STAT3基因转染牛乳腺上皮细胞及生物学特性观察   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘甲  何玉龙  吕品  孙健红  张涌 《农业生物技术学报》2009,17(3):426-432

应用PCR技术从含有人STAT3基因cDNA的质粒pOTB7中扩增STAT3基因片段。将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,构建重组表达质粒。利用脂质体介导法将重组表达质粒转染原代牛乳腺上皮细胞(Bovine Mammary Epithelial cells)。G418筛选阳性克隆,RT-PCR检测STAT3基因在牛乳腺上皮细胞中的表达情况,并通过流式细胞术(Flow cytometry)检测转染细胞的增殖能力、周期以及DNA含量。结果表明,转染24h后大约16%的细胞被导入含STAT3基因的重组表达质粒。在mRNA水平证实细胞内有STAT3基因的高表达。导入STAT3基因后,细胞增殖能力增强,染色体倍数发生变化,细胞的增殖寿命较对照细胞延长了13代,表明导入STAT3基因后,能延长体外培养的牛乳腺上皮细胞的寿命。  相似文献   

小鼠2和4细胞胚卵裂球电融合参数的研究     

张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1992,20(Z1)

用80μs和800,1000,1200,1400V/cm的脉冲获得的2细胞胚卵裂球融合率分别为53％(21/40),70％(32/46),82％(36/44),81％(29/36);用1200V/cm和80,160,320μs的脉冲获得2细胞胚卵裂球的融合率分别为82％(36/44),92％(44/48),70％(26/37)。用160μs和1400,1600,1800V/cm的脉冲获得的4细胞胚卵裂球融合率分别为77％(27/35),91％(39/43),79(30/38);用1600V/cm和80,160,320μs的脉冲获得的4细胞胚卵裂球融合率分别为73％(29/40),91％(39/43),77％(27/35)。2,4细胞胚卵裂球融合的适宜条件分别是1200V/cm和160μs,1600V/cm和160μs。  相似文献   

序贯培养液G1/G2对山羊核移植胚胎发育和质量的影响     

刘军  郑聪颖  李长雷  杜珊  李亮亮  马保华  张涌 《畜牧兽医学报》2011,42(3)

为了优化山羊核移植胚胎体外培养体系,提高核移植效率,本研究检测了山羊体细胞核移植(SCNT)胚胎在序贯培养液G1/G2中的发育率和囊胚细胞凋亡,以及核移植胚胎移植后的妊娠率,以传统mSOF-FBS培养液作为对照组,评估序贯培养液G1/G2支持山羊核移植胚胎的发育能力。结果显示,与对照组相比,G1/G2组的囊胚发育率差异不显著((27.7±3.1)%vs(25.3±1.0)%,P>0.05),囊胚细胞数和囊胚细胞凋亡率显著降低(分别为(93.2±4.5)vs(109.1±6.2)和(4.9±0.2)%vs(11.3±0.1)%,P<0.05),但移植后的妊娠率显著增高(21.4%vs 8.0%,P<0.05)。结果表明,与传统的培养液mSOF-FBS相比,序贯培养液G1/G2能更好地支持山羊核移植胚胎的发育。  相似文献   

重组溶葡球菌酶的体外抑菌活性研究     

苏运芳  李义  屈延延  南志春  齐雪峰  张涌  赵献军 《动物医学进展》2011,32(9):19-22

采用试纸片法和肉汤稀释法测定重组溶葡球菌酶(rLspn)的抑菌圈大小、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),通过与溶葡球菌酶标准品和两种抗生素相比较,评价rLspn的体外抑菌活性.试纸片法试验结果显示,rLspn有专一抑制金黄色葡萄球菌的作用,而对其他菌株无效;rLspn与标准品的抑菌活性差异不显著(P＞0....  相似文献   

绵羊卵母细胞OPS玻璃化冷冻效果初报     

张晓建  陈静波  张涌等 《勤云标准版测试》2005,(5)

比较了绵羊卵母细胞不同发育阶段对OPS玻璃化冷冻效果的影响,同时比较了程序化冷冻与OPS玻璃化冷冻的效果。结果显示:成熟培养0h(GV期)、16h、24h、26h的卵母细胞玻璃化冷冻、解冻后形态正常数差异不显著()P<0.05),培养24h卵母细胞冷冻保存后,分裂卵数、囊胚发育数与培养0h、16h、26h试验组差异显著(38.3%VS13.3%、26.7%、28.3%;11.7%VS0%、5.0%、8.3%,P<0.05),而培养16h、26h两个试验组之间差异不显著(P<0.05);程序化冷冻方法(参考胚胎程序化冷冻)、OPS玻璃化冷冻与不冷冻三组试验在形态正常数、分裂卵数和囊胚发育数上差异都极显著(20.0%VS54.1%、100%;6.7%VS37.5%、78.3%;0%VS11.4%、23.3%,P<0.01)。  相似文献   

