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为了给延边奶山羊转基因核移植及乳腺生物反应器研究提供足够且状态良好的细胞,采取延边奶山羊耳部组织块,利用组织块贴壁法进行原代培养和传代培养,对于纯化了的成纤维细胞观察其生长状态,并对4代以后的成纤维进行生长曲线、核型分析,并对细胞进行冷冻复苏试验,检测细胞活力.结果表明,4～13代体外培养成纤维细胞的细胞形态及核型基本正常,13代以后,细胞染色体变异比例增加,15代以后,细胞生长速度减慢;冷冻复苏后的细胞除生长速度减慢外,其它细胞生物学特征均正常,基本符合体细胞克隆、转基因等试验的基本要求,可以用于试验研究. 相似文献
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文章旨在研究输卵管上皮细胞共培养对小鼠胚胎内部活性氧含量影响,探索共培养克服胚胎发育阻滞机理。用小鼠输卵管上皮细胞对合子进行共培养,DCFDA测定胚胎内部H2O2含量,以外源性H2O2对输卵管上皮细胞和胚胎进行阴性对照,用Hochest 33342和PI染色检测细胞凋亡情况,以MTT法测定输卵管上皮细胞活力。结果表明,共培养能显著提高2-细胞发育率、降低胚胎内部H2O2含量(P<0.05),提高4-细胞率及降低胚胎内部H2O2含量(P>0.05)。外源性H2O2能够使合子凋亡甚至死亡,导致共培养细胞活力下降(P<0.05),未能显著地促进胚胎发育(P>0.05)。结果表明共培养能够降低胚胎细胞内部活性氧,克服胚胎发育阻滞,促进胚胎发育。 相似文献
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试验旨在研究无抗粗饲料饲喂的散养黑猪肌肉脂肪酸(fatty acids)组成及含量。用气相色谱法测定猪肌内脂肪酸组成及含量。结果显示:在散养黑猪肌肉中分离鉴定出14种脂肪酸,其主要成分为棕榈酸(21.13%)、硬脂酸(11.17%)、油酸(37.06%)、亚油酸(22.15%)、亚麻酸(1.84%),其中饱和脂肪酸占34.48%,单不饱和脂肪酸占39.92%,多不饱和脂肪酸占24.99%。研究结果表明,无抗粗饲料饲喂的黑猪颈部肌肉脂肪酸相对比例和含量良好,对肉品开发和选育具有重要意义。 相似文献
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为了探究与牛骨骼肌发育相关的共表达网络及核心转录本,挖掘牛骨骼肌在发育过程中的调控转录本,试验采用新的fastp+kallisto+Sleuth分析方法对牛骨骼肌转录组测序数据进行分析,通过转录组测序分析筛选出两组肌肉样本差异表达的RNA,对其进行GO功能注释分析和KEGG信号通路富集分析、WGCNA分析和GSEA富集分析。结果表明：转录组测序共鉴定出32 919个转录本,按照是否满足|lbFC|≥2、P<0.05的条件共筛选出457个差异表达转录本,其中上调转录本303个,下调转录本154个。457个差异表达转录本共涉及106个GO功能注释条目和14个KEGG信号通路,差异表达转录本主要富集在与细胞周期、细胞生长密切相关的基因功能注释和信号通路中。457个差异表达转录本被划分到显著相关的3个转录本模块,棕色模块有83个转录本,蓝色模块有93个转录本,绿色模块有111个转录本,并且筛选出10个核心转录本。核心转录本多数集中在细胞黏附分子、AMPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、肌动蛋白细胞骨架的调节等与细胞周期、细胞生长密切相关的通路中。说明牛骨骼肌发育受基因转录水平调控的影... 相似文献
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试验旨在探究茶树油饲料添加剂(颗粒型)对保育猪生长性能的影响。试验动物选取小保育猪50头和大保育猪36头,小保育猪分为5组,每组10头,对照组饲喂基础饲料,试验组饲喂基础饲料中分别添加50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg茶树油的试验饲料。大保育猪分为6组,每组6头,对照组饲喂基础饲料,试验组饲喂基础饲料中分别添加500 mg/kg、1000 mg/kg、2000 mg/kg、4000 mg/kg、6000 mg/kg茶树油的试验饲料,试验期为60 d。结果表明,在小保育阶段,添加50 mg/kg茶树油饲料添加剂组在增重方面显著高于对照组(P<0.05);在大保育阶段,添加500 mg/kg茶树油添加剂组的试验组猪只增重最高,料重比最低;但是在大保育猪,添加茶树油添加剂的量达到6000 mg/kg时,料重比最高,并且显著低于对照组(P<0.05),说明在保育猪的不同阶段添加适量的茶树油饲料添加剂,可提高猪只的生长性能,降低料重比。 相似文献
