牡蛎疱疹病毒(OsHV-1)间接原位杂交PCR检测方法的建立与初步应用     

李亚楠  白昌明  刘金兰  辛鲁生  李晨  刘莉  黄博闻  魏智薪  王崇明 《水产学报》2019,43(3):679-687

为建立实现牡蛎疱疹病毒(OsHV-1)在贝类宿主组织中的精确定位方法,基于原位杂交PCR (ISPCR)技术建立了OsHV-1的间接原位杂交PCR (indirect ISPCR)检测方法,并利用该方法对OsHV-1在魁蚶主要器官的分布情况进行了检测和分析。首先选择适合原位杂交PCR的引物,在载玻片上实现对原位固定靶组织内病毒DNA的稳定、特异扩增,然后与使用相同引物制作的地高辛标记核酸探针进行原位杂交,最后通过免疫酶标技术显示样本内OsHV-1的组织分布。为了达到最佳检测效果,对间接ISPCR的扩增循环数以及组织消化的蛋白酶K浓度进行优化。结果显示,最适PCR扩增循环数为20,蛋白酶K浓度为20μg/mL。利用经优化的间接ISPCR检测方法,对OsHV-1在魁蚶外套膜、鳃、肝胰腺、斧足和闭壳肌5个样本中的组织分布情况和亲嗜性进行检测和分析。病毒阳性信号主要分布于魁蚶外套膜结缔组织中浸润的血细胞和成纤维细胞、肝胰腺和鳃浸润的血细胞、斧足和闭壳肌中坏死肌肉细胞的细胞核中。本研究建立的间接ISPCR检测方法具有灵敏、特异和精确定位的优点,通过组织切片上显示的病毒核酸阳性信号,能判别OsHV-1在不同组织部位的分布特点和受感染的细胞类型;适用于OsHV-1感染的确诊、病毒对不同组织器官的亲嗜性、病毒侵染途径和致病机理等相关研究。  相似文献   

基于牡蛎疱疹病毒DNA聚合酶基因的巢式PCR检测方法的建立及应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

高文辉  白昌明  蔡生力  王崇明 《水产学报》2016,40(3):326-333

为了建立适用于Os HV-1不同变异株的检测方法,在牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)3个变异株全基因组序列比对的基础上,筛选到牡蛎疱疹病毒基因组中高度保守的DNA聚合酶(DNA polymerase)基因,据此设计巢式PCR引物,优化PCR反应体系和条件,建立了基于Os HV-1 DNA聚合酶基因的巢氏PCR检测方法(P-n PCR检测方法),利用P-n PCR与Cn PCR检测方法对不同年份和宿主来源的Os HV-1疑似感染样本进行检测。结果显示,Pn PCR检测方法能稳定地检出100拷贝/μL的病毒DNA;P-n PCR较C-n PCR检测方法具有更强的特异性和更高的检出率。研究表明,本研究建立的P-n PCR检测方法适用于Os HV-1不同变异株的检测,可为该病毒的检测和流行病学调查提供可靠的技术支持。  相似文献   

不同覆盖方式土壤生态效应与成龄葡萄增产效应研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

花永辉  白云岗  蔡军社  肖军 《北方园艺》2009,(8)

通过小区试验研究了不同覆盖保墒灌溉措施对土壤水分动态变化、土壤温度、葡萄生长状况、生理生态指标以及产量等的影响。结果表明:与对照相比,覆盖措施明显减少了土壤水分蒸发,提高了蓄水保墒作用;覆盖措施可明显提高土壤表层温度,但随深度的增大,影响程度逐渐减小;保墒处理的果树生长势强、枝条增长量大、果粒大、产量高。草帘子覆盖措施与塑料薄膜覆盖措施效果相当。  相似文献   

罗汉果种植中的主要气象灾害及防御对策     

蒋运志  熊英明  白先达  周水明 《广西园艺》2009,20(6):26-28

罗汉果[Siraitia grosvnorii（Swingle）C．Jeffrey-]是葫芦科多年生草质藤本植物,是我国特有的医药原材料和饮料添加剂,享有“东方神果”的美誉,以广西栽培最多,广东、江西、湖南、贵州等省也有分布,但较为零散。罗汉果作药用,味甘性凉,有清热、祛痰、消渴、润肺止咳、润肠通便之效;作饮料,煎汤代茶,  相似文献   

xPC环境下CMAC NN在淀粉生产线液位控制中的应用   总被引：1，自引：1，他引：0  

沈刚  何景峰  丛大成  白晓东  唐晖  韩俊伟 《农业机械学报》2009,40(2)

