环丙沙星单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定     

职爱民刘庆堂  李青梅杨苏珍柴书军  赵东张志杰  邓瑞广张改平 《中国农学通报》2010,26(18):12-16

用EDC法将BSA和OVA分别和环丙沙星（Ciprofloxacin, CIP）偶联作为免疫原和包被原,并经紫外扫描 (UV Scan)、聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定。用合成的BSA-CIP免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌CIP单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备CIP mAb,对CIP mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表明BSA-CIP人工抗原偶联成功;免疫的3只小鼠血清抗体效价均达到10-4;其中2号小鼠血清CIP抑制效价较高且IC50最低,达48.59μg/L,融合后筛选出Z3G12B3和Z2H8C10两株敏感特异的杂交瘤细胞,其两株细胞培养上清液效价为1:512,腹水效价为1:2.56×105,Z3G12B3株对CIP的IC50为2.47μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03％的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性。本试验获得了高效价、敏感、特异的抗CIP mAb,为CIP残留ELISA检测试剂盒和试纸条的建立奠定了坚实的基础。  相似文献   

抗庆大霉素单克隆抗体的制备及其初步应用#br#   总被引：4，自引：4，他引：0  

职爱民  李青梅  刘庆堂  刘宣兵  杨继飞  杨苏珍  柴书军  杨艳艳  邓瑞广  张改平 《中国农业科学》2010,43(12):2584-2589

 【目的】制备抗庆大霉素(gentamicin,GM)的高亲和力特异性单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性,为进一步研究GM快速检测试剂盒和试纸条打下基础。【方法】用EDC法将BSA和OVA分别和GM偶联作为免疫原或包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。用合成的BSA-GM免疫Balb/c小鼠,经过4次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌GM 单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备GM mAb,对GM mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定,;应用阻断ELISA试验原理组装GM-Kit,并对鲜奶中添加的GM标准样品进行测定。【结果】SDS-PAGE电泳鉴定表明BSA-GM人工抗原偶联成功;免疫的3只小鼠血清抗体效价均达到10-3;其中2号小鼠血清GM抑制效价较高且IC50最低,达17.28 ng•mL-1,融合后筛选出5E2-D7、1A3-A9、5E2-A12和2A6-B5共6株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1﹕1600、1﹕800、1﹕800和1﹕800,腹水效价分别为1﹕2.05×107、1﹕5.12×106、1﹕2.56×106和1﹕2.56×106,5E2-D7株对GM的IC50为0.30 ng•mL-1,与链霉素、卡那霉素等其他氨基糖苷类抗生素无交叉反应性;检测鲜牛奶样的平均添加回收率分别为96.0%,平均变异系数均低于15%。【结论】本试验获得了高效价、敏感、特异的抗GM mAb,为GM残留检测奠定了坚实的基础。  相似文献   

2,4-D的毒性与残留检测方法研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

龚芳  席俊  职爱民  胡骁飞  邓瑞广  陆启玉 《河南农业科学》2011,40(8):40-43

2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)是常用的除草剂和植物生长调节剂,并被广泛应用于提高水果品质和延长保鲜时间,但其毒性和残留问题日益受到人们的重视。为了给2,4-D的检测提供方便,从免疫毒性、生殖毒性及其他毒性方面综述了其毒副作用,简要叙述了其检测方法,如高效液相色谱法、气象色谱法、联用技术、免疫学检测方法等。  相似文献   

湿态发酵蛋白饲料饲喂奶牛试验报告     

张光勤  赵振升  职承平  曲敬和  李红雷  张志中  范军红 《中国奶牛》2012,(23):53-54

湿态发酵蛋白饲料是玉米经酵母发酵、提取酒精后,又经益生菌发酵、密封包装的饲料产物,其可溶性好,易消化,易吸收,蛋白含量高。本文通过对奶牛进行饲喂试验,发现奶牛日饮4kg该饲料后,单产提高1.8kg,每头牛日增利润0.34元、年增利润100多元,经济效益显著,且乳成分无明显变化。  相似文献   

百菌清人工抗原的合成及多克隆抗血清的制备     

王玲玲  职爱民  胡骁飞  邓瑞广  侯玉泽  张改平 《西北农业学报》2012,21(9):19-23

将百菌清(CTN)进行化学修饰后引入羟基活性基团,合成具有半抗原结构特征的百菌清衍生物(CTN-OH);采用N,N-羰基二咪唑法(CDI)将CTN-OH与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫抗原CTN-BSA和包被抗原CTN-OVA,用紫外分光光度法(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;通过动物免疫试验获得鼠源多抗血清,并使用间接ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行鉴定。结果表明,半抗原CTN-OH与载体蛋白偶联成功;受免3只小鼠的效价均达1∶12 800,且2号小鼠对CTN的IC50为93.593μg/L,成功获得高效价、高敏感性、特异性强的鼠源多克隆抗血清,为CTN单克隆抗体制备及快速检测方法的建立奠定基础。  相似文献   

