小鼠胚胎分割方法及同卵双生试验   总被引：3，自引：0，他引：3  

张涌  钱菊汾  王建辰 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1987,(2):10-16

选择小鼠晚期桑椹胚和早期囊胚,采用下列方法进行分割:A、显微手术刀直接分割;B、酶消化透明带后分割;C、显微玻璃针去带分割;D 酶——机械去带分割。共分割277枚胚胎,分割成功264枚(95.3%)。将其中480枚半胚作体外培养,A,B,C,D 各组半胚发育到囊胚的发育率分别为65.7%(92/140)、54.2%(65/120)、63(63/100)、64.2%(77/120)。将用 A法分割的48枚半胚移植于12只受体鼠,结果有4只怀孕,共产11只半胚鼠,其中4对有同卵双生仔鼠。  相似文献   

不同核移植方法对牛体细胞核移植效率的影响   总被引：8，自引：0，他引：8  

李雪峰  王新庄  安志兴  李煜  郭继彤  张涌 《中国兽医学报》2003,23(4):400-402

以牛皮肤成纤维细胞为供体细胞,比较了电融合法和细胞质内注射法2种核移植方法对体细胞核移植效率的影响.电融合法构建重组胚的效率显著低于细胞质内注射法(47.1%比89.0%,P＜0.01);重组胚培养36 h后的裂卵率和培养8 d时囊胚发育率无明显差异(76.4%比73.2%,11.2%比12.3%;P＞0.05),但相对于操作的卵母细胞总数而言,电融合法得到的总囊胚发育率显著低于细胞质内注射法(5.6%比10.9%,P＜0.01).结果表明,用细胞质内注射法进行体细胞核移植效率更高.将发育到桑椹胚和囊胚期的95枚核移植胚胎移植到33头受体牛,其中31头受体牛在移植后第2个情期前返情;1头受体牛在移植后75 d返情,但未进行直肠检查,无法确定妊娠情况;1头受体牛在移植后60 d未见返情,直肠检查确证妊娠,93 d受体牛流产.胚胎移植结果表明,用细胞质内注射法构建的体细胞核移植胚胎至少可以维持早期妊娠.  相似文献   

金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A基因的克隆及其原核表达     

贺宽军  郭闯张涌 《中国兽医科技》2006,36(4):266-269

根据GenBank中纤连蛋白结合蛋白A基因（fnbA）序列设计了1对特异性引物，以金黄色葡萄球茵基因组DNA为模板，进行PCR扩增；结果获得了3600bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pGEM T easy载体中，成功地构建了克隆质粒pGEM—fnbA。以HindⅢ和XhoⅠ双酶切pGEM-fnbA和pET28a（＋），将纯化的基因fnbA亚克隆至pET28a（＋）中，构建了原核表达质粒pET28a-fnbA，并将其转化至E．coli BL21（DE3）感受态细胞中，经1mmol／LIPTG诱导和SDSPAGE分析，在约165ku处出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带。Western—blotting分析表明，该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。  相似文献   

牛乳腺上皮细胞的分离培养     

李吉霞  葛秀国  王文秀  张涌 《黑龙江畜牧兽医》2012,(7):4-6,174

为了对牛乳腺上皮细胞(MECs)进行分离、培养和鉴定,并研究细胞分泌功能,试验通过胶原酶消化法分离得到了牛乳腺上皮细胞,采用传代法对细胞进行纯化,对细胞标志蛋白进行免疫荧光染色鉴定,通过体外诱导和RT-PCR分析鉴定细胞的分泌功能。结果表明:分离到的牛乳腺上皮细胞具有典型乳腺上皮细胞的形态特征,表达广谱角蛋白,经诱导后可分泌β-酪蛋白。  相似文献   

人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响     

鲍珣  张拓  张涌 《中国畜牧兽医》2009,36(8)

利用包含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达载体pCI-neo-hTERT转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选阳性克隆扩大培养,并对转染阳性细胞分别进行RT-PCR检测,倍性分析,细胞周期检测和细胞凋亡检测,以观察该基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响.试验结果表明,筛选出的阳性细胞现已传至第50代;RT-PCR检测,端粒酶基因成功整合到山羊胎儿成纤维细胞并持续表达;倍性分析结果显示,转基因第50代细胞呈正常二倍体;对细胞周期进行分析,结果显示转基因第50代细胞较未转染第30代细胞有较高的S期,说明该细胞DNA合成旺盛,具有很强的增殖能力;细胞凋亡检测结果发现,转基因第50代细胞中凋亡细胞的比例明显少于转染第30代山羊胎儿成纤维细胞.这些试验结果均表明,hTERT能增加山羊胎儿成纤维细胞体外培养的代数,并保持细胞良好的形态及较强的增殖能力.  相似文献   

