沙门菌PhoN蛋白单克隆抗体及其免疫磁珠的制备     

孟闯  高杨  刘钧  徐双媛  丁睿清  康喜龙  潘志明  焦新安 《中国预防兽医学报》2023,(3):287-294

为制备针对沙门菌Pho N蛋白的单克隆抗体(MAb)，并以其制备沙门菌的免疫磁珠，本研究构建了重组原核表达质粒p Cold I-pho N和p GEX-6P-1-pho N，利用大肠杆菌系统表达并通过亲和层析纯化了鼠伤寒沙门菌重组蛋白His-Pho N和GST-Pho N，分别作为免疫原和筛选抗原，利用B淋巴细胞杂交瘤技术，经间接ELISA方法筛选获得5株能稳定分泌Pho N蛋白MAb的杂交瘤细胞株，分别为8H2、11E5、4B2、8F2、3B2。采用亚类鉴定试剂盒、间接ELISA和western blot方法分别鉴定各MAb的亚型、效价及特异性结合沙门菌Pho N蛋白的能力，结果显示，5株MAb的亚型均为Ig G2a，测定其效价达1∶4 096 000以上，均能特异性结合His-PhoN和GST-Pho N，而不与His-OmpC、His-OmpF蛋白反应，表明MAb特异性较好。选取4B2 MAb进一步分析其对不同血清型沙门菌和非沙门菌的特异性，western blot结果显示4B2 MAb仅特异性识别不同血清型沙门菌，而不与大肠杆菌、志贺杆菌、空肠弯曲菌和单核细胞增生李斯特菌反应；...  相似文献   

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非正智①  刘正伟  ② 《现代农业科技》2022,(4)

调研牟定耕地数量与质量等级划分现状，选定区域和土种建立耕地质量监测点35个，监测耕地土壤的理化性状、环境质量、作物种类、作物产量、施肥量等有关参数变化；采取规范化监测管理措施，完善基础数据，落实经费，开展田间肥料试验，加强数据分析应用，提出牟定县耕地质量提升与保护对策措施。  相似文献