蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因的克隆与其在乳酸菌中的表达     

高云航  张喜宏  王巍  葛铮  历娜  娄玉杰  马红霞 《上海交通大学学报(农业科学版)》2015,(2):34-38

全球每年可产生的纤维素数量庞大。为了探索纤维素资源,更为科学合理的利用纤维素类饲料提供理论依据,根据蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因序列设计1对特异性引物,扩增纤维素酶(Cell)基因,获得片段大小约为1 269bp的目的基因。该基因与Bacillus cereus B4264、Bacillus cereus G9842纤维素酶基因序列同源性分别达96%和95%。将Cell基因与乳酸乳球菌表达载体pNZ8149进行连接,电转化入乳酸菌NZ3900中,构建纤维素高效分解基因工程乳酸菌,经乳链菌肽(Nisin)诱导表达,SDS-PAGE分析得到分子量大小约为42kDa的目的片段。刚果红平板验证该表达蛋白具有纤维分解活性。FPA法测定表达产物酶活力为0.57U/mL。该基因的成功表达,对纤维素基因工程菌的相关研究具有指导意义。  相似文献   

高效降胆固醇植物乳杆菌的筛选及其益生潜能初探     

周海柱  高云航  郭玮  勾长龙  陶大鹏  娄玉杰 《中国农业大学学报》2018,23(2):36-42

为筛选出高效降胆固醇乳杆菌,挖掘其潜在益生功能,从民间自制泡菜样品中分离乳杆菌,采用邻苯二甲醛法筛选高效降胆固醇菌株,利用16S rDNA进行分子生物学鉴定,并通过耐酸、耐胆盐及抑菌性实验,测定菌株的益生潜能。结果表明:1)从分离出的11株乳杆菌中筛选出PL2、PL5、PL16和PL194等4株高效降解胆固醇菌株,其体外胆固醇降解率分别为48.22%、51.67%、48.43%和48.56%;2)结合菌落特征、部分生理生化试验及16S rDNA基因序列比对鉴定4株乳酸菌均为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);3)该4株乳酸菌均可在pH2.0的环境下生存3h,菌株PL2和PL5可以在0.3%的胆盐浓度下存活3h;4)菌株PL5对致病性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和福氏志贺氏菌均有显著的抑制作用。总之,植物乳杆菌PL5是具有开发前景的高效降胆固醇益生菌。  相似文献   

鸡蛋胆固醇含量测定方法比较研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴超  李润航  于中英  娄玉杰 《家畜生态》2013,(11):57-60

试验随机选取了中华绿蛋鸡产的绿壳蛋和依莎褐蛋鸡产的褐壳鸡蛋各20枚,采用邻苯二甲醛分光光度计比色法和气相色谱法,测定鸡蛋中胆固醇的含量,比较两种方法在测定鸡蛋胆固醇含量上的差异。结果表明,用邻苯二甲醛比色法测得褐壳蛋蛋黄胆固醇含量176．79mg／枚,浓度为13．35mg／g。用气相色谱法测得胆固醇含量142．74mg／枚,浓度为9．69mg／g,二种方法测定的结果差异显著（P〈0．05）。用邻苯二甲醛比色法测得绿壳蛋蛋黄胆固醇含量158．12mg／枚,浓度为10．65mg／g。用气相色谱法测得胆固醇含量128．70mg／枚,浓度为8．54mg／g,二种方法测定的结果差异显著（P〈0．05）。  相似文献   

添加海藻提取物对育肥牛蛋白质消化率的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

郝凤奇  尹航  李冠桥  娄玉杰 《饲料与畜牧》2008,(1):44-45

该试验研究了海藻提取物对育肥牛饲粮蛋白质消化率的影响。选取健康的杂种（西×本）育肥牛30头,体重为480kg13.01kg,随机分成3组,试验期为30d,采用内源指示剂和外源指示剂法测定供试牛对饲粮蛋白质的消化率。结果表明,添加海藻提取物可以提高育肥牛对饲粮蛋白质的消化率,与对照组相比差异显著（P〈0.05）。  相似文献   

酸性纤维素酶CBH Ⅱ基因与非抗性穿梭表达载体的重组及在乳酸杆菌的表达及其活性检测   总被引：3，自引：0，他引：3  

赵莹  孙哲  刘燕  胡后银  陈大芳  娄玉杰  张宏福 《畜牧兽医学报》2009,40(5)

以SmaI和SphI双酶切pMD18-T-CBHⅡ和以胸苷酸合成酶基因（thymidylate synthase,thyA）为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,胶回收酸性纤维素酶CBHⅡ基因和载体大片段,并将纯化的CBHⅡ基因和表达载体pW425t大片段进行连接,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-CBHⅡ。将pW425t-CBHⅡ转化至thyA基因缺陷型的乳酸杆菌感受态细胞中,通过质粒提取、酶切鉴定、PCR鉴定、测序分析和生长功能弥补筛选阳性克隆。SDS-PAGE分析,可见约49.6 ku的蛋白,并且刚果红染色显示重组乳酸杆菌可产生明显的水解圈。  相似文献   

猪腹泻性疾病的归纳和分析     

吴立君 《福建畜牧兽医》2023,(1):55-57

猪腹泻性疾病是生猪养殖中常见的疾病，严重影响生猪养殖业发展。基于此，该文从猪常见腹泻性病发生的原因、临床症状、病理变化展开叙述，并就猪腹泻性疾病的防治提出综合性建议，对促进养猪业健康稳定发展具有重要意义。  相似文献