不同联合激活方法对牛体细胞核移植胚胎体外发育的影响     

杨洪武  齐晓龙  熊善辉  倪和民  刘云海  郭勇  杨佐君 《中国农学通报》2015,31(11):59-62

为摸索牛体细胞核移植最优的联合激活方法,利用体外成熟22~24h的去核卵母细胞作为受体细胞质,牛耳部成纤维细胞作为供体细胞,注射到透明带间隙。在电融合参数为电场强度25N/C,脉冲宽度10μs,2次脉冲的融合条件下,对不同联合化学激活方式进行比较。结果显示在电融合参数不变的条件下,6-DMAP+CB的激活方式,融合率最高但差异不显著,后期发育的卵裂率(74.1%)和囊胚率(27.8%)也最高。笔者初步得到了较适合牛体细胞核移植的联合激活方法,为今后牛的体细胞核移植胚胎的发育和研究奠定了基础。  相似文献   

GDF9与BMP15在绵羊腔前卵泡及卵母细胞体外成熟过程中的差异表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

张帆  倪和民  马欣  杨洪武  刘云海  郭勇  杨佐君 《中国农学通报》2014,30(35):35-41

为了探讨GDF9与BMP15在绵羊腔前卵泡发育及卵母细胞体外成熟过程中的作用,运用腔前卵泡的显微分离方法和RT-PCR技术,检测了GDF9、BMP15 mRNA在绵羊腔前卵泡及卵母细胞体外成熟过程中(0、8、16、24 h)的相对表达丰度。结果表明：绵羊COCs在体外培养的不同时期,卵丘细胞扩展呈现不同的形态学变化;腔前卵泡中GDF9、BMP15 mRNA表达量均低于体外成熟不同时期卵母细胞,且腔前卵泡中GDF9 mRNA表达量显著低于体外成熟不同时期卵母细胞。揭示GDF9和BMP15对卵巢卵泡发育和卵母细胞体外成熟发挥重要作用,在绵羊卵母细胞体外成熟过程中,这2个因子可能是独立或协同地影响卵丘细胞增殖扩散。  相似文献   

PGI2对缺少内源性PGs的绵羊早期胚胎体外发育的影响     

李贺娟  秦国嵩  齐晓龙  盛熙晖  刘云海  郭勇  倪和民 《中国畜牧兽医》2016,43(11):3019-3023

试验旨在探讨添加外源Iloprost（PGI₂的稳定类似物）对缺少内源性前列腺素（PGs）的绵羊早期胚胎体外发育的影响。常规体外受精,通过在体外培养液中单独或联合添加前列腺素合成限速酶COX-1和COX-2的特异性抑制剂SC560和NS398,观察COX-1和COX-2对绵羊早期受精胚胎体外发育的影响。添加抑制剂NS398后,再协同添加不同浓度Iloprost,观察PGI₂对绵羊早期体外胚胎发育的具体作用,并对孵化囊胚的细胞数进行分析。结果显示,在卵裂率和囊胚率方面,单独添加NS398与同时添加SC560和NS398组间差异不显著（P>0.05）,而与对照组间差异显著（P<0.05）。添加NS398后,再添加不同浓度的外源性Iloprost可代替胚胎内源性PGI₂的作用,基本消除COX-2抑制剂对绵羊早期胚胎体外发育的不利影响。Iloprost的浓度以1×10^-6 mol/L为宜,H33342染色结果差异不显著（P>0.05）。本试验结果表明,胚胎内源性COX-2对绵羊早期胚胎中PGI₂的合成起主要调控作用。外源添加Iloprost可补偿胚胎内源性PGI₂的缺失作用,解除NS398对COX-2的特异性抑制作用,最终促进绵羊早期胚胎的体外发育。  相似文献   

胚胎的冷冻保存     

S.P.Leibo  刘云海 《中国畜牧兽医》1988,(5)

引言哺乳动物胚胎的冷冻保存方法已在实验动物(小鼠、大鼠、兔、仓鼠)、家畜(牛、绵羊、山羊、马)、非家畜动物(羚羊、猴、狒狒)和人获得成功。虽然不同种类动物所用冷冻程序的细节稍有不同,但是都包含五个基本步骤:1.将胚胎置于冷冻保护剂中,2.将胚胎降温到相当低的零下温度,3.贮存,几乎都是贮存在-196℃的液氮  相似文献