板栗品种石丰的引种及其丰产栽培技术     

陈福  张涌  徐琳  顾明东  贾代顺 《中国果菜》2006,(1):8-9

1998年初，云南省林业科学院广南研究站从山东省果树研究所引种了板栗品种石丰，经7年的栽培观察，该品种表现为粒大、优质、成熟期早、丰产、抗逆性强、市场售价高。  相似文献   

不同区域绵羊最佳超排季节的研究     

张立  黄春华  栗军  韩锦龙  冯彦军  张涌 《中国草食动物》2006,(Z1):170-171

试验针对我国地域辽阔,各地气候差异大等特点,2000 ～ 2005年在东北、西北、华北、中原4个地区进行了大规模绵羊超排试验,研究不同区域季节对绵羊超排效果的影响.试验结果表明东北地区,10月中旬到11月底供体羊超排效果好于12月初到1月中旬,差异显著(P＜0.05),和9月初到10月中旬相比,差异极显著(P＜0.01).西北地区,10月中旬到11月底供体绵羊超排效果好于12月初到1月中旬,但差异不显著(P＞0.05),同时好于9月初到10月中旬,差异极显著(P＜0.01).12月初到1月中旬起超排效果好于9月初到10月中旬,差异极显著(P＜0.01).华北地区,11月中旬到12月底供体绵羊超排效果好于1月初到2月中旬,但差异不显著(P＞0.05),同时高于10月初到11月中旬,差异极显著(P＜0.01).1月初到2月中旬超排效果高于10月初到11月中旬,差异显著(P＜0.05).中原地区,12月中旬到1月底供体绵羊超排效果好于11月初到12月中旬的平均可用胚5.17枚±3.84枚和2月初到3月中旬的平均可用胚4.79枚±2.14枚,差异极显著(P＜0.01).11月初到12月中旬好于2月初到3月中旬,但差异不显著(P＞0.05).  相似文献   

小鼠皮肤成纤维细胞的体细胞核移植   总被引：1，自引：1，他引：0  

曹鸿国  张涌 《畜牧兽医学报》2005,36(6):559-563

取成年小鼠唇部皮肤进行培养，分离成纤维细胞并血清饥饿培养1周，用作核供体。对成年小鼠进行超排，取卵母细胞用作核受体，核移植重构胚经SrCl2激活处理6h后，同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养，把发育到早期囊胚的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上，添加ES细胞条件培养液，消化分离ICM，然后接种培养，对孵出的ES细胞样集落进行鉴定培养。结果显示，小鼠唇部皮肤成纤维细胞为核供体，核移植重构胚2-细胞率为54．05％，桑椹胚率17．14％，囊胚率6．90％，对照组卵丘细胞的核移植重构胚2-细胞率为60．00％，桑椹胚率21．85％，囊胚率11．69％，但2种供体细胞在支持核移植重构胚发育能力上差异不显著。成纤维细胞重构囊胚中6个囊胚分离出ES细胞样集落，3个ES细胞样集落可稳定传代；对照组卵丘细胞重构囊胚中9个囊胚中分离出ES细胞样集落，5个ES细胞样集落可稳定传代。从核移植重构胚中分离出的ES细胞样集落具有岛状或巢状群体生长形态，生长旺盛的集落可自发分化成单个散在或片状存在的上皮样或梭形细胞，碱性磷酸酶检测为阳性，常规冻存复苏，仍显示ES细胞特征。  相似文献   

端粒和端粒酶与衰老关系的研究进展   总被引：6，自引：0，他引：6  

任芳丽  张涌 《动物医学进展》2002,23(3):19-20

端粒是存在于线性染色体末端的一段特殊的DNA－蛋白质复合物，由于末端不能复制，正常体细胞随着细胞分裂的进行而逐渐丢失端粒序列，导致细胞老化和死亡。端粒酶是维持端粒长度的一种特殊的DNA聚合酶，在细胞的增殖、衰老及永生中起重要作用。本文就端粒和端粒酶及其与衰老的作一综述。  相似文献   

FSH使用方法对无角道塞特绵羊超数排卵的影响     

白喜云 陈静李跃民  张志平张涌 《中国兽医科技》2006,36(12):1009-1012

为探讨FSH的种类、剂量及注射次数和注射季节对绵羊超数排卵的影响,采用中国科学院动物所、宁波、加拿大生产的FSH对206只无角道塞特绵羊进行了超排处理,观察了供体发情率、回收胚胎数、可用胚胎数、退化胚及未受精卵比率以及供体的表现.结果,无论那种FSH,在适当的剂量范围都可有效进行超排,中国科学院FSH与宁波FSH联合使用可提高回收胚胎数和可用胚胎数;与6次递减注射相比,7次或8次递减注射的结果更为理想;秋季的超排效果优于春、夏和冬季.供体对激素处理表现复杂多变的超排反应,同时也出现卵子受精失败现象.结果表明,外源FSH只能在一定程度上控制超排反应,进一步的研究应考虑外源性FSH与内分泌反应的关系.  相似文献