几种新引进花卉和观赏植物病害及风险初探     

孔宝华  王建光  关鼎儒  白松  陈海如 《植物检疫》2006,20(5):300-303

概述了国内外红掌、海里康、肖竹芋和鹤望兰病害种类及我国的研究概况，并对病害的潜在风险问题进行了探索。  相似文献   

烟草疫霉的快速分子检测     

高乔芬  秦西云  方敦煌  莫笑晗  杨根华  陈海如  蔡红 《云南农业大学学报(自然科学版)》2012,27(2):156-160

 根据烟草疫霉与其他疫霉菌ITS序列的差异设计了1对寡聚核苷酸引物,用于烟草疫霉的PCR检测。结果表明,在优化的反应体系与扩增条件下,该对引物表现出强特异性,只在烟草疫霉为模板的扩增体系中具有1条660bp的条带。利用此特异性引物可稳定地从含有烟草疫霉的土壤及其发病组织中检测出病原菌。本实验提供并完善了一套快速检测烟草疫霉的方法和技术,特别对土传病害的准确诊断与快速检测在实践和理论上具有重要意义。  相似文献   

云南烟草赤星病菌及近似种rDNA ITS序列分析     

胡中会#  赵立华#  严恩平  范静华  孔宝华  陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》2012,27(5):670-677

 为了进一步研究云南省烟草赤星病病原的系统发育关系,提取28份供试菌株的菌丝基因组DNA,进行rDNA ITS序列及两侧ITS序列扩增。28个供试菌株与GenBank中登录的链格孢属7个种（包括5个小孢子种Alternaria citri,A．alternata,A．longipes,A．mali,A．gaisen和2个大孢子种A．porri,A．solani）14个菌株的序列进行聚类分析：42个菌株明显地分成两支,供试菌株与5个小孢子种聚为一个分支,序列同源性高达99％～100％,没有明显的地域性差异;但另2个大孢子种聚为单独的一支,明显地与供试菌株和其他5个小孢子种区分开。rDNA ITSl 58S ITS2序列在相对保守的基础上又存在一定变异,在一些菌物属的研究中可作为分类鉴定、分子标记、系统发育的重要依据,但通过对世界各地Alternaria菌株序列的分析发现,rDNA ITS1 58S ITS2仅能将大孢子种和小孢子种分开,还不能作为区分不同地域不同来源菌株的标准。  相似文献   

烟草扭脉病毒部分基因组特征及其分类地位分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

兰平秀  程建勇  李凡  蔡红  陈海如 《农业生物技术学报》2008,16(1):177-178

通过RT-PCR从烟草丛顶病发病烟株总RNA中获得烟草扭脉病毒（Tobacco vein distorting virus,TVDV）基因组部分序列。序列分析显示该片段全长1655bp,共包含TVDV的部分RdRp基因、完整的CP基因和完整的MP基因。其中RdRp基因与CP基因的间隔区（IR）长201nts,符合马铃薯卷叶病毒属病毒的归属依据;对RdRp、CP、MP基因以及IR序列的对比分析,显示了TVDV与黄症病毒科马铃薯卷叶病毒属病毒的较高同源性。根据三个ORF编码的氨基酸序列构建的分子同源树的分析,也都显示了TVDV与黄症病毒科马铃薯卷叶病毒属病毒的同源性最高,进一步证实了TVDV应该是黄症病毒科马铃薯卷叶病毒属的确定成员。  相似文献   

云南烟草丛枝症病害研究 V传染途径     

李凡  吴建宇  秦西云  钏相俊  杨程  蔡红  杨根华  孔宝华  宋利明  陈观廉  李天飞  陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》1999,(1)

在隔离环境中,按植物病毒学的标准程序,测试云南烟草丛枝症病害的传染途径,结果表明：云南烟草丛枝症病害具有广泛的传染途径,可以通过机械传染（嫁接、摩擦）和介体传染（菟丝子、蚜虫、烟盲蝽、叶蝉）等方式传播．  相似文献   

云南烟草丛枝症病害研究 Ⅶ 激素的变化   总被引：1，自引：0，他引：1  

程建勇  吴建宇  秦西云  钏相俊  杨程  毛自朝  李凡  杨泮川  宋立明  陈观廉  李天飞  陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》1999,(2)

