反刍月形单胞菌乙酸生成缺陷株的构建及相关酶活性分析     

苑学  孙国权  逢晓阳  刘国文  王哲 《安徽农业科学》2011,39(25):15390-15392,15394

[目的]构建反刍月形单胞菌乙酸生成的缺陷株并分析其发酵特性。[方法]应用转座子标签法,通过转座子供体菌E.coliS17-1/pZJ25∷Tn5对受体菌反刍月形单胞菌进行转座子诱变,采用含卡那霉素和氟乙酸纳的选择性培养基筛选接合子。[结果]共筛选出稳定的对卡那霉素和氟乙酸具有抗性的转座工程菌7株。对反刍月形单胞菌的突变株进行16S rRNA鉴定和Tn5的PCR鉴定,及乙酸激酶（AK）和磷酸乙酰转移酶（PTA）酶比活力分析,确定突变株属于pta基因缺失型氟乙酸抗性菌株。[结论]该研究为进一步研究反刍兽瘤胃微生物乙酸的细胞代谢网络和调控奠定基础。  相似文献   

TAT-NPY融合蛋白的表达和生物活性检测     

费东亮张才  刘国文王哲 《中国农学通报》2012,28(17):101-104

摘 要：为了研究含有跨膜结构域TAT基因的重组奶牛神经肽Y融合蛋白的生物学活性。利用基因工程技术,在牛神经肽Y基因序列中插入TAT蛋白基因序列,构建原核表达载体pGEX-3X-NPY-PTD,导入到BL21宿主菌中,进行表达,对表达产物进行鉴定、表达条件优化和纯化。并且经过活性检测,融合蛋白对鸡胚血管生成的促进作用,表明含有PTD结构的重组奶牛神经肽Y具有生物功能活性,为动物试验奠定了基础。为了获得重组TAT-NPY融合蛋白,并研究其生物学活性。利用基因工程技术,从犊牛下丘脑组织中克隆得到神经肽Y基因序列,通过基因比对符合率为100%。同时,在牛神经肽Y基因序列中插入TAT蛋白基因序列,构建原核表达载体pGEX-3X-NPY-PTD,导入到BL21宿主菌中,进行原核表达,并对表达产物进行鉴定、表达条件优化和纯化。并且经过活性检测,融合蛋白对鸡胚血管生成起促进作用。表明含有PTD结构的重组奶牛神经肽Y具有生物功能活性,为下一步的研究提供了物质基础。  相似文献   

短截花穗对“大红袍”荔枝坐果的效果分析     

李于兴  刘海艳  李景明  刘国文  向旭 《热带作物学报》2010,30(9):45-48

针对‘大红袍’荔枝幼青树开展短截花穗的效果分析,在荔枝主产区合江、江阳区进行不同短截时间和短截程度的对比试验。结果显示：在相同的气候和地理条件下,2次短截花穗并留7 cm左右穗长有利于改善花穗结构,提高坐果率,丰产稳产效果明显。  相似文献   

草鱼细菌性烂鳃病病原菌的分离鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘国文 《贵州农业科学》2010,38(9)

为弄清草鱼烂鳃病的致病病原,采用临床诊断初步观察了病鱼的典型症状,并利用生化试验与免疫学检测方法对草鱼烂鳃病病原菌进行了分离鉴定.结果表明:病鱼常离群独游,食欲减退,体色发黑,头部乌黑,鳃丝及鳃盖腐烂,初步判定疾病为细菌性烂鳃病;菌落革兰氏染色呈阴性,明胶液化试验、酪素水解试验、硝酸盐还原试验、过氧化氢酶试验和硫化氢试验呈阳性,淀粉水解试验、七叶灵水解试验、几丁质分解试验、分解纤维素试验、酪氨酸水解试验、靛基质试验、枸橼酸盐利用试验和葡萄糖利用产气试验呈阴性;免疫学检测,涂片上有棕色细长颗粒,颗粒大小与杆菌一致.草鱼烂鳃病的致病病原为柱状噬纤维细菌.  相似文献   

羔羊腹泻有效的防治措施     

刘国文  李海燕  刘亚红 《中国畜禽种业》2013,(11):55-55

羔羊腹泻是常发病,其主要特征是羔羊出现不同程度的拉稀、下痢。该病发病率和死亡率都很高,特别是1~3周以内的羔羊发病率尤为严重,严重影响养羊业的发展。现将有效防治措施予以简介。  相似文献   