小麦苗期铅耐受性的全基因组关联分析     

职蕾  者理  孙楠楠  杨阳  Dauren Serikbay  贾汉忠  胡银岗  陈亮 《中国农业科学》2022,55(6):1064-1081

[目的]随着工业化的推进,重金属尤其是铅对耕地的污染已成为世界性问题.小麦作为主要粮食作物,其健康生产对保障粮食安全意义重大,筛选铅耐受性强和铅低积累小麦品种、挖掘相关调控基因或QTL区间,为耐铅种质创新和揭示小麦铅耐受性遗传机制奠定基础.[方法]采用140 mg·kg-1的硝酸铅溶液对102份小麦品种(系)进行苗期胁...  相似文献   

不同品种猪在不同生理阶段骨骼肌葡萄糖转运体和胰岛素受体表达的发育性变化     

刘文佐  左建军  代发文  叶慧  曹庆云  周响艳  邹仕庚  黄志毅  职爱民  冯定远 《动物营养学报》2017,29(2)

本试验旨在研究不同品种猪在不同生理阶段骨骼肌葡萄糖转运载体(GLUT)1、GLUT4和胰岛素受体(IR)mRNA表达的发育规律.试验以1、7、30、60、90和150日龄蓝塘和长白两品种猪背最长肌、半膜肌和半腱肌组织样品cDNA为模板,采用实时荧光半定量PCR的方法,检测猪GLUT1和GLUT4 mRNA在不同骨骼肌中的表达模式.结果显示:1)1～ 150日龄蓝塘和长白猪背最长肌、半膜肌和半腱肌GLUT1 mRNA表达存在相似的发育变化规律,在1日龄时相对表达丰度最高.2)1 ～ 150日龄蓝塘和长白猪半膜肌和半腱肌GLUT4 mRNA相对表达丰度随日龄呈波形式变化,变化速度和程度存在品种差异.1日龄和150日龄时蓝塘猪背最长肌GLUT4mRNA相对表达丰度低于同日龄长白猪(P>0.05),而在其余日龄时高于同日龄长白猪(P>0.05).3)蓝塘和长白猪背最长肌、半膜肌和半腱肌IR mRNA相对表达丰度在1和30日龄时表现出较高水平,而在7、60、90和150日龄时无显著差异(P>0.05);同日龄蓝塘和长白猪之间IR mRNA相对表达丰度无显著性差异(P>0.05).结果表明:猪骨骼肌GLUT1 mRNA的表达在不同生理阶段存在差异,猪骨骼肌GLUT4 mRNA的表达在不同品种和生理阶段存在显著差异,且其与IR mRNA的表达相关性较弱,无明显规律.  相似文献   

创造优良环境 建设生态文化          下载免费PDF全文

张玲玲  孟宪敏  狄恩红  职庆利  刘喜存 《中国城市林业》2009,7(4):54-56

文章根据本地的地域特色,提出了建设生态文化的思路,并从林业生态、林业产业、科技支撑、太行和黄河、海河文化以及宣传五个方面阐述了创造优良环境条件,建设生态文化。    相似文献   

食用菌苗丝体深层培养及产品开发研究     

郭成金  李爱民 《食用菌》1996,18(5):40-40

  相似文献   

灰斑古毒蛾核型多角体病毒结构多肽及核酸的研究     

戴美学  祖爱民 《中国生物防治》1996,12(3):117-122

多角体蛋白结构多肽分析结果表明，ＯｅＮＰＶ多角体中可能有碱性蛋白酶存在；纯化病毒粒子ＳＤＳ－ＰＡＧＥ胶板用考马斯亮蓝和银染法分别检出１８和２２种多肽，分子量范围１．０８×１０４～１２．２×１０４Ｄ，其中５种主要多肽；核衣壳检出５条多肽，主要多肽分子量为３１０００±６５０Ｄ；ＰＡＳ法未检出ＯｅＮ－ＰＶ各结构多肽中有糖蛋白存在；ＯｅＮＰＶ－ＤＮＡ经ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨＩ单酶解分别产生９、１２、１０个片段，经ＥｃｏＲＩ／ＨｉｎｄⅢ双酶解产生２０个片段，求得ＯｅＮＰＶ－ＤＮＡ的平均分子量为６５．８×１０６Ｄ，ＯｅＮ－ＰＶ－ＤＮＡ大多呈缠绕卷曲线形分子，少数为环状分子，平均长度１９．７μｍ。  相似文献