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旨在研究WY14643对小鼠早期胚胎发育的影响,探讨WY14643对早期胚胎抗氧化损伤的机理。通过H2O2诱导建立胚胎氧化损伤模型,添加WY14643对胚胎进行体外培养,DCHFDA测定胚胎内部H2O2含量,分别用超氧化物歧化酶(SOD)和微量丙二醛试剂盒测定胚胎不同发育阶段SOD活性和丙二醛MDA含量,并观察后续胚胎发育情况。结果表明:(1)不同浓度WY14643处理2h后,0.1μmol·L-1 WY14643处理组4-细胞率、囊胚率显著高于其他各组(P<0.05);(2)经0.1μmol·L-1 WY14643和H2O2联合处理后,其胚胎发育率显著高于单独H2O2处理组和对照组(P<0.05);(3)DCHFD荧光检测发现,WY14643添加组胚胎内部H2O2水平显著低于其他各组(P<0.05);(4)经SOD、MDA检测,发现添加WY14643胚胎内部各时期SOD水平显著高于其他各组(P<0.05),MDA水平显著低于其他各组(P<0.05)。综上表明,氧化应激对早期胚胎发育是不利的,WY14643通过增加抗氧化酶SOD活性、降低脂质损伤等途径减少胚胎内部ROS,增加抗氧化能力,促进胚胎在体外更好地发育。 相似文献
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旨在研究长链非编码RNA(lncRNA)对牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。本研究以体外分离培养的鲁西黄牛胎牛原代骨骼肌卫星细胞为试验材料,体外诱导成肌分化,以前期高通量测序筛选的肌肉组织特异性表达lncRNA为靶标,通过RACE技术对其进行全长扩增,命名为lncbMD,对lncbMD进行生物信息学分析和亚细胞定位。收取增殖期和分化期第1、2、3天的细胞,提取RNA(每组设置4个重复)或蛋白质(每组设置3个重复),通过qRT-PCR检测lncbMD在牛骨骼肌卫星细胞分化进程中不同时期的表达情况。根据lncbMD的序列设计合成干扰RNA,转染牛骨骼肌卫星细胞干扰lncbMD的表达,利用EdU试验检测细胞增殖情况,qRT-PCR技术检测lncbMD干扰效果、lncbMD的mRNA表达水平,增殖标志因子Pax7、Cyclin D1以及分化标志因子MyoG、MyHC的mRNA表达水平,荧光倒置显微镜观察细胞生长情况。结果显示,lncbMD全长序列1 902 nt,位于牛基因组23号染色体上,不具有编码潜能,是一条未报道的lncRNA。在牛骨骼肌卫星细胞与肌管中均主要存在于细胞核,在牛骨骼肌卫星... 相似文献
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为了探究烟酰胺(NAM)对牛骨骼肌卫星细胞(BSMSCs)增殖与分化的影响,试验以体外培养的BSMSCs成肌分化模型为研究对象,用0,1,2,4,8 mmol/L烟酰胺处理BSMSCs(对照组及1,2,4,8 mmol/L烟酰胺组),采用CCK-8法筛选烟酰胺对BSMSCs作用的最适浓度,后续试验均以不添加烟酰胺作为对照组,最适浓度作为试验组,采用EdU试剂盒检测最适浓度烟酰胺对BSMSCs增殖的影响;光学显微镜下观察最适浓度烟酰胺处理的BSMSCs分化24,48,72小时时的肌管形态,采用Western-blot检测BSMSCs中肌球重链蛋白(MyHC)和肌原蛋白(MyOG)的表达水平,分析烟酰胺对BSMSCs分化的影响。结果表明：与对照组比较,BSMSCs的OD450值随着烟酰胺浓度的上升而下降,4 mmol/L烟酰胺组OD450值显著降低(P<0.05),8 mmol/L烟酰胺组OD450值极显著降低(P<0.01),但8 mmol/L烟酰胺组的细胞存活率低于50%,超过药物对细胞的半数致死浓度,最终以... 相似文献