不同培养基对PK15细胞增殖影响的研究   总被引：1，自引：1，他引：1  

付世新  李晓龙  王长远  刘国文 《黑龙江八一农垦大学学报》2004,16(1):62-64

采用无血清液体培养基、DMEM培养基和MEM培养基进行PK15细胞的培养，观察细胞增殖及传代效果，确定无血清液体培养基的营养功能。结果表明：无血清液体培养基只能维持第一代细胞的生长，不能用于第二代后的培养，效果不如DMEM、MEM培养基，且差异显著。  相似文献   

亚临床酮病奶牛血液部分生化指标代谢水平研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

张志刚  李小兵  刘国文  孙国权  王哲  郭昌明  高瑞峰  潘志忠 《中国农学通报》2008,24(6):1-3

酮病是高产奶牛的一种重要的营养代谢病.本研究采用酮粉法、试剂盒法分别对60头奶牛乳汁β-羟丁酸、血液β-羟丁酸、血液葡萄糖和非酯化脂肪酸含量进行检测,以血清β-羟丁酸含量1200μmol/L作为健康奶牛和亚临床酮病奶牛的诊断标准.结果显示健康奶牛和酮病牛血液β-羟丁酸含量分别为509±43μmol/L和2348±127μmol/L,差异显著(P<0.05);血液葡萄糖含量分别为3.94±0.17mmol/L和3.18±0.06mmol/L,差异显著(P<0.05);血液非酯化脂肪酸含量分别为543.4±106μmol/L和315.5±103μmol/L,差异显著(P<0.05).酮病牛的血液葡萄糖、非酯化脂肪酸与血液β-羟丁酸含量呈负相关.  相似文献   

牛旁检测诊断产后初期奶牛亚临床酮病研究     

张志刚  刘国文  李小兵  孙国权  王哲  郭昌明  高瑞峰 《勤云标准版测试》2008,(8)

 酮病是奶牛的一种重要的营养代谢病。采用酮粉法、尿液分析试纸条、乳汁分析试纸条、试剂盒法分别对乳酮、尿酮和血酮含量进行检测,以血清β-羟丁酸含量1200μmol/L作为健康奶牛和亚临床酮病奶牛的诊断标准。乳汁检测试纸条和尿液分析试纸条的诊断标准分别为200μmol/L和15mg/dl（1470μmol/L）。酮病牛血清β-羟丁酸和葡萄糖的浓度分别为726±43μmol/L、3.42±0.05mmol/L,健康牛血清β-羟丁酸和葡萄糖的浓度分别为2563±238μmol/L、2.78±0.07mmol/L,差异显著（P<0.05）。乳汁分析试纸条的敏感性和特异性分别为67%和92%,尿液分析试纸条的敏感性和特异性分别为57%和85%,酮粉的敏感性和特异性的敏感性和特异性分别为60%和94%。使用乳汁分析试纸条牛旁检测是一种有效的奶牛亚临床酮病诊断方法。  相似文献   

马尾松人工林林分出材率表的研制   总被引：9，自引：5，他引：4  

江希钿  林文龙  刘玉明  林孝强  陈杜满  刘国文 《福建林学院学报》2000,20(3):215-218

提出了林分材种出材率表研制的基本原理和方法 ,采用现场实际造材样木建立了单株二元材种出材率模型 ,配合二元材积方程、 Weibull分布、相对树高曲线模型 ,编制了马尾松人工林林分出材率表  相似文献   

“消炎神”防治家畜葡萄球菌病的试验     

马青山  孙太福  刘国文  李玉珍  孙德信  郑晓娟 《今日畜牧兽医》1996,(Z1)

猪、狗、海狸鼠等家畜葡萄球菌病在迁安县已有多年发病史,各种家畜有多种表现形态,过去病源不清,国内报道较少,到1991年我们查清了病源。其发病率为8%左右,多雨季节可达40—50％,有些村达70—80％;而应用敏感抗菌素,治愈率不足80％,且疗程长、花费大,治愈后的仔猪生长缓慢。为克服以上弊端,我们于  相似文献