国标法对乳碱性磷酸酶的检测及其在巴氏消毒上的研究     

惠永华  杨国宇  韩立强  王伟杰  苗培  林茂旺 《中国畜牧兽医》2007,34(9):68-70

采用国标法对乳中碱性磷酸酶（ALP）检测，结果显示：全乳和脱脂乳的酶活力分别为403.345、148.8147 μg/ml，变异系数分别为1.30%、2.99%。与国标法的不同之处：乳样最佳稀释比为1∶25，苯酚的最佳浓度为50 μg/ml；然后对其模拟巴氏消毒得出：63℃ 30 min基本使ALP灭活。  相似文献   

纳米铝胶佐剂增强猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫的效果   总被引：1，自引：0，他引：1  

寇亚楠  刘石  王瑞宁  耿静微  徐卫松  陈红英  崔保安  杨国宇  魏战勇 《中国兽医学报》2015,(1):25-30

将20头35日龄断奶仔猪随机分为4组,将制备的纳米铝胶佐剂猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)灭活疫苗肌肉注射免疫接种,并以常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗组、市售PPV油乳剂灭活疫苗组为疫苗对照,生理盐水组做阴性对照,应用HI和ELISA检测接种猪的体液免疫水平,流式细胞仪检测免疫猪的细胞免疫水平。体液免疫检测结果显示,PPV纳米铝胶佐剂疫苗组能显著提高机体产生抗体的速度,在首免后第2周产生有效保护抗体水平显著高于油乳剂疫苗和常规铝胶佐剂疫苗组(P0.05),在第3周其抗体水平达到峰值;细胞免疫检测结果显示,3种疫苗均能诱导机体产生细胞免疫应答,但各组之间差异不显著(P0.05)。结果表明,以纳米铝胶为佐剂制备的猪细小病毒灭活疫苗,能显著提高机体的免疫水平,并较早刺激机体产生抗体,具有较好的免疫保护效果。  相似文献   

乳过氧化物酶体系对发酵奶产品的影响     

王伟杰  杨国宇  惠永华  李卫华  林茂旺 《安徽农业科学》2007,35(6):1670-1670,1672

介绍了乳过氧化物酶体系对不同发酵奶产品的产量、风味、外观和质地的影响,并阐明它对发酵奶产品生产的一些新用途.  相似文献   

猴源rab基因shRNA文库及其稳定细胞株的构建     

郭珍珍  鲁绍芳  樊爽爽  李国利  韩立强  鲁维飞  王江  陈丽颖  杨国宇  褚贝贝 《中国兽医学报》2018,(3):469-475

为揭示Rab蛋白在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)入侵进入宿主细胞后的功能,本研究以PRRSV易感的猴胚胎肾上皮细胞Marc-145为模型,构建了针对猴源rab基因的短发夹RNA(shRNA)文库。此文库中的shRNA以pLKO.1为载体质粒,与pMD2.G和psPAX2包装质粒共同转染HEK293T/17细胞,获得慢病毒;利用慢病毒感染Marc-145,通过puromycin筛选获得稳定抑制猴源rab基因表达的细胞株。通过荧光定量PCR方法检测各细胞株中rab基因的敲减效率。本试验构建的文库包含187个克隆、涉及62种rab基因。荧光定量PCR结果证明,筛选出的稳定细胞株中相应rab基因mRNA的表达量均有显著下降。结果显示本试验成功构建了猴源rab基因shRNA文库并筛选出了稳定细胞株,可用于后续进一步研究Rab蛋白在PRRSV生活周期中发挥的重要功能。  相似文献   

猪干扰素IFNE1基因克隆及重组表达载体的构建     

台玉磊  王艳玲  王伟杰  韩立强  张志强  臧猛  王静  杨国宇 《中国农学通报》2008,24(11):60-64

依据电子延伸序列设计一对克隆引物,用RT-PCR法从猪胃组织扩增出猪干扰素epsilon 1(IFNE1)基因的完整编码区并进行序列分析;再根据克隆的序列设计一对表达引物,用PCR法从重组克隆载体中扩增出含EcoRI/XhoI酶切位点的猪IFNE1片段,插入原核表达载体,转化至宿主菌,诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白。结果表明,克隆的猪IFNE1基因包含完整的开放阅读框架,长为586 bp,ORF为582 bp,编码193个氨基酸,与人、小鼠的同源性分别为83.6%和69.2%,推测的氨基酸序列与人、小鼠的同源性分别为76.2%和55.2%,表达的融合蛋白分子量约为47 kDa。  相似文献   

