鼠层粘蛋白α5链E3、LG4、LG5片段的克隆及表达     

孙兆增  张玉静  展德文  张艳宇  连继勤 《中国兽医学报》2004,24(5):467-469

从鼠的肝脏组织中提取总 RNA,采用 RT- PCR获得了鼠层粘蛋白 ( laminin)α5链的 E3 ( L G4 - 5)、L G4 和 L G5等 3个基因片段 ,与 NCBI数据库参考序列相比 ,同源性在 99%以上。将 E3 ( L G4 ,5)、L G4 和 L G5定向克隆到原核高效表达载体 Pet- 2 8a中 ,构建 Pet- 2 8a- E3 、Pet- 2 8a- L G4 、Pet- 2 8a- L G5等 3个原核表达质粒。将表达质粒转化表达受体菌 BL2 1中 ,IPTG诱导表达。收集菌液进行 SDS- PAGE电泳、Western- blotting分析 ,结果显示 ,这 3段基因在原核细胞中成功表达 ,薄层扫描显示表达蛋白占细胞总蛋白的 2 0 %以上。大量提取包涵体 ,纯化后免疫家兔 ,8周后得多克隆抗体 ,间接 EL ISA在抗体稀释到 1∶ 1 2 80 0时仍为阳性  相似文献   

嗜吞噬细胞无浆体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用     

崔艳艳  王晓星  张艳  史柯  菅复春  张龙现  王荣军  宁长申 《中国兽医学报》2018,(4)

为建立荧光定量PCR方法检测嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum),针对GenBank A.phagocytophilum 16S rRNA基因保守序列(JN558815),设计1对引物1-25F/183-205R。以已知引物EE1/EE2和该引物进行巢式PCR扩增出预期大小片段(205bp),构建含有16S rRNA基因的重组质粒,以质粒为模板构建了标准曲线。以1-25F/183-205R为荧光定量PCR引物,建立A.phagocytophilum荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性试验和临床样本检测。结果表明,该方法在6.4×10~3~6.4×10~8 copies/μL相关系数为0.99,显示出良好的线性关系;所建方法能特异地检出A.phagocytophilum,对绵羊无浆体、牛无浆体和环形泰勒虫基因组DNA和灭菌双蒸水均无交叉反应;可检测到6.4×10~2 copies/μL的标准质粒DNA,比常规PCR敏感性高100倍;批内及批间变异系数均低于2.0%,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法对30份羊血液临床样品检出率比巢式PCR高16.67%。该研究为A.phagocytophilum临床检测和定量分析病原感染程度奠定理论基础。  相似文献   

黄瓜的营养成分、作用及嫁接技术   总被引：2，自引：0，他引：2  

李岳平  梁开杰  李美婷  张艳  周思凯  陈显  郎进宝 《上海农业科技》2015,(1):89+131

为促进奉化市黄瓜产业的发展,总结介绍了黄瓜的营养成分、作用及相关嫁接技术,以供参考。  相似文献   

农业院校师资队伍现状调查与分析     

张默  张艳 《高等农业教育》2016,(2):51-54

对分布在我国29个省、市、自治区的42所涉农院校进行了调研,呈现出我国农业院校的人才队伍结构现状和优秀人才总量现状,使农业院校人才队伍建设的主要成绩等得到了量化。分析农业院校师资队伍存在的师资队伍老龄化,职称结构基础不稳;优质师资资源分布不均衡;重视高端人才引进,忽视人才培养;欠缺师资队伍发展的学术成长环境;高层次教学科研平台缺失;对"985""211"工程农业院校扶持力度偏大等问题,并提出师资队伍建设的对策建议。  相似文献   

树木苗期及造林后的浇水技术     

张东  张艳芝  王彩平  薛迎东 《林业实用技术》2011,(8):38-39

从种苗期和造林后两个阶段,对灌溉时机、灌溉量、灌溉次数、灌溉方法及注意事项进行分别论述。  相似文献   

鲜食葡萄硬枝扦插生根技术     

郑精杰  郭海莉  张艳绞  王晓鹏  杜智 《山西果树》2017,(2)

<正>1插条选择选择芽眼饱满、健壮、无病毒的1年生枝条,作为插条。剪取有5~6个芽的条子为种条,然后根据品种分别结扎成捆,拴上品种标牌并写明品种、数量、采集时间后,贮藏于湿润沙土中。2扦插于春季(2016年5月9日),取出贮藏的插条后在水中浸泡18h。为促进扦插生根采用垄插育苗法,首先  相似文献   