采用植物激素ＥＬＩＳＡ测定试剂盒,对比测定了烟草感染丛枝症的病株与健株体内细胞分裂素（ｉＰＡ和ＺＲ）与生长素（ＩＡＡ）含量的变化．结果表明：生长素含量在整个发病期间健株都较高于病株,细胞分裂素含量在发病初期明显高于健株,随后呈下降趋势并趋于稳定,Ｃ／Ａ值在病程中相对处于较高水平．  相似文献   

利用免疫荧光标记技术分析TVDV在介体蚜虫消化道内的分布     

熊锋  吴维  毛倩卓  刘琴利  陈海如  魏太云  李凡 《云南农业大学学报(自然科学版)》2018,(2)

【目的】制备TVDV CP蛋白抗血清,明确TVDV侵入蚜虫消化道的部位以及TVDV在蚜虫体内的分布。【方法】首先构建原核表达载体p DEST17-TVDV-CP,所得载体转化到Rocceta菌株中诱导表达TVDV CP蛋白,收集目的蛋白免疫小鼠制备TVDV CP特异性抗血清。再利用制备的抗血清,通过免疫荧光技术标记TVDV,对TVDV在介体蚜虫中的分布解剖观察。【结果】TVDV CP蛋白在Rocceta菌株中,IPTG溶度为1、0.5、0.2、0.1 mmol/L,温度为28℃都能成功诱导表达;所得抗血清对TVDV侵染蚜虫总蛋白进行western blot检测,检测到大小约24 ku特异性条带;对免疫荧光标记的蚜虫消化道进行共聚焦观察,在蚜虫中肠上皮细胞检测到标记的TVDV荧光信号。【结论】制备了TVDV CP特异性抗血清,明确了TVDV分布于介体蚜虫消化道的中肠,由介体蚜虫以循回方式传播。  相似文献   

烟草赤星病菌遗传多样性ISSR和RAPD标记比较分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

胡中会赵立华  孔宝华陈海如  范静华刘飞李小鹏  蔡红杨根华  秦西云方敦煌 《中国农学通报》2011,27(24):262-267

对分离出的链格孢菌株用ISSR和RAPD分子标记技术分析研究其遗传多样性,比较2种分子生物学方法在链格孢遗传分析中的优劣,为研究烟草赤星病菌遗传多样性及烟草抗病品种的培育奠定基础。采用ISSR和RAPD分子标记方法对来自不同地区的28份烟草赤星病菌进行遗传多样性分析,筛选出10个ISSR引物和10个RAPD引物;ISSR扩增出多态性条带112条,多态性条带比率为86.82%,菌株间相似性系数为0.53~0.97;RAPD引物扩增出多态性条带70条,多态性条带比率为81.39%,菌株间相似性系数为0.57~0.94。用SPSS 17.0 软件对2种标记遗传距离进行相关性分析,发现2种分子标记结果呈显著正相关,表明2种分子标记方法都适合于烟草赤星病菌遗传多样性研究,ISSR是一种多态性优于RAPD的标记技术。根据2种标记的结果,利用NTSYS软件按UPGMA方法进行聚类分析,发现烟草赤星病菌遗传多样性与地理差异没有显著相关性。  相似文献   

樱桃花变绿病植原体的分子鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

郑晓慧  朱国翱  王连春  朱建勋  蔡红  陈海如 《植物病理学报》2012,42(5):546-550

 植原体(phytoplasma)是一类没有细胞壁,不能人工培养,存在于植物筛管细胞中的类似植物病原细菌的原核生物。迄今为止,世界各地报道的1 000余种植物病害与植原体有关,引起的症状主要包括丛枝、黄化、花变绿、花变叶、花器退化等。  相似文献   

TBTV卫星RNA不同分离物的序列测定及系统进化分析*     

尹朝先  包〓娜  冉志伟  陈海如  李〓凡 《云南农业大学学报(自然科学版)》2010,25(6):797-802

  利用RT-PCR方法对烟草丛顶病毒（tobacco bushy top virus,TBTV）卫星RNA不同分离物进行扩增和克隆测序,同时运用DNAMAN,MEGA,ClustalX等生物软件对TBTV和其它幽影病毒的卫星RNA核苷酸序列进行同源性比较,构建了幽影病毒属成员卫星RNA的系统进化树。E结果显示：TBTV不同分离物卫星RNA的核苷酸同源性为792%～990%。它们与幽影病毒属其它成员卫星RNA的核苷酸同源性为325%～441%。通过构建幽影病毒属成员卫星RNA的系统进化树可以看出：TBTV的卫星RNA与GRV的卫星RNA亲缘关系最近,与CMoMV的亲缘关系最远。  相似文献