苏云金芽胞杆菌不同分化发育时期总RNA的有效分离   总被引：1，自引：0，他引：1  

李今煜  黄天培  潘洁茹  洪永聪  黄志鹏  关雄 《中国农学通报》2008,24(2):348-352

将苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）8010在LB液体培养基30℃、230r／min下振荡培养,通过生长曲线测定（OD600）和显微镜观察,分别在8、30、39、42h和46h取样得到营养生长期、孢子囊期和裂解期样品来提取总RNA。通过对试剂提取方法的改进,找到一种方法可以很有效的提取Bt3个不同分化发育时期（营养生长期、孢子囊期和裂解期）的总RNA。提取的总RNA质量很好,可以进行cDNA合成、RT-PCR和转录组学研究等下游实验。  相似文献   

无公害水仙茶的病虫害发生特点及综合防治     

潘有祥  蔡旭  潘洁茹 《勤云标准版测试》2006,(4):45-49

近几年随着人们环保意识的逐步加深,人们对食品安全的要求也越来越大,也逐步认识到只有发展无公害的优质茶叶才是茶叶产业发展的出路.2003-2004年根据全国农业技术推广中心和福建省植保植检站的安排,在福建省建瓯市建立了无公害茶园病虫害综合防治示范区,初步掌握了建瓯市茶叶主要病虫害的发生特点,探索了无公害水仙茶生产中的病虫害防治技术.  相似文献   

虫生真菌座壳孢的RAPD与LSU rDNA序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

邱君志  黄志鹏  潘洁茹  谢雪钦  朱炎平  张绍升  关雄 《农业生物技术学报》2004,12(5):578-582

用17个引物对不同地理来源的4种11株座壳孢Aschersonia进行RAPD分析，结果表明，种间和种内具丰富的遗传多样性，菌株间差异与地理来源和寄主不相关。部分菌株和GenBank上的座壳孢属核糖体nrDNA大亚基序列进一步用于该属系统发育研究。系统发育树反映的种间和种内关系与形态分类结果基本一致，可以将不同地理来源的不同种区分开来，但从同科或同目寄主昆虫上分离到的不同种并不具有相近的亲缘关系。同时进化树还表明，所分离的菌株Aa是粉虱座壳孢(Aschersonia aleyrodis Webber)。此外，对相同的供试菌株两技术所反应的亲缘关系趋势相同，表明RAPD技术和LSU rDNA用于座壳孢的亲缘关系分析和种类鉴定均是可行的。  相似文献   

苏云金芽孢杆菌8010蛋白酶基因保守区克隆及序列分析     

黄天培潘洁茹  李今煜洪永聪 黄志鹏 《福建农业大学学报(自然科学版)》2008,37(1):73-76

通过设计蛋白酶基因引物,对苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）库斯塔克亚种菌株8010蛋白酶基因进行克隆,获得了6个蛋白酶基因片段,即中性蛋白酶A、色氨酸合成酶β链、色氨酸合成酶α链、碱性蛋白酶A、磷酸化水解酶和糖原磷酸化酶基因,以及1个未知功能的DNA片段（可能是编码蜡质芽孢杆菌组特有蛋白的基因）.  相似文献   

农药对虫生真菌粉虱座壳孢孢子萌发和菌丝生长的影响   总被引：4，自引：0，他引：4       下载免费PDF全文

邱君志  黄志鹏  潘洁茹  谢雪钦  朱炎平  张绍升  关雄 《农药学学报》2004,6(1):31-36

虫生真菌粉虱座壳孢Aschersonia aleyrodis是大有前途的粉虱和介壳虫杀虫剂。用6种大田常用农药在推荐浓度下，研究其在25℃下对座壳孢菌孢子萌发和菌丝生长的影响，发现甲氰菊酯和克螨特抑制其孢子萌发和菌丝生长，表明二者与本菌极不相容。吡虫啉、水胺硫磷和双甲脒能促进孢子萌发且后两者亦可加速菌丝生长，多菌灵对其孢子萌发起暂时促进作用然而抑制其菌丝生长。  相似文献   

一株扁座壳孢的分离及其胞外代谢产物对黄曲霉的抑制效果研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

潘洁茹 林萍叶海梅  黄天培郑能雄 《中国农学通报》2011,27(24):282-285

研究座壳孢抗旱菌株Jos009的胞外代谢产物对食品污染菌黄曲霉的抗菌活性。利用体视显微镜观察子座的形状和颜色,以及通过切片方法获得各菌孢子大小和侧丝长度的详细数据来鉴定该菌株。提取Jos009的胞外代谢产物,并利用滤纸片法测定该菌胞外代谢产物对黄曲霉菌的抑制作用。从福建省建瓯市柑桔园采集到一株座壳孢菌株Jos009,通过分析其子座形态和分生孢子、侧丝等数据,可以鉴定Jos009是扁座壳孢（Aschersonia placeta Berk.et Br.）。其胞外代谢产物能明显抑制黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径达17 mm。该菌在控制黄曲霉方面有良好的应用潜力,进一步研究很有可能从中分离到具有抑制黄曲霉的活性物质,将为防控黄曲霉菌污染,保障民生,提供候选药物资源。  相似文献   

苏云金芽胞杆菌cry2Ac4基因在 大肠杆菌中的表达     

黄天培  陈文  潘洁茹  黄志鹏  关雄 《中国农学通报》2008,24(9):367-370

在大肠杆菌中表达苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）cry2Ac4基因;笔者以含有Bt WB9菌株cry2Ac4基因的质粒pMD2Ac为模板,利用cry2Ac4基因的特异引物对(ET-F/ET-R)扩增获得该基因,进而将cry2Ac4基因与pET-29a原核表达载体连接;成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌JM109,从阳性转化子中提取重组表达质粒pET-29a-cry2Ac4,再转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,经IPTG诱导后,对诱导表达产物进行了SDS-PAGE检测;cry2Ac4基因编码的约70kDa蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。  相似文献   

苏云金芽孢杆菌WB9菌株cry2Ac4基因的克隆及表达     

黄天培  潘洁茹  黄张敏  陈志  庄浩瀚  李今煜  关雄 《农业生物技术学报》2008,16(2):341-345

WB9是我国分离自武夷山的对多种重要农业害虫具有高毒力的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)菌株,经PCR-RFLP鉴定含有cry2Ac基因。根据cry2基因序列设计引物,以WB9质粒为模板扩增cry2Ac全长基因,与大肠杆菌(Escherichia coli)克隆载体pMD18-T连接获得含有cry2Ac全长基因的重组质粒pMD2Ac并测序。该基因在GenBank上登录号为DQ361267,被Bt国际命名委员会正式命名为cry2Ac4。通过亚克隆方法将cry2Ac4基因插入穿梭表达载体pHT315获得重组表达质粒pHT2Ac,将其转化大肠杆菌SCS110和Bt无晶体突变株HD73 Cry-,得到的工程菌能正常表达70 kD蛋白,形成方形晶体。生物测定结果表明,cry2Ac4基因表达产物对桔小实蝇(Bactrocera dorsalis Hendel)幼虫具有显著的毒杀作用,但对小菜蛾(Plutella xylostella)和致倦库蚊(Culex fatlgans)幼虫基本没有效果。  相似文献