猪Sirtuin3基因的克隆与进化分析     

韩立强  王永才  朱河水  王月影  杨国宇 《江西农业学报》2008,20(12):1-2

从猪十二指肠肠道组织提取总RNA,采用RT-PCR方法克隆了猪Sirtuin3基因,并与GenBank中的9个其他物种的核酸序列进行了同源性分析,采用邻接法构建了分子系统进化树。结果表明克隆的猪Sirtuin3基因长999bp,编码332个氨基酸,前21个为信号肽;猪Sirtuin3与牛、人的同源性最高,分别为86．3％、79．6％,分子进化树也表明猪的Sirtuin3与牛、人的亲缘关系最近。  相似文献   

绵羊鸟苷素基因的克隆与序列分析     

乔新安  王艳玲  杨国宇  朱彦彩  范沛  都军霞 《甘肃农业大学学报》2008,43(4)

基于电子延伸序列,本试验克隆并分析了绵羊鸟苷素基因.从绵羊十二指肠黏膜组织中提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR扩增,PCR产物与pMD19-T载体连接后转化到E.coliJM109感受态细胞,检测阳性克隆并测序.结果表明:克隆的绵羊鸟苷素基因长341 bp,编码109个氨基酸,与人、豚鼠、小鼠和牛的同源性分别为77%7、5%、47%和94%,推测的氨基酸序列信号肽为1~16 aa,整个氨基酸构成一个模域,编码鸟苷素前体蛋白.  相似文献   

雄性水牛瘤胃内睾酮的检测及变化规律的研究   总被引：3，自引：1，他引：2  

杨国宇  陈伟华 《南京农业大学学报》1998,21(1):82-86

采用高压液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定了雄性水牛瘤胃液中的睾酮。结果表明,瘤胃上清液及瘤胃细菌菌体中均有睾酮存在,放射免疫分析表明,瘤胃上清液睾酮样免疫活性物质的平均浓度为６３．９±２６．５ｆｍｏｌ／ｍＬ,且春季含量高于夏季（６６．１±３１．０ｖｓ２３．２±１６．５ｆｍｏｌ／ｍＬ）;瘤胃细菌菌体内睾酮样免疫平等互利为２６３．５±１２９．０ｆｍｏｌ／ｍｇ。春夏两季之间无明显的季节性变化（２９８．２±１５  相似文献   

双歧杆菌在乳制品生产中存在的问题和对策   总被引：2，自引：0，他引：2  

仝千秋  杨国宇  郭爽  付彦峰 《乳业科学与技术》2005,27(1):5-7

双歧杆菌对人体健康有着重要的作用,但是在乳制品生产中它的应用却受到了限制。本文就双歧杆菌的厌氧性,低耐酸性,营养要求严格等特点综述了其在乳制品生产中存在的一些问题,并针对各个问题提出相应的解决办法或建议。  相似文献   

Sus scrofa interferon epsilon-1基因的克隆与序列分析     

杜会坡  台玉磊  王伟杰  杨国宇 《安徽农业科学》2012,40(16):8811-8813

[目的]克隆分析Sus scrofa interferon epsilon-1基因,以期为其生物学功能研究奠定基础。[方法]利用Homo sapiens interferon epsi-lon 1(IFNE1)序列(NM_176891.3)对猪HTG库进行搜索,通过对获得的2个片断(CU074336、AC127471)的序列分析,在5'-UTR和3'-UTR设计1对克隆引物,对7日龄仔猪的胃组织进行RT-PCR,将PCR产物克隆、测序,并进行相关分析。[结果]同源性分析结果表明,猪SIFNE1与人、小鼠interferon epsilon-1基因cDNA编码区(CDS)的同源性分别为83.6%和69.2%;蛋白序列同源性分别为76.2%和55.2%。推测其氨基酸序列信号肽为第1～21位氨基酸,IFabd结构域为第59～176位氨基酸,结构特征与人、小鼠的interferon epsi-lon-1相一致。[结论]该研究克隆了Sus scrofa interferon epsilon-1基因,为进一步研究SIFNE1基因的生物学功能奠定了基础。  相似文献