土耳其斯坦裂体吸虫23kDa蛋白基因的序列分析及抗原表位预测     

宿文文  张莹  那璐  王文涛  常巧呈  张艳  王春仁 《黑龙江八一农垦大学学报》2014,26(4):26-29

为研究土耳其斯坦裂体吸虫23 kDa蛋白的生物学特性,以土耳其斯坦裂体吸虫cDNA为模版,利用PCR对23 kDa基因进行扩增,并将其克隆到T-easy载体后进行序列测定。利用生物信息学对其结构、抗原指数进行分析,并对其抗原表位进行预测。序列分析结果表明,该虫体的23 kDa基因长度为657 bp,A+T含量为57.38%,与曼氏血吸虫、埃及血吸虫和日本血吸虫的23 kDa基因的相似性分别为85.24%、83.71%和81.89%。蛋白二级结构分析表明,23 kDa蛋白经过4次跨膜,主要由6个α-螺旋、3个β-折叠、7个β转角和若干个无规则卷曲构成。抗原表位预测结果表明,该蛋白有3个B细胞抗原表位。综合分析土耳其斯坦裂体吸虫23 kDa蛋白是一种较好的抗原分子,是土耳其斯坦裂体吸虫疫苗的重要候选分子。  相似文献   

利用非靶向代谢组学方法研究龙胆泻肝汤治疗急性肝损伤的机制     

张艳  王爽  李永哲  宋爽 《江苏农业科学》2020,48(10):208-213

以龙胆草、黄芩、山栀子、生地黄、泽泻、车前子、当归、木通、柴胡和甘草组成的龙胆泻肝汤为试材,采用气相色谱-质谱技术,并结合代谢组学的方法研究龙胆泻肝汤对大鼠急性肝损伤(ALI)的治疗作用及机制。结果表明,龙胆泻肝汤有明显的治疗ALI的作用,其机制与影响丙酮酸、肌氨酸、延胡索酸、琥珀酸、L-别苏氨酸、4-羟基脯氨酸、柠檬酸和吲哚乳酸8个具有特征性的内源性生物标志物有关,这些标志物属于三羧酸循环,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,乙醛酸和二羧酸代谢,丙酮酸代谢和糖酵解或糖异生5个代谢途径。龙胆泻肝汤能改善ALI大鼠的症状,调节ALI大鼠代谢通路异常,具有明显的保肝作用。  相似文献   

2016年秋冠小白菜春秋两季多点比较试验     

李桂花  陈汉才  张艳  黎庭耀  唐文武 《蔬菜》2017,(8):15-18

以华冠小白菜为对照品种,在大田生产条件下对秋冠小白菜进行新品种的多季多点比较试验,以期对新选育的秋冠小白菜的生物学性状、品质、产量等进行合理评价.结果表明:在多季多点试验中,新品种秋冠小白菜株高、株幅、叶长、叶宽、叶片数等均比对照表现好,株型紧凑,春、秋季平均667 m2产量分别比对照华冠提高18.5%、25.6%;抗病性及抗逆性均比对照强;维生素C、可溶性蛋白质、可溶性糖含量均较高,综合营养品质优良.  相似文献   

蛋鸡日粮钙水平对其生产性能、蛋品质及机体钙磷含量的影响     

黄福标  谭春萍  于冬玲  张艳雯  黄春兰  凌小莲 《中国饲料》2018,(18)

文章旨在研究日粮中钙水平对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清钙磷及胫骨成分的影响。试验选择健康、产蛋率一致的480 d高龄褐壳蛋鸡600只,随机分为5组,每组5个重复,每个重复24只鸡。蛋鸡饲喂5种以玉米-豆粕为主要原料的日粮,各组日粮钙水平分别为3.5%、3.7%、3.9%、4.1%和4.3%,试验共进行10周。结果显示:日粮钙水平对蛋鸡平均日采食量、产蛋率和蛋重无显著影响(P0.05)。但当日粮钙水平由3.5%升高至4.3%时,破蛋率表现为显著线性下降(P0.05)。日粮钙水平对鸡蛋蛋壳样色和哈弗单位无显著影响(P0.05)。随着钙水平的升高,蛋黄颜色、蛋壳强度和蛋壳厚度表现为显著线性升高(P0.05)。日粮钙水平对血清钙和磷水平无显著影响(P0.05)。胫骨强度随日粮钙水平的升高有升高趋势,但差异不显著(P=0.09)。胫骨中灰分、钙和磷含量随日粮钙水平的升高无显著的线性或二次曲线相关(P0.05)。结论 :日粮钙水平对高日龄产蛋鸡的采食量和产蛋率无显著影响,但钙水平达到4.3%时可以提高蛋壳质量。高日龄褐壳蛋鸡的适宜钙水平至少要达到3.9%才能降低破蛋率和提高蛋壳质量。  相似文献