黄芪多糖油乳佐剂新城疫灭活苗对鸡免疫功能的影响     

王学斌  张志民  任向阳  魏战勇  崔保安 《河南农业科学》2007,(4):103-105

将黄芪多糖(APS)添加到鸡新城疫油乳剂疫苗中作为免疫佐剂,分别用盐酸左旋咪唑、黄芪多糖粉剂、黄芪多糖针剂和黄芪多糖免疫佐剂等与鸡新城疫油乳剂疫苗同时使用,探讨黄芪多糖免疫佐剂对鸡免疫功能的影响。结果表明,免疫佐剂均提高了疫苗的免疫力,其中,与疫苗混合后作为免疫佐剂使用的黄芪多糖可明显促进抗体产生,提高脾和法氏囊指数以及E-玫瑰花环形成率。  相似文献   

传染性喉气管炎病毒河南株TK基因的克隆与序列分析     

陈红英  崔保安  李新生  张书松  魏战勇  崔沛  金钺 《江西农业大学学报》2007,29(5):813-817

根据传染性喉气管炎病毒TK基因的核苷酸序列设计并合成一对引物,利用该对引物PCR扩增出鸡传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CGI、LTV-XY及以色列疫苗株TK全长片段,并进行克隆、测序。结果显示3株ILTV的TK基因全长均为1 183 bp,包含一个开放性阅读框(1 092 bp),编码363个氨基酸的多肽;3株ILTV TK基因核苷酸序列完全一致,并与GenBank收录的ILTV美国632强毒株、北京E2株TK基因完全一致,而与山东烟台株、英国Thorne强毒株和英国216株TK基因核苷酸同源性均为99.5%,与其他疱疹病毒TK基因核苷酸同源性在19.1%～27.2%之间。分子进化分析揭示了各毒株间的亲缘关系。  相似文献   

猪干扰素α和γ在杆状病毒中共表达及对PRRSV抑制作用   总被引：2，自引：0，他引：2  

王彦彬  孙向丽  魏战勇  陈红英  杨明凡  崔保安 《中国农业科学》2011,44(9):1931-1938

[目的]制备复合型猪干扰素α和γ进行应用抗病毒研究.[方法]本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码猪干扰素α和γ成熟蛋白基因插入供体质粒pFastBacDual,分别置于PH和P10启动子控制下,引入蜂素信号肽(honeybee melittin signal peptide,HBM)基因取代猪干扰素α和γ原有信号肽基因以实现分泌型表达,并在C端分别融合6个组氨酸标签以利于纯化.将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒.重组杆状病毒感染昆虫细胞,鉴定重组蛋白的活性.[结果]通过问接免疫荧光、Western-blot证明猪干扰素α和γ重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中均获得表达,表达产物主要分布在培养上清中.通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性,结果表明:昆虫细胞上清的抗病毒效价达到3.24×10<'7>U·mL<'-1>.在Marc-145细胞,昆虫细胞上清经2<'-11>稀释能够抑制100个TCID<,50>的PRRSV的致细胞病变作用.[结论]应用杆状病毒表达系统实现猪干扰素α和γ在昆虫细胞上分泌共表达,重组蛋白在细胞上对PRRSV具有抑制作用.  相似文献   

利用Real-time PCR技术检测猪细小病毒在PK-15细胞增殖动态研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

魏战勇  王学兵  陈红英  王亚宾  李厚伟  刘三阳  崔保安 《河南农业大学学报》2009,43(4)

将猪细小病毒HNI株接种于PK-15细胞,用TaqMan荧光定量PCR方法研究了猪细小病毒增殖的基本特征与规律.结果表明,在PK-15细胞中,病毒在接种后2 h开始增殖,在12～60 h增殖最为迅速,在60 h病毒达到增殖最高峰.研究还发现在6 h病毒开始释放,72 h达到最高峰.  相似文献   

生物信息学软件预测猪氨基肽酶N功能与结构     

贾燕  曹金山  魏战勇 《畜牧与饲料科学》2021,42(2):1-6

[目的]研究猪δ冠状病毒(PDCoV)入侵宿主细胞的感染机制,对其特异性受体猪氨基肽酶N基因编码蛋白功能与结构进行分析.[方法]通过多种生物信息学软件对pAPN蛋白的理化特性、亲疏水性、信号肽、跨膜区、糖基化位点、抗原表位、功能结构域及结构特征等进行预测分析.[结果]pAPN基因总长为2892 bp,编码963个氨基酸...  相似文献   

