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21.
22.
为了解鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的基因组差别,筛选鸡白痢沙门氏菌特有的序列,利用SSH对鸡白痢沙门氏菌C79-13（实验方）与鸡伤寒沙门氏菌Sg9（驱动方）基因组进行了比较。选择四碱基内切酶Rsa I将C79-13与Sg9基因组DNA酶切,酶切的C79-13基因组DNA分成两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR ,得到消减混合物, 将其与PCR?2.1克隆载体连接,转化感受态E.coli DH5α建立消减文库。结果共获得400个阳性克隆;筛选240个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100～2000 bp大小的片段。差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆鸡白痢沙门氏菌特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。 相似文献
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24.
鸡沙门氏菌弱毒苗与微生态制剂联合应用的效果 总被引：4，自引：0，他引：4
将鸡沙门氏菌弱毒苗分别与2种不同的微生态制剂配合对AA肉鸡实施免疫。结果表明，弱毒苗单独应用组、联合应用1组和2组的免疫保护效率分别为75％、90％和90％，均与攻毒对照组（40％）存在显著差异（P＜0．05）；攻毒20d后所有存活鸡细菌分离结果显示，上述3个试验组细菌分离率分别为53．5％、55％和5．5％，也均与攻毒对照组（75％）存在显著性差异（P＜0．05）。由此认为，该弱毒苗与上述微生态制剂联合应用的效果明显，具有较好的应用前景。 相似文献
25.
单抗竞争ELISA检测猪沙门氏菌感染方法的建立与应用 总被引：5，自引：0，他引：5
以猪霍乱沙门氏菌作为包被抗原 ,利用沙门氏菌O7单克隆抗体酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪霍乱沙门氏菌抗体。经过研究确定抗原包被浓度为 2×1 0 8CFU/ml,血清检测稀释度为 1∶1 6,酶标抗体浓度为 1∶70 0 ,包被液为碳酸盐缓冲液 ( 0 .0 5MpH9.6)。应用单抗竞争ELISA和平板凝集试验 (PAT)同时对 5 0 6份血清进行猪霍乱抗体检测 ,PAT的检出率为 3 .60 % ,ELISA检出率为 5 .75 % ,两者符合率达 96.4%。试验结果表明 ,ELISA方法敏感性高 ,特异性强 ,稳定性和重复性好 ,操作简便。本方法的建立在猪群沙门氏菌感染的检疫、实验室诊断的标准化及流行病学调查方面具有应用价值。 相似文献
26.
抗猪支原体共同抗原单克隆抗体的制备与鉴定 总被引：4，自引：2，他引：2
以猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)168菌株F332作为抗原，免疫8周龄BALB/c小鼠，利用淋巴细胞杂交瘤技术，获得两株能稳定分泌特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。两株单抗与Mhp和猪鼻支原体（M.hyorhinis,Mh)等反应，而不与鸡支原体，对照血清等反应。结果表明两株单抗可能是针对猪支原体共同抗原的单抗，用SDS-PAGE电泳和Western-blot分析猪支原体的膜蛋白成分。结果显示，猪支原体的共同抗原是80kd和30kd蛋白，两株单抗均与Mhp和Mh的30kd蛋白条带反应，表明这两株单抗特异地针对猪支原体的共同抗原成分30kd蛋白，可以看出，这两株单抗在Mhp的抗原分析，血清学诊断和疫苗质量监测以及猪源支原体污染细胞检测等方面有重要应用价值。 相似文献
27.
28.
鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定 总被引：1，自引：0，他引：1
应用RT-PCR技术,从被刺激诱导的鸡脾脏淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因cDNA,经克隆和测序后,构建原核表达重组质粒pGEX-proChIFN-α(全长序列)和pET-ChIFN-α(不含信号肽序列),并分别转化相应的表达菌.重组菌经IPTG诱导,SDS-PAGE结果表明,ChIFN-α基因均获得表达,重组蛋白大小分别为45 ku、26ku左右,表达的蛋白以包涵体形式存在.表达产物经变性、提纯、复性,重组蛋白的含量约为1 mg/mL.复性后的ChIFN-α能够在鸡胚成纤维细胞上抑制H5N1禽流感病毒的复制;用水泡性口炎病毒检测结果表明,重组ChIFN-α具有较高的抗病毒作用,其生物学活性达到2×106 u/mg. 相似文献
29.
以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的安全性与免疫效力 总被引：3，自引：0，他引：3
将运送 H5亚型高致病力禽流感病毒 DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 X4 5 5 0 (p VAX1- HA)和 X4 5 5 0 (asd-p VAX1- HA )以 1× 10 1 0 CFU的剂量腹腔注射 1日龄 SPF白莱航雏鸡 ,结果表明 ,二者均具有良好的安全性。对 SPF白莱航鸡的免疫原性试验结果表明 ,这 2种细菌均能刺激鸡体产生高水平的肠道粘膜免疫应答 ,但是不能有效地激发血清抗体应答。对商品代伊莎褐蛋鸡的免疫效力试验初步结果显示 ,X4 5 5 0 (asd- p VAX1- HA)免疫鸡能够抵抗强毒的攻击 ,保护指数为 77.8% ,而 X4 5 5 0 (p VAX1- HA)则未产生免疫保护 相似文献
30.
减毒鸡沙门氏菌安全性和免疫效力初步研究 总被引：10，自引：0，他引：10
本研究将减毒鸡沙门氏菌９７Ａ、９７Ｂ分别经口服、皮下注射或滴鼻接种１日龄ＳＰＦ鸡和伊莎鸡,结果表明,９７Ａ株对１日龄雏鸡有良好的安全性,而９７Ｂ株仍有部分毒力。实验室免疫效力试验显示,９７Ａ能提供较强的免疫保护作用,表明９７Ａ是一株较理想的疫苗候选林。 相似文献