CRISPR/Cas9基因编辑技术在作物中的应用     

林萌萌  李春娟  闫彩霞  孙全喜  赵小波  王娟  苑翠玲  单世华 《核农学报》2021,35(6):1329-1339

CRISPR/Cas9是由小导向RNA介导的基因组定向编辑技术。自2005年以来,该技术得到飞速发展,在生物学、医学和作物遗传育种等多个学科得到广泛应用。与以往的大范围核酸酶、锌指核酸酶(ZFNs)及类转录激活因子效应物核酸酶(TALENs)相比,CRISPR/Cas9技术具有独特的优越性,以其简便的操作和极高的编辑效率成为目前最主要的基因编辑技术。本文系统阐述了CRISPR/Cas9技术的起源发展、基因编辑特点,总结了该技术在作物基因编辑和其他方面的应用,旨在为利用该技术进行农作物种质创新、基因挖掘和育种提供参考。  相似文献   

超长链多不饱和脂肪酸在棉花中的异源合成   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘江  马燕斌  孙全喜  吴霞  李雪滢  孙美红 《作物学报》2014,40(1):86-92

从球等鞭金藻、眼虫、高山被孢霉和拟南芥中分别克隆到Δ9链延长酶、Δ8去饱和酶、Δ5去饱和酶和Δ15去饱和酶基因,利用我们的多基因聚合方法,将这4个基因聚合到植物表达载体pCambia2300上,其中每个基因都含有独立的CaMV35S启动子和Tnos终止子。利用农杆菌介导法将该表达载体转入棉花,通过卡纳霉素和PCR筛选获得转基因阳性植株,提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸,用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA,20:5Δ5,8,11,14,17)含量分别达1.0%和5.0%。表明通过基因代谢工程在棉花中异源合成EPA是可行的,为进一步在棉籽中生产VLCPUFAs奠定了基础。  相似文献   

利用InDel标记解析中国花生地方品种的遗传多样性与群体结构     

刘宇  李春娟  石大川  闫彩霞  赵小波  孔青  孙全喜  苑翠玲  王娟  单世华 《中国油料作物学报》2020,42(5):743

为揭示InDel标记对我国地方花生品种遗传多样性和遗传结构的解析能力,本研究利用13个多态性InDel 标记检测4个典型生物学类型的90份中国花生地方品种材料。共扩增出42的等位基因,平均3个;Nei’s多样性指数 变幅为0.011~0.705,平均0.443;Shannon’s信息指数变幅为0.034~1.497,平均0.758。龙生型、普通型、珍珠豆型与多 粒型花生的Nei’s遗传多样性指数分别为0.3198、0.4407、0.4435和0.4372,结果表明龙生型的遗传多样性明显小于其 它生物学类型。种质间的遗传相似系数范围为0.077 ~ 1.000,平均为0.636;且普通型与龙生型花生之间遗传相似系 数最高,为0.636。群体分析结果表明密枝亚种与疏枝亚种、不同植物学类型之间遗传分化较小,且普通型与珍珠豆 型遗传结构相似,龙生型与多粒型花生遗传结构不同。利用非加权平均法（UMPGA）聚类分析将90份花生材料划分 为两类（G1、G2）,其中G1包括全部的龙生型、61.90%的普通型以及20.00%的珍珠豆型。本研究结果表明InDel标记 能够有效地揭示栽培种花生的遗传变异,可为花生杂交亲本的选择以及优异基因的挖掘提供重要参考。  相似文献   

花生栽培种InDel有效标记筛选与评估     

刘宇  闫彩霞  李春娟  徐洪明  孔青  孙全喜  王娟  单世华 《核农学报》2020,34(2):256-264

为获得花生栽培种中有效的InDel标记,本研究基于花生简化基因组检测到的InDel信息,经PCR扩增以及电泳检测验证引物的有效性与多态性,利用生物统计学软件检测InDel标记的多态性水平。结果表明,在花生基因组上设计的39对引物在覆盖4个植物学类型的21份花生中均可获得扩增产物,其中14对引物具有多态性,为总引物数的35.9%,有3对引物位于基因编码区;Shannon指数为0.191 4~1.295 1,均值为0.579 4;多态性信息量(PIC)为0.090 7~0.674 6,均值为0.349 6。本研究筛选获得的InDeI标记可为花生栽培种遗传图谱构建和分子标记辅助育种提供有效的遗传标记。  相似文献   

花生果柄脱落特性的研究     

王传堂  祁雪  刘婷  王志伟  唐月异  孙全喜  王秀贞  吴琪  邵俊飞  杨同荣 《花生学报》2017,46(1)