Taq Man实时荧光定量PCR检测猪伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用     

赵丽  崔保安  陈红英  魏战勇  赵玉丛 《中国预防兽医学报》2009,31(2)

根据猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成引物和探针,优化反应条件,建立实时定量荧光PCR方法.实验结果表明,当50 pmol/L的引物O.3μL和5 pmol/L的探针0.5μL时,反应体系获得的CT值较小,而荧光强度增加值最大;制作的标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系;可检测到相当于20拷贝/μL的病毒DNA;与猪细小病毒、圆环病毒和猪瘟病毒等不发生交叉反应;敏感性比常规PCR电泳检测高约100倍.该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点.  相似文献   

鸳鸯鸭MHC-Ⅰ α链基因的克隆与分子进化分析     

孙凯  李新生  崔保安  陈红英  魏战勇  张蕾  宋亚鹏  阮武营 《中国畜牧兽医》2009,36(12):60-62

根据GenBank中登录（登录号：AB115244）的鸭MHC-Iα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Iα链基因,并进行T-A克隆和序列测定。结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Iα链基因长909 bp,编码303个氨基酸的多肽,含一个完整的鸳鸯鸭MHC-Iα链胞外区成熟肽基因。序列比较发现,鸳鸯鸭MHC-Iα链基因与GenBank登录的其它品种的鸭MHC-Iα链核苷酸同源性为89.4%～91.0%,与人和其他动物的MHC-Iα链胞外区成熟肽基因的氨基酸同源性为11.1%～79.3%,表明MHC-Iα链胞外区成熟肽基因存在着种的多样性,且亲缘关系越近,同源性越高。鸳鸯鸭MHC-Iα链胞外区成熟肽基因的成功克隆为进一步研究鸭MHC-I基因表达、生物学活性和应用奠定基础。  相似文献   

鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因的克隆与分子进化分析     

孙凯  李新生  崔保安  陈红英  魏战勇  张蕾  宋亚鹏  阮武营 《中国畜牧兽医》2009,36(12):60-63

根据GenBank中登录(登录号:AB115244)的鸭MHC-Ⅰα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因,并进行T-A克隆和序列测定.结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基凶长909bp,编码303个氨基酸的多肽,含一个完整的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因.序列比较发现.鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因与GenBank登录的其它品种的鸭MHC-Ⅰα链核苷酸同源性为89.4%～91.0%,与人和其他动物的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的氨基酸同源性为11.1%～79.3%,表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种的多样性,且亲缘关系越近,同源性越高.鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的成功克隆为进一步研究鸭MHC-Ⅰ基因表达、生物学活性和应用奠定基础.  相似文献   

兽医临床诊疗技术课程教学改革与研究     

沈永恕  向瑞平  魏战勇  张华 《郑州牧业工程高等专科学校学报》2007,27(3):65-66

兽医临床诊疗技术是动物医学及其相关专业必修的专业基础课。其教学目的是紧紧是围绕培养高等技术应用型人才这一基本目标,分析和设计学生的知识、能力、素质,该课程在兽医临床课程体系中占有举足轻重的位置,对兽医专业学生技能培养起着至关重要的作用。近几年来,笔者从河南省畜牧业现状和发展需要出发,在兽医专业中对兽医临床诊疗技术教学内容、教学方法、实验实习及考试等方面进行了大胆的改革。1课程重组与调整根据现代畜牧业发展和兽医临床工作特点,我们删除原临床兽医学基础课程,将该课程的临床治疗技术与外科手术合并,与兽医临床诊断…  相似文献   

猪细小病毒HNZM01株NS1基因的克隆及序列分析     

郭东辉  王超群  王建辉  陈海宁  魏战勇 《河南农业科学》2012,41(3):137-141

为加强猪细小病毒病的监控,对分离的猪细小病毒(PPV)HNZM-01株NS1基因的序列进行了分析。设计一对特异性引物,以抽提的PPV HNZM-01株的DNA为模板,通过PCR反应扩增出大小约2.27kb的目的片段,并将其插入克隆载体pGEM-T Easy上,构建了重组质粒并测序。结果表明,NS1基因全长1 989bp,与预期目的片段大小一致。序列分析结果表明,PPV HNZM-01株的NS1基因与其他PPV毒株同源性在98.2%～99.8%,说明NS1基因具有高度保守性。同时应用ANTHEPROT软件分析了HNZM-01株NS1基因编码蛋白质的氨基酸组成和二级结构的含量、分布。结果表明,由于HNZM-01株中碱基的突变,造成其氨基酸序列与NADL-2株有所不同,形成的二级结构略有差异,但二级结构元件分布大致与NADL-2株相同。  相似文献