记技术，研究桑果转色期不同叶果比对桑叶光合作用、糖代谢、¹³C同化物分配和果实品质的影响。结果表明：疏叶后10 d桑果处于盛熟期，适度疏叶提高了叶片叶绿素含量、中部叶位叶片的净光合速率(P_n)和蔗糖含量；疏叶后20 d挂果量骤减，叶片叶绿素含量、P_n和蔗糖含量均大幅度下降。¹³C同化物输出量比率和果实¹³C含量随叶果比下降先增加后降低，均以T2处理组(叶果比0.6)最大。除了T1组(叶果比0.4),其余处理组的果实综合品质均较好。研究表明，在桑果转色期适度疏叶使得树冠微环境良好，透光透风，能够有效提高光合同化物向果实的转运效率和转运量，保证良好的果实品质。  相似文献