对58个花生新品系进行了果柄强度测定和断裂点统计。选出16L10、16L11、16L13、16L34、16S1等花生新品系,不仅果柄强度较高,而且荚果自植株上脱离时不带果柄,为选育适合机械化收获与加工的花生品种奠定了基础。  相似文献   

利用AhMITE转座子分子标记鉴定花生杂交F_1代真假杂种     

吴琪  曹广英  尹亮  唐月异  王秀贞  孙全喜  王志伟  吴昌湛  彭娅萍  王传堂 《花生学报》2017,46(3)

本研究以抗青枯病北方大花生栽培品种"日花1号"为父本,山东省花生研究所生物技术研究室选育的高油酸花生品种"花育963"以及高产品种"玫瑰红"、"14VS-13"、"花育33"、"花育50"、"14L123"为母本杂交获得的F_1代种子为材料,利用微型反向重复转座元件(miniature inverted-repeat transposable element,MITE)标记技术鉴定F_1代真杂种。从10对AhMITE引物中筛选出6对在杂交亲本中有清晰、稳定并具有明显差异条带的标记引物对F_1代进行杂种鉴定。每一个组合都使用两对AhMITE引物进行鉴定,实验结果相互印证,保证了结果的准确性。  相似文献   

自然老化对高油酸花生种用品质的影响     

张青云  王传堂  唐月异  王秀贞  吴琪  孙全喜  张建成  胡东青  于树涛 《花生学报》2016,(2):21-26

普通花生含油量高,在自然温度下易快速劣变丧失种子活力.这是我国北方仅上年或上一季花生而我国南方仅秋花生来年可做种的原因.本研究首次证实,高油酸花生经过19个月自然条件下贮藏,在多数种用特性上不差于上年收获的花生.所有参试的3个高油酸品种,其2013年种子与2014年种子在第7天的发芽率和田间出苗率均无显著差异.由此证明,高油酸品种不仅有利于健康,能延长制品货架期,而且可保持种子活力.  相似文献   

34份花生种质休眠性筛选与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

曲博  关淑艳  王秀贞  吴琪  孙全喜  张建成  唐月异  王丕武 《花生学报》2014,(2):50-54

利用日晒干燥的34份花生种质进行发芽试验,初步筛选出2份休眠性差别明显的材料即休眠性强的y-1和缺乏休眠性的x-166。次年将这两份材料种植于田间,收获后在遮荫处干燥,进行萌发试验,其休眠性得到进一步确认。  相似文献   

花生Argonaute 基因家族全基因组鉴定与表达模式分析     

陆晓东  李春娟  张浩  孙全喜  闫彩霞  赵小波  王娟  苑翠玲  单世华 《中国油料作物学报》2020,42(5):767

AGO蛋白（Argonaute protein）是RNA诱导沉默复合体的关键组分,在植物生长发育中发挥重要作用。花 生基因组测序的完成为全基因组水平上分析AGO抗病基因提供了条件。利用AGO蛋白的保守域在花生基因组数 据库与NCBI中进行同源比对,鉴定得到花生AGO 基因家族所有成员。我们基于生物信息学对AGO蛋白家族的进 化关系、理化性质、染色体定位、基因结构、结构域、不同组织中和胁迫下的表达模式等进行分析。结果表明：试验 共鉴定得到51个花生AGO 基因,包括12个A.duranensis 基因,12个A.ipaensis 基因以及27个栽培种花生AGO 基因。 染色体定位分析结果显示这些基因不均匀地分布在花生染色体上,且A.duranensis 与A.ipaensis 基因组上有10对成 员存在较为明显的同源关系。表达模式分析表明AdAGO2、AiAGO4、AdAGO3、AiAGO7、AdAGO8、AiAGO8 基因在花生 22个组织中整体表达量偏高;而花生茎尖（Shoot Tip）与雄蕊（Stamens）中AGO 基因家族呈现较高表达量。本研究结 果为揭示AGO蛋白功能和发掘花生的抗逆育种靶向基因资源提供了一定的理论依据。  相似文献   

源于玉米幼苗的幼嫩叶段愈伤诱导及其植株再生的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈靖  孙全喜  马海珍  亓宝秀  李新征 《玉米科学》2012,20(1):39-43

以6个不同基因型的玉米自交系幼嫩叶段为外植体,研究其愈伤诱导、继代和分化过程。结果表明,3mg/L 2,4-D是诱导叶段愈伤组织较为适宜的,玉米愈伤组织的诱导及分化与基因型有密切关系。从供试的6个基因型中筛选出出愈率较高、愈伤组织形态较好的3个基因型齐319、Mo17、鲁原92,对它们的愈伤组织进行GUS瞬时表达检测表明,来源于幼苗叶段的愈伤组织GUS+转化率较高。  相似文献