哺乳动物X染色体失活机制及其应用     

鲁成龙  华松  彭辉  吕品  刘旭  张涌 《兽医大学学报》2012,(7):1083-1088

1X染色体失活的起源及发展 哺乳动物X染色体失活是指雌性动物为了平衡与雄性动物X染色体基因表达量的差异,而失活其中1条X染色体的现象。X和Y染色体起源于1对同源的常染色体,自然选择的压力导致了1条染色体的某个基因突变,从而产生了决定性别的基因,进而产生了性别分化。  相似文献   

参与调节哺乳动物精子运动的离子通道研究进展     

何琪富  高峰  吴盛辉  张涌  权富生 《畜牧兽医学报》2023,(7):2708-2722

精子运动能力是精子完成自然受精、实现自然条件下精子-卵母细胞融合的必要条件。精子从雄性附睾经生殖道进入雌性生殖道的过程中，其运动形式可以在很短的时间内根据环境的变化而做出改变，表明精子膜蛋白(离子通道)参与精子运动的调节，离子通道的正常表达和受精过程密切相关。目前研究发现Ca²⁺、K⁺、Na⁺等离子通道均参与精子膜极化、运动、获能和顶体反应等生理过程，且通过膜片钳和电生理学等技术初步了解精子离子通道的作用分子机制和拓扑结构。本文就参与调节精子运动的Ca²⁺、pH、电压门控Na⁺、K⁺、Cl^-通道的生理功能和拓扑结构进行了总结，期望能为精子离子通道的调节机制和功能研究提供全面的信息，促进动物生殖生物学的发展。  相似文献   

电磁与液压复合制动的控制研究     

李冰林  吕立亚  赵奉奎  张涌 《农业装备与车辆工程》2020,58(10)

电磁和液压复合制动能有效提高制动的安全性能。针对普遍将汽车制动系统的研究非线性问题线性化,采用数值模拟的方式对电磁、液压系统进行建模。根据电磁与液压制动各自的特点,利用混杂系统理论对其实现控制。针对不同情况下的制动,提出了以制动强度、汽车减速度和滑移率综合为一起的控制策略实现对车轮的制动。仿真结果表明:电液复合制动系统能有效提高系统的响应速度,减少了制动时间,缩短了制动距离;在中小制动强度的情况下,电磁制动可以提供部分制动力,改善液压制动的状况;当制动强度进一步增大时,能立即有效地实现系统的防抱死制动,验证了策略的可行性。  相似文献   

基于TMS320F2812的金属带式无级变速器电控系统的设计     

刘芳华  杨磊  张涌  侯素礼  吴海啸 《拖拉机与农用运输车》2009,36(4):106-108

开发了基于TMS320F2812金属带式无级变速器的电控系统的硬件和软件,并引入了软件分层模块思想,在速比和金属带的夹紧力控制方面,设计了一套基于被控对象参数反馈的控制系统。并利用Matlab/Simulink自动代码生成功能,将速比及夹紧力控制的Simulink图生成可执行的C代码。试验结果表明,所设计的电控系统能很好地满足实际需要。  相似文献   

山羊小腔卵泡卵母细胞的体外成熟和体外受精     

张涌  刘素绢  李勇 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1996,24(2):12-16

采集繁殖和非繁殖季节山羊卵巢，回收大腔（３～６ｍｍ）和小腔（＜２ｍｍ）卵泡卵母细胞，进行体外成熟和受精，结果如下：①繁殖季节的大腔和小腔卵泡卵母细胞体外成熟率（６８．４％，２７．５％）均显著（Ｐ＜０．０５）高于非繁殖季节（５２．５％，２０．６％）；②１和１．５周岁龄羊与成年羊相比，前两者的小腔卵泡卵母细胞采集数显著（Ｐ＜０．０５）多于后者（２５．６，２２．５：１５．ｌ），但卵母细胞体外成熟率无显著差异（Ｐ＜０．０５）；③随卵母细胞直径增加，其体外成熟率呈显著上升趋势；④与加新生犊牛血清和生殖激素在颗粒细胞悬浮液中培养相比，加发情山羊血清和激素在颗粒细胞单层上培养可显著（Ｐ＜０．０５）提高小腔卵泡卵母细胞体外成熟率（２０．８％：３４．５％）；⑤将体外成熟的小腔卵泡卵母细胞与体外获能精子进行受精，其受精率为３５．７％（５１／１４３）。  相似文献