中、意蜂Atg12基因克隆表达及生物信息学分析     

涂洋洋  武江利  吴鹏杰  谭静  于慧敏  徐进  郭岳琴  王丽华  徐书法 《中国畜牧兽医》2019,46(3):643-651

试验旨在探究自噬相关基因Atg12(autophagy-related 12 gene)在中华蜜蜂(中蜂)、意大利蜜蜂(意蜂)中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考。参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因序列(登录号:XM_017048509.1)设计引物,扩增中、意蜂头部组织Atg12基因,并对其进行克隆、测序、原核表达及其氨基酸序列和蛋白结构分析,同时采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在中、意蜂头部组织中的表达差异。结果显示,本试验成功扩增出大小为450 bp的目的片段,并表达出大小约42 ku重组蛋白;遗传进化树分析表明,在Atg12基因进化过程中,中蜂(Apis cerana cerana)、意蜂(Apis mellifera)、大蜜蜂(Apis dorsata)和小蜜蜂(Apis florea)亲缘关系较近;重组蛋白生物信息学分析显示,该蛋白的二级结构中共含有6个多肽结合位点、6个β-折叠和4个α-螺旋,分子质量约为16.13 ku,等电点为6.73;实时荧光定量PCR结果显示,Atg12基因在中蜂头部组织中表达极显著高于意蜂(P<0.01)。本试验结果为后续深入研究Atg12基因在中蜂抗螨上的作用机制提供了参考。  相似文献   

动物肝脏指标的主要检测方法概述     

程佳月  王丽华  程国昌  逄莎莎  张玉丹 《养殖技术顾问》2008,(5):145-146

肝脏在动物机体的蛋白质、糖、脂肪等物质代谢方面起着重要的作用。此外,还具有糖原转化、解毒、分泌等功能。所以肝脏的疾病对动物的危害性很大。在现代兽医临床生化诊断中,根据血清中的物质种  相似文献   

想养鹿须慎重     

郭芳  王丽华 《吉林畜牧兽医》1999,(4)

目前,受养鹿业高额利润的牵动,我国乃至全球掀起了养鹿热。１０年间我国梅花鹿、马鹿总数翻了一番有余,高达５０～６０万头。同时新西兰、澳大利亚、加拿大等国养鹿业后来居上,其中新西兰已发展成为全球最大的养鹿国,其饲养的赤鹿就达１８０万头,不仅出口鹿肉,而且鹿茸出口量居世界之首。故此,想涉足鹿业,使鹿产品更多地占领国内外市场,获得较高的经济效益,应着重抓好以下三项工作：１．开发利用廉价饲料资源,提高养鹿技术水平,实行规模养鹿,进而降低养鹿成本。２．进一步完善割茸技术,保证鹿茸质量,降低鹿茸生产成本,增强…  相似文献   

一起猪细小病毒病的诊治   总被引：2，自引：0，他引：2  

郭芳  王丽华 《中国动物检疫》1999,16(4):18-19

1998年8月,滦县某地区许多母猪发生一种以母猪不孕和妊娠母猪流产、木乃伊、死胎、弱胎为主要特征的传染性疾病,认定为猪细小病毒病。现报告如下：1发生情况1998年8月4日,黄各庄黄某饲养的母猪产下木乃伊四个、死胎两个、弱胎三个（7日全部死亡）．以后在该地相继有大批母猪产死胎、木乃伊、弱胎、母猪久配不孕、流产等现象出现。8月25日,我们接报前去调查处理。处女猪发病率达92％,死胎率39．5％,经产母猪发病率闹％,死胎率29．3％。综合分析初步诊断为猪细小病毒病,通过采取必要的防治措施,疫情得到有效控制。2临床表现不同日龄…  相似文献   

目前猪瘟多发的原因及应采取的措施     

郭芳  王丽华 《山东畜牧兽医》1999,(2)

当前,农村养猪业发展迅速,其规模愈来愈大,然而猪病防治上却暴露出各种各样的问题,其中对养猪危害巨大、已销声匿迹多年的猪瘟屡有发生,使猪瘟再次发生的原因大致有３点。原因疫苗与漏防的问题：猪瘟免疫程序改革实行多年来,疫苗的冷藏设备仍不完善,母猪常常漏防。查漏补针未能落到实处：在市场经济条件下,因防疫没有什么经济效益,这项工作往往被忽视,有的流于形式,有的干脆全免。私劁乱骟促进了猪瘟的发生：一些农村兽医,受利益驱使,置法律于不顾,未经许可劁猪又不注射猪瘟疫苗。农村养猪业因再次受到猪瘟的沉重打击而使养猪…  相似文献   

中华蜜蜂精液的冷冻贮存技术(英文)     

