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11.
人工抗凋亡蛋白PTD-Bcl-x L能保护多种因素引起的细胞异常凋亡,为了获得高纯度Bcl-x L与PTD(Protein transduction domains)的融合蛋白,首先采用TRIzol法提取SD大鼠肝脏总RNA,将RNA反转录为c DNA,设计引物以c DNA为模板,PCR扩增Bcl-x L基因,构建p UM19-T-Bcl-x L质粒,并对质粒双酶切鉴定和测序鉴定;其次设计包含PTD序列的Bcl-x L引物,以测序正确的p UM19-T-Bcl-x L质粒为模板,PCR扩增PTD-Bcl-x L序列,将扩增序列克隆入p ET28a载体,构建PTD-Bcl-x L蛋白的原核表达质粒p ET28a-PTD-Bcl-x L,并对p ET28a-PTD-Bcl-x L载体双酶切鉴定和测序鉴定;将p ET28a-PTD-Bcl-x L重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对IPTG诱导融合蛋白表达的浓度和诱导时间进行了优化;SDS-PAGE分析表达蛋白的可溶性情况,在变性条件下用Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白;最后用SDS-PAGE、Western Blot及质谱对融合蛋白进行鉴定。结果表明:双酶切p UM19-T-Bcl-x L质粒出现约774 bp大小条带,p UM19-T-Bcl-x L质粒测序结果与NCBI数据库比对序列一致,表明成功构建p UM19-T-Bcl-x L质粒;双酶切p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒出现约744 bp大小条带,p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒测序结果与预期序列一致,表明成功构建了p ET28a-PTD-Bcl-x L原核表达载体;在IPTG诱导下p ET28a-Bcl-x L重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出36 k Da大小蛋白,最优IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L,最佳IPTG诱导时间为6 h;SDS-PAGE电泳显示融合蛋白主要出现在菌液超声后的沉淀里,以包涵体形式表达,经Ni-NTA琼脂纯化获得了高纯度的融合蛋白;Western Blot和质谱鉴定证明IPTG诱导表达蛋白和纯化的融合蛋白为PTD-Bcl-x L蛋白。纯化得到了PTD-Bc L-x L融合蛋白,推进了PTD-Bcl-x L蛋白在猪、牛等家畜精液冷冻保存的应用进程。 相似文献
13.
14.
研究旨在探讨日粮添加富利宝和谷氨酸对大约克×长白二元杂种猪肥育与屠宰性能及肉品质的影响。选取体重约51kg的"大×长"二元杂12头,随机分2组,每组设3个重复,每个重复2头,对照组喂常规(对照)日粮,试验组日粮是在对照日粮的基础上添加0.1%富利宝和0.6%L-谷氨酸。试验期共62d,试验结束后,从每个重复中选取1头体重相似的试验猪进行屠宰和肉品测定。结果表明:两组试验猪的肥育性能无显著差异(P0.05);但试验组猪背膘厚显著高于对照组(P0.05),相反,对照组眼肌面积、肉色和系水力显著高于试验组(P0.05);试验组猪眼肌的谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、脯氨酸、缬氨酸和精氨酸含量显著高于对照组(P0.05),其总氨基酸和总鲜味氨基酸含量也分别较对照组提高了5.85%(P0.05)和6.87%(P0.05);此外,眼肌的肌内脂肪也由对照组的5.11±0.24%提高到8.86±0.52%(P0.05)。由此可见:日粮添加富利宝和谷氨酸虽然未能提高"大×长"二元杂种猪的肥育和屠宰性能,但可显著提高肌肉总氨基酸、总鲜味氨基酸和肌内脂肪的含量,从而改善其肉质。 相似文献
15.
本试验旨在饲粮中添加富利宝或氨基酸复合制剂,观察其对猪的生长、屠宰性能及肉品的影响。将6头长约杂种去势小公猪分为3组。第1组喂常规饲粮作对照,试验Ⅰ组饲粮是在常规饲粮中添加0.1%的富利宝,试验Ⅱ组饲粮由常规饲粮加0.36%复合氨基酸制剂构成。饲养2个月后屠宰。结果表明:试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的平均日增重比对照组分别提高17.7%和6.73%;但三个组之间的料重比没有差异;试验Ⅰ、Ⅱ组的屠宰率分别比对照组提高2.7%和1.72%,瘦肉率也分别比对照组提高了3.5%和7.97%;两组的肉脂比也明显高于对照组;试验Ⅰ组的肌间脂肪明显高于对照组;但试验Ⅱ组的肌间脂肪和肌苷酸含量明显低于对照组。可见添加两种添加剂均可以提高猪的平均日增重和主要屠宰性能,但不能提高肌苷酸含量,氨基酸复合制剂也不能提高肌间脂肪含量。 相似文献
16.
40%甲杀乳油是甲胺磷和杀螟松混配而成的杀虫剂,为了弄清其混配后每力大小,我们对其进行了室内毒力测定。结果表明了甲杀乳油对夹竹桃幼蚜触杀毒力LC50为9.47PPm,共赛系数IOO.7O,混配后的毒效与单用的毒效相似,为相加作用。一、材料与方法1.共试药剂()50o甲腔磷乳油2)50%杀螟极乳油3)40%甲杀乳油(甲胺磷,杀唤松有效成分1:1)三种农药均由江西省赣南农药厂生产。2.供试由源夹竹桃蚜,APhisneriiBoyerdeFonscolombe来自校园夹竹桃树,经室内饲养24小时。3试验方法在中90mm培养血内垫湿滤纸一张,从夹竹桃上剪下带有幼… 相似文献
17.
由于我省棉苗期低温多雨,棉苗立枯病,炭疽病发病严重,在常年使用多荫灵等常现杀菌剂的地方,对棉花苗期病害防治效果差,为了解决这个问题;改用抗枯灵、络氨钢进行防治。现将试验结果整理如下:一、材料与方法(-)供试药剂1.25%抗枯灵水剂(11西临价永会化工厂)223%络氨铜水剂(111西临倚精细化工厂)3.25%多南灵可湿性粉剂(江苏无锡农药厂)(二)试验方法试验设了个药剂处理和一个空白对照,采用随机区组排列,重复3次,每小区而积0.l亩。1.拌种试验1993年4月,在江西农业大学植保系教学试验站棉田进行,先用抗枯灵,络氨… 相似文献
18.
19.
在飞船搭载西瓜种子(品种浙蜜2号高代自交系)SP1(航天1代)试验的基础上对SP_2(航天2代)的试验结果进行分析,研究了各SP2株系植物学性状和果实经济性状等的变异和遗传稳定性。结果表明:西瓜各SP2株系果实大小及中心可溶性固形物含量继续发生变异,尚未稳定,有91.6%的株系平均中心可溶性固形物含量高于对照,某些株系内部植株果实表面产生蜡粉、种子变大等变异,其他性状如植物学性状等与SP_1及对照相似,未发生变化。 相似文献
20.