在分析CMAC神经网络的基础上,提出了利用自适应CMAC神经网络来调节淀粉生产线中乳液的液位.通过对淀粉生产线中某一液位回路进行数学建模,然后对常规PID和自适应CMAC神经网络两种控制器进行了设计与仿真.仿真结果表明,自适应CMAC神经网络在控制效果上明显优于常规PID,并且具有很高的鲁棒性.在Matlab实时开发环境xPC Target下建立了液位实时控制系统,采用快速原型控制方式,具有系统组建方便、成本低、开发周期短等特点,该系统可实现精确的过程控制.  相似文献   

基于DSP快速原型的淀粉生产线串级控制系     

沈刚  黄其涛  何景峰  丛大成  白晓东  韩俊伟 《农业机械学报》2009,40(7):143-148

在分析比较传统PID和Smith预估PID作为串级控制主回路控制器的基础上,提出了主回路采用Smith预估PID,副回路采用传统PID的串级控制策略调节淀粉生产线中的浓度。对淀粉生产线中串级控制闭环回路进行数学建模,并对主回路采用Smith预估PID和传统PID两种控制方案进行了设计与仿真。仿真结果表明,主回路采用Smith预估PID在控制效果上明显优于传统PID并且其鲁棒性优于传统PID。利用快速原型控制系统实现了该方案,利用Matlab/Simulink建立淀粉生产线的控制系统模块,在CCS集成开发环境中自动生成代码,然后将可执行代码下载到DSP TMS320C2812和TMS320C6713中,即可实现淀粉生产线的串级控制系统设计。  相似文献   

牧区安全供水问题及解决办法探讨     

白巴特尔  巫美荣  李和平 《中国农村水利水电》2009,(2):63-65

我国牧区总面积426.62km2,约占国土总面积的44.4%。牧区主要分布在西部和北部,大部分是自然条件比较恶劣的地区。水对人的生命和健康至关重要。科学研究表明,人体的59%～66%是由水组成的。要维持人的健康基本需求,每人每天至少要得到20L安全饮用水。加上其他日常生活用水,每人每天大约需要50L水。目前,全球每6人中有1人不能持续获得安全饮用水。发展中国家80%的发病及死亡与水有关。在中国,通过饮水发生和传播的疾病就有50多种。要减少疾病,提高健康水平,最行之有效的措施就是使所有人得到安全的饮用水和合格的卫生条件。牧区安全供水有其自身固有的特点,同农村安全饮水还存在着一定的差别。列举了牧区安全供水的特点及存在的问题,探讨解决这些问题的一些途径方法。  相似文献   

北京市城区冷季型草坪节水灌溉制度研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

蔺艳  白淑媛  刘婴谷 《节水灌溉》2009,(8)

对几种不同的草坪灌溉制度进行中试研究,结果表明:不同水文年份需制定不同的灌溉制度,且灌溉制度的计划灌水量应小于草坪草的需水量,灌溉次数则可根据绿地实际情况而灵活调整.  相似文献   

浅谈无公害蔬菜的发展对策     

白建新 《农机推广与安全》2009,(7):60-61

介绍了无公害蔬菜的研究与生产现状,指出应研制高效无毒农药、总结综合防治技术、探索治理重金属污染办法、对硝酸盐污染进行研究,并对无公害蔬菜的发展提出了两点对策。  相似文献   

普通玉米品质育种的现状分析与综合评价   总被引：33，自引：6，他引：33       下载免费PDF全文

白永新  陈保国  张润生  卢桂花  王早荣  李全泽 《玉米科学》2003,11(2):050-053

本文通过对1998～2001年国审品种品质现状分析和比较,初步探明我国近年来普通玉米的个别品质性状有所改善.综合平均来看,淀粉含量在逐年提高,而蛋白质含量有缓慢下降的趋势,脂肪含量逐步提高,赖氨酸含量则基本稳定在一个较低的水平.提出了改善和提高普通玉米品质的几点建议,以供育种者参考。  相似文献