王丽华  张其康  侯光珊  罗建能  娄鲲鹏  于文俊 《福建农林大学学报(自然科学版)》1999,28(2)

中华蜜蜂精液在液氮（－ １９６ ℃） 中贮存１２１ ｄ,精液与含有８％ 二甲亚砜的三羟基氨基甲烷缓冲稀释液以１∶１．５ 混合,不用平衡,在广口保温瓶中距液氮面２ ｃｍ 或５ ｃｍ 处预冻,在３５～３９ ℃水浴中解冻,可产生较好的解冻后活力比率（超过６０％ ）．当室温高于２０ ℃时（４ 月份）,样本必须于１３ ℃下平衡０．５ ｈ 左右,其解冻后活力比率可达３０％ ．春季采集并冷冻的样本,其解冻后活力不如冬季采集并冷冻的．用在液氮中贮存了１～１２１ ｄ 的精液分别以 ４～５ μ Ｌ的剂量给 ２４ 只处女王人工授精,４ 只开产但首先产的不是受精卵．解冻后的精液能够于１３ ℃下保存４６ ｈ．磺胺不能用于精子冷冻．  相似文献   

犬细小病毒病的诊治     

王丽华  郭芳 《四川畜牧兽医》1999,(3):34

犬细小病毒病是一种急性传染病,病犬多以出血性肠炎或非化脓性心肌炎为主要特征,病原体是犬细小病毒,主要侵害６月龄以下的幼犬,春秋季多发。１临床表现本病在临床上主要以两种形式出现,即肠炎型和心肌炎型。肠炎型潜伏期为７～１４天,一般先呕吐后下痢,呕吐物是...  相似文献   

1998年全球重大气候     

王丽华 《世界农业》1999,(6):12-15

1998年,世界大部地区气候继续偏暖,全球平均气温再创历史新记录。由于受厄尔尼诺事件和拉尼娜现象的影响,许多地区气候发生异常,出现了大范围的暴雨洪水和高温干旱天气,中国、孟加拉国和中美洲诸国遭受世纪性洪涝灾害,全球经济损失达890亿美元,超过历史最高记录。亚洲中国1997年12月至1998年2月,北方地区气温持续偏高,出现了自1986年以来的第12个暖冬。1997年11月中旬至1998年3月,南方许多地区的降水量突破历史同期最大值,出现了多年不遇的冬汛;3月上旬,江南、华南等地春汛提前来临。3月18－22日,受强冷空气影响,江。浙、皖…  相似文献   

猪UGT 1A1酶基因的克隆、表达及其对呕吐毒素特异性降解的作用     

贺卫华  陈诗琪  王丽华  丁斓  翟晓虎  杨俊花 《江苏农业学报》2023,(8):1722-1728

为了在Sf9昆虫细胞中表达猪尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT) 1A1蛋白并对其进行功能鉴定。首先,合成密码子优化的UGT 1A1基因,克隆到载体pFastBacⅠ中,构建杆状病毒重组转移载体,然后导入DH10Bac中,获得重组的穿梭质粒,再转染Sf9细胞得到重组杆状病毒,采用Western blotting方法鉴定重组后UGT 1A1蛋白的表达;对镍柱亲和层析纯化获得目的蛋白酶的动力学参数及其对呕吐毒素(DON)的代谢进行检测。结果表明：pFastBac-UGT 1A1质粒被成功构建,导入感受态细胞DH10Bac中获得重组穿梭质粒Bacmid-UGT 1A1,再转染昆虫细胞Sf9获得重组Bacmid-UGT 1A1蛋白,能够与多组氨酸标签单抗发生特异性反应。优化目的蛋白表达,并对其体外代谢DON进行了酶学性质和动力学参数的研究。本研究通过基因克隆、表达和代谢产物的分析等技术手段获得具有较好的生物活性且纯化的Bacmid-UGT 1A1蛋白,为揭示DON在肝脏中的代谢途径、代谢产物和关键调控因子提供参考。  相似文献   

现代学徒制宠物疾病诊疗技术课程教学改革探索   总被引：1，自引：1，他引：0  

沈晓鹏  段修军  卢炜  卓国荣  王丽华 《现代农业科技》2018,(17)

现代学徒制是通过学校、企业深度合作,教师、师傅联合传授,对学生以技能培养为主,促进学生岗位成才的现代人才培养模式。根据宠物疾病诊疗技术课程的定位,通过对企业、行业的调研,依据岗位能力的要求,确定宠物疾病诊疗技术课程教学内容。校企深度融合,构建双主体育人机制;学生学徒双重身份,建立校企双导师制;学生工学交替进行宠物疾病诊疗技术课程的学习;以能力为核心,建立宠物疾病诊疗技术课程全面的评价体系,促进学生牢固掌握宠物疾病诊疗知识